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黍糠过氧化物酶的磷酸酶活性研究

发布时间:2021-07-11 02:19
  过氧化物酶(Peroxidase,POD)是一类广泛存在于细菌,真菌,植物和动物中的氧化还原酶,可利用过氧化氢来介导多种无机和有机底物的氧化。大多POD是单一多肽链与含Fe(Ⅲ)-原卟啉IX辅基构成的血红素蛋白,多肽链分子须与血红素结合才构成全酶,血红素辅基是POD电子传递的载体。III类POD是来源于植物的分泌型过氧化物酶,在胞质中合成后可以转运至细胞壁或液泡,参与多种生理功能,如机体内毒性过氧化物的清除,细胞壁的合成,伤口愈合,生长素合成及代谢等。已报道含血红素辅基的蛋白(肌红蛋白,细胞色素c等)可以在H2O2存在的条件下对DNA进行氧化断裂。PmPOD是来源于黍子中的一种含血红素辅基的阳离子过氧化物酶,可以诱导结直肠癌细胞发生坏死性凋亡(Necroptosis),PmPOD诱导的坏死性凋亡与PmPOD造成DNA的断裂有关。因此本论文将着重研究PmPOD对DNA的断裂及其机制。本研究首先利用琼脂糖凝胶电泳技术,以pBR322,pUC18和pGEM-T为底物,并结合DTT,NaN3,以及二价金属离子等试剂初步研究PmP... 

【文章来源】:山西大学山西省

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

黍糠过氧化物酶的磷酸酶活性研究


PmPOD的SDS-PAGE分析

作用温度,缓冲液,温度依赖性,抗肿瘤


图 2.2 缓冲液 pH 值对 PmPOD 切割 DNA 的影响cts of pH Buffers on DNA cleavage by PmPOD. PmPOD (3 pM) in different pH buffers at 37 °C fo% agarose gel electrophoresis. Plasmid DNA was used asent supercoiled circular, nicked circular, and liner f对 PmPOD 切割 DNA 的影响 Tris-HCl(20 mM, pH 8.0)的缓冲液中研究了作用温影响。结果如图 2.3 所示,DNA 单独在不同温度下孵育加入 PmPOD 后,与对照组相比,随着作用温度的升高,呈现出温度依赖性。考虑到 PmPOD 在抗肿瘤及其实验温度。

缓冲液pH,作用温度,缓冲液,温度依赖性


图 2.2 缓冲液 pH 值对 PmPOD 切割 DNA 的影响ffects of pH Buffers on DNA cleavage by PmPOD. pGwith PmPOD (3 pM) in different pH buffers at 37 °C for 3by 1% agarose gel electrophoresis. Plasmid DNA was used as conresent supercoiled circular, nicked circular, and liner formy.温度对 PmPOD 切割 DNA 的影响在 Tris-HCl(20 mM, pH 8.0)的缓冲液中研究了作用温度对A 的影响。结果如图 2.3 所示,DNA 单独在不同温度下孵育不是加入 PmPOD 后,与对照组相比,随着作用温度的升高,P越强,呈现出温度依赖性。考虑到 PmPOD 在抗肿瘤及其它方作为实验温度。


本文编号:3277131

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