幽门螺杆菌hpaA基因克隆及其蛋白的表达纯化

发布时间：2021-07-28 01:05

　　目的克隆幽门螺杆菌hpaA基因,构建hpaA-pET-32a重组质粒,并对其重组蛋白进行表达纯化,为其进一步的免疫研究提供实验基础.方法采用PCR方法,从幽门螺杆菌临床分离菌株中扩增hpaA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,通过表达载体pET-32a构建的hpaA的重组质粒,在E.coliBL21（DE3）宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,最后对重组蛋白进行纯化.结果重组质粒hpaA-pET-32a经双酶切、PCR及测序证明构建成功,经诱导重组蛋白成功表达,以包涵体蛋白的形式存在,对其纯化后获得了高纯度的重组蛋白.结论成功构建幽门螺杆菌hpaA的原核表达系统,并对其重组蛋白进行了表达纯化. 

【文章来源】：北华大学学报(自然科学版). 2020,21(01)

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【部分图文】：

PCR扩增产物

hpa A-p ET-32a双酶切

用IPTG诱导hpaA蛋白表达，表达产物主要存在于超声破碎物离心后的沉淀中．将沉淀物进行纯化，成功获取目的蛋白．见图3．凝胶成像系统分析其纯度大于90%.3 讨论


本文编号：3306888