肺泡巨噬细胞在鲍曼不动杆菌疫苗快速免疫保护中的作用及分子机制研究
发布时间：2021-07-10 08:18
研究背景:2017年,WHO发布一项报告列出严重威胁人类健康的12种耐药细菌,其中鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）位列“榜首”。鲍曼不动杆菌感染人群主要为住院患者,尤其是重症病人,最主要的感染类型为肺炎。多重耐药鲍曼不动杆菌呈世界性流行,使其临床治疗面临严峻挑战。疫苗可从源头上控制耐药细菌的感染与传播,是一种经济有效的防治手段。鲍曼不动杆菌疫苗接种的目标人群主要为住院病人,疫苗接种时间窗口要求很短,希望在接种后3至7天快速起效,尽早产生免疫保护效果。本课题组前期研究发现,用鲍曼不动杆菌灭活全菌（Invactivated whole cell,IWC）疫苗单次滴鼻免疫小鼠可快速对致死剂量鲍曼不动杆菌攻毒起到100%的保护效果,IWC疫苗的这种快速保护效应在T、B细胞缺陷的Rag1-/-小鼠中同样存在,且宿主应答动力学研究显示疫苗免疫7天后攻毒引发了记忆性应答,提示IWC疫苗的快速免疫保护效应依赖于天然免疫记忆。天然免疫记忆是指天然免疫细胞可在初次免疫暴露后被代谢和表观重编程而储存免疫记忆,再次接受刺激时可呈现增强的宿主防御反应。mTOR-HIF-1α信号通路...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
鲍曼不动杆菌临床菌株在序列型和克隆复合物中的分布
陆军军医大学博士学位论文28表2-5.六株高毒力鲍曼临床株低剂量攻毒死亡率菌株死亡率(%)aSJZ1020SJZ2440SJZ2620SJZ280SJZ3020SJZ310a分别用六株高毒力鲍曼临床株气管插管感染小鼠，攻毒剂量1×107CFU(n=5)。2.3.3鲍曼不动杆菌高毒力临床菌株致死性小鼠肺炎模型建立考虑到SJZ24是30个分离株中毒力最强的，也属于最流行的ST2基因型，因此，我们选择SJZ24作为高毒力菌株代表，来进一步建立小鼠致死性肺炎模型，明确其感染特征，以用于后续疫苗评价。首先我们用梯度剂量的SJZ24对小鼠进行气管插管感染，以摸索合适的SJZ24感染剂量（最低全部致死剂量）。结果显示，感染1×106CFUSJZ24的小鼠无死亡，感染1×107CFU的小鼠出现中度临床症状，在感染第2天体重下降最多，死亡率为40%；存活下来的小鼠从第三天开始恢复；感染5×107、1×108CFU的小鼠均在48小时内死于感染（图2-2）。结果表明，鲍曼不动杆菌SJZ24可引起致死性小鼠肺部感染，且死亡率具有感染剂量依赖性。考虑到5×107CFU对小鼠的致死率已可达到100%，后续可以此作为感染剂量评价疫苗保护性。图2-2.小鼠对SJZ24肺部感染的易感性。Figure2-2.SusceptibilityofmicetoSJZ24lunginfection.Micewereintratracheallyinoculatedwith1×106,1×107,5×107,or1×108CFUofSJZ24(n=5).Thesurvivalrate,bodyweight,andclinicalscoreofmiceweremonitoredfor7days.
陆军军医大学博士学位论文30图2-3.小鼠气管插管感染致死剂量SJZ24后的定植病理及免疫应答。Figure2-3.Pathologyandimmuneresponseofmiceintratracheallyinfectedwith5×107CFUofSJZ24.(A)Bacterialburdensinthebloodandrespectiveorgansweredeterminedbyquantitativebacteriologyat4and24hpi.(B)Histopathologicalexaminationoflungsectionsat0h,4hpi,24hpi,and48hpi(aboutthetimeofdeath).Allimagesare200×magnification.(C)Cytokinelevelsinthelungtissueatdifferenttimepointspostinfectionweredeterminedbyreal-timePCR.(D)ImmunecellresponsesinBALFweredeterminedat0h,4hpi,and24hpi.Dataareexpressedasmeans±SEM,P<0.05(*),P<0.01(**),andP<0.001(***)comparedtothefirsttimepoint.
【参考文献】：
博士论文
[1]鲍曼不动杆菌灭活全菌疫苗快速免疫保护效应及机制研究[D]. 顾浩.中国人民解放军陆军军医大学 2019
本文编号：3275548
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：135 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
鲍曼不动杆菌临床菌株在序列型和克隆复合物中的分布
陆军军医大学博士学位论文28表2-5.六株高毒力鲍曼临床株低剂量攻毒死亡率菌株死亡率(%)aSJZ1020SJZ2440SJZ2620SJZ280SJZ3020SJZ310a分别用六株高毒力鲍曼临床株气管插管感染小鼠，攻毒剂量1×107CFU(n=5)。2.3.3鲍曼不动杆菌高毒力临床菌株致死性小鼠肺炎模型建立考虑到SJZ24是30个分离株中毒力最强的，也属于最流行的ST2基因型，因此，我们选择SJZ24作为高毒力菌株代表，来进一步建立小鼠致死性肺炎模型，明确其感染特征，以用于后续疫苗评价。首先我们用梯度剂量的SJZ24对小鼠进行气管插管感染，以摸索合适的SJZ24感染剂量（最低全部致死剂量）。结果显示，感染1×106CFUSJZ24的小鼠无死亡，感染1×107CFU的小鼠出现中度临床症状，在感染第2天体重下降最多，死亡率为40%；存活下来的小鼠从第三天开始恢复；感染5×107、1×108CFU的小鼠均在48小时内死于感染（图2-2）。结果表明，鲍曼不动杆菌SJZ24可引起致死性小鼠肺部感染，且死亡率具有感染剂量依赖性。考虑到5×107CFU对小鼠的致死率已可达到100%，后续可以此作为感染剂量评价疫苗保护性。图2-2.小鼠对SJZ24肺部感染的易感性。Figure2-2.SusceptibilityofmicetoSJZ24lunginfection.Micewereintratracheallyinoculatedwith1×106,1×107,5×107,or1×108CFUofSJZ24(n=5).Thesurvivalrate,bodyweight,andclinicalscoreofmiceweremonitoredfor7days.
陆军军医大学博士学位论文30图2-3.小鼠气管插管感染致死剂量SJZ24后的定植病理及免疫应答。Figure2-3.Pathologyandimmuneresponseofmiceintratracheallyinfectedwith5×107CFUofSJZ24.(A)Bacterialburdensinthebloodandrespectiveorgansweredeterminedbyquantitativebacteriologyat4and24hpi.(B)Histopathologicalexaminationoflungsectionsat0h,4hpi,24hpi,and48hpi(aboutthetimeofdeath).Allimagesare200×magnification.(C)Cytokinelevelsinthelungtissueatdifferenttimepointspostinfectionweredeterminedbyreal-timePCR.(D)ImmunecellresponsesinBALFweredeterminedat0h,4hpi,and24hpi.Dataareexpressedasmeans±SEM,P<0.05(*),P<0.01(**),andP<0.001(***)comparedtothefirsttimepoint.
【参考文献】：
博士论文
[1]鲍曼不动杆菌灭活全菌疫苗快速免疫保护效应及机制研究[D]. 顾浩.中国人民解放军陆军军医大学 2019
本文编号：3275548
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