屎肠球菌WEFA23表面蛋白拮抗单核增生李斯特菌内化定植及其敲除株构建的研究
发布时间：2021-07-28 17:37
乳酸菌是益生菌的重要成员,具有促进营养吸收、拮抗致病菌黏附定植、增强宿主免疫力和维持肠道稳态等重要生理功能。黏附定植于肠上皮细胞是乳酸菌发挥益生功能的基础,亦是拮抗致病菌内化、定植肠道的前提。目前,乳酸菌功能性组分及其作用分子机制研究甚少。乳酸菌的表面蛋白是其与外界直接接触的物质,具有抑制致病菌内化定植、调节宿主免疫等多种生理特性。因此,阐明乳酸菌表面蛋白在拮抗致病菌黏附、内化和定植的内在机制,将为丰富挖掘益生菌表面蛋白在调节胃肠道微生态及其机体免疫作用,提供重要科学依据。本文借助细胞和动物模型,较为系统地探究了屎肠球菌WEFA23表面蛋白拮抗单核增生李斯特菌内化定植分子机制,并借助分子生物学手段构建其表面蛋白主要成分鸟氨酸氨甲酰基转移酶（ornithine carbamoyltransferase,OTC）基因缺陷株,为功能实验验证提供基础材料。第一章绪论部分在阐述乳酸菌表面蛋白、单核增生李斯特菌以及基因重组技术的基础上,对肠球菌拮抗单核增生李斯特菌的研究动态进行了简述,对屎肠球菌WEFA23的表面蛋白拮抗单核增生李斯特菌的内化定植分子机制进行了展望。第二章探究了屎肠球菌WEFA23...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化Ｃａｃｏ－２细胞作用；图中没有共同字母的组别显??著不同，尸＜０．０５??
第二章屎肠球菌ＷＥＦＡ２３表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化肠上皮细胞机制??２．４实验结果??２．４．１表面蛋白对Ｃａｃｏ－２细胞增殖活性影响??以Ｃａｃｏ－２细胞为模型，ＳＬＰ为研究对象，利用ＣＣＫ－８法检测细胞的增殖活??性。不同浓度的ＳＬＰ作用于Ｃａｃｏ－２细胞后増殖效果如图２．１所示。结果表明２５－??８００?ｐｇ／ｍＬ?ＳＬＰ对Ｃａｃｏ－２细胞增殖均无显著影响，表明ＳＬＰ对Ｃａｃｏ－２细胞无毒??性。选用５０、１００和２０〇ｎｇ／ｍＬ的ＳＬＰ进行后续实验。??１５０－??ｉ：ｉｌｌｌ??０?２５?５０?１００?２００?４００?８００??ＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮ?（＾ｇ／ｍＬ）??图２．１不同浓度表面蛋白对Ｃａｃｏ－２细胞增殖的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＳＬＰ?ｏｎ?Ｃａｃｏ－２?ｃｅｌｌｓ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．??２．４．２表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化Ｃａｃｏ－２细胞??为了研究ＳＬＰ对内化Ｃａｃｏ－２细胞的影响，采用竞争、排斥和替换实验??进行检测。结果如图２．２所示，ＳＬＰ仅在排斥实验中显著拮抗内化Ｃａｃｏ－２细??胞，减少胞内单核增生李斯特菌数量（尸＜０．０５）。??亏６１??彡??—聞上?—險?ｈ?二?ｊ！ｊ?＾２?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｓ?４■目圈■?兰聞?＿?＝?：；：?Ｈ?Ｓ?Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ??Ｔ?三?ｒａ?■?三尚■?＝?Ｈ?ＫＢｉ?Ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ａｓｓａｙ??§?＝?ｍ?Ｈ?三会：■■?Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ??！Ｊ腳丨ｉｉ，Ｕ?ｋｉ，＿＿??５０?＾ｉｇ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]杯状细胞及肠道黏液屏障的功能研究[J]. 黄春兰,曾悦. 国际消化病杂志. 2017(06)
[2]乳酸杆菌S-层蛋白的特性及功能性研究进展[J]. 石晓璐,张英春,张兰威,向鑫玲. 微生物学通报. 2017(05)
[3]抗嗜水气单胞菌NJ-1感染的乳酸菌筛选及其免疫调节作用[J]. 王彦波,任真真,张岩,傅玲琳. 水产学报. 2016(03)
[4]OCT蛋白对猪链球菌生物被膜形成和细胞黏附的影响[J]. 梅京京,汪洋,易力,张建康,程相朝,张春杰,余祖华,吴庭才. 中国兽医科学. 2016(02)
[5]植物乳杆菌表面性质及对Caco-2细胞的黏附[J]. 李清,刘小莉,王英,董明盛,周剑忠. 食品科学. 2015(09)
[6]乳酸菌肠道表面的粘附机制与生物效应[J]. 孔维甲,杨向往,刘章. 饲料与畜牧. 2014(07)
[7]人体益生菌种类及其功能的最新研究[J]. 汪孟娟,徐海燕,辛国芹,武香玉,曹银生,谷巍. 畜牧与饲料科学. 2013(01)
[8]我国主要的食源性致病菌[J]. 赵怀龙,付留杰,唐功臣. 医学动物防制. 2012(11)
[9]国内益生菌制剂临床应用状况分析[J]. 王文建,郑跃杰. 中国微生态学杂志. 2009(01)
[10]肠球菌表面蛋白基因与生物膜形成关系的探讨[J]. 马立艳,许淑珍. 山东医药. 2006(05)
硕士论文
[1]屎肠球菌WEFA23拮抗单核增生李斯特菌黏附定植的作用研究[D]. 许雄鹏.南昌大学 2018
本文编号：3308343
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化Ｃａｃｏ－２细胞作用；图中没有共同字母的组别显??著不同，尸＜０．０５??
第二章屎肠球菌ＷＥＦＡ２３表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化肠上皮细胞机制??２．４实验结果??２．４．１表面蛋白对Ｃａｃｏ－２细胞增殖活性影响??以Ｃａｃｏ－２细胞为模型，ＳＬＰ为研究对象，利用ＣＣＫ－８法检测细胞的增殖活??性。不同浓度的ＳＬＰ作用于Ｃａｃｏ－２细胞后増殖效果如图２．１所示。结果表明２５－??８００?ｐｇ／ｍＬ?ＳＬＰ对Ｃａｃｏ－２细胞增殖均无显著影响，表明ＳＬＰ对Ｃａｃｏ－２细胞无毒??性。选用５０、１００和２０〇ｎｇ／ｍＬ的ＳＬＰ进行后续实验。??１５０－??ｉ：ｉｌｌｌ??０?２５?５０?１００?２００?４００?８００??ＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮ?（＾ｇ／ｍＬ）??图２．１不同浓度表面蛋白对Ｃａｃｏ－２细胞增殖的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＳＬＰ?ｏｎ?Ｃａｃｏ－２?ｃｅｌｌｓ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．??２．４．２表面蛋白抑制单核增生李斯特菌内化Ｃａｃｏ－２细胞??为了研究ＳＬＰ对内化Ｃａｃｏ－２细胞的影响，采用竞争、排斥和替换实验??进行检测。结果如图２．２所示，ＳＬＰ仅在排斥实验中显著拮抗内化Ｃａｃｏ－２细??胞，减少胞内单核增生李斯特菌数量（尸＜０．０５）。??亏６１??彡??—聞上?—險?ｈ?二?ｊ！ｊ?＾２?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｓ?４■目圈■?兰聞?＿?＝?：；：?Ｈ?Ｓ?Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ??Ｔ?三?ｒａ?■?三尚■?＝?Ｈ?ＫＢｉ?Ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ａｓｓａｙ??§?＝?ｍ?Ｈ?三会：■■?Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ??！Ｊ腳丨ｉｉ，Ｕ?ｋｉ，＿＿??５０?＾ｉｇ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]杯状细胞及肠道黏液屏障的功能研究[J]. 黄春兰,曾悦. 国际消化病杂志. 2017(06)
[2]乳酸杆菌S-层蛋白的特性及功能性研究进展[J]. 石晓璐,张英春,张兰威,向鑫玲. 微生物学通报. 2017(05)
[3]抗嗜水气单胞菌NJ-1感染的乳酸菌筛选及其免疫调节作用[J]. 王彦波,任真真,张岩,傅玲琳. 水产学报. 2016(03)
[4]OCT蛋白对猪链球菌生物被膜形成和细胞黏附的影响[J]. 梅京京,汪洋,易力,张建康,程相朝,张春杰,余祖华,吴庭才. 中国兽医科学. 2016(02)
[5]植物乳杆菌表面性质及对Caco-2细胞的黏附[J]. 李清,刘小莉,王英,董明盛,周剑忠. 食品科学. 2015(09)
[6]乳酸菌肠道表面的粘附机制与生物效应[J]. 孔维甲,杨向往,刘章. 饲料与畜牧. 2014(07)
[7]人体益生菌种类及其功能的最新研究[J]. 汪孟娟,徐海燕,辛国芹,武香玉,曹银生,谷巍. 畜牧与饲料科学. 2013(01)
[8]我国主要的食源性致病菌[J]. 赵怀龙,付留杰,唐功臣. 医学动物防制. 2012(11)
[9]国内益生菌制剂临床应用状况分析[J]. 王文建,郑跃杰. 中国微生态学杂志. 2009(01)
[10]肠球菌表面蛋白基因与生物膜形成关系的探讨[J]. 马立艳,许淑珍. 山东医药. 2006(05)
硕士论文
[1]屎肠球菌WEFA23拮抗单核增生李斯特菌黏附定植的作用研究[D]. 许雄鹏.南昌大学 2018
本文编号：3308343
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3308343.html
