一重和三重脑震荡鼠BB、BW和FS行为学变化及脑组织GFAP和MBP变化研究

发布时间：2017-12-22 16:19

本文关键词：一重和三重脑震荡鼠BB、BW和FS行为学变化及脑组织GFAP和MBP变化研究　出处：《昆明医科大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：第一部分三重脑震荡大鼠BB、BW和FS行为学变化研究 [目的]：建立三重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠模型,观察脑震荡后平衡木实验(beam balance test,BB)、横杆跑动实验(beam walking test,BW)及强迫游泳实验(forced swimming test,FS)行为学变化,评估大鼠伤后静态和动态平衡运动、学习、记忆功能的恢复情况及精神活动的抑郁样状况。[方法]：(1)动物分组：成年健康SD大鼠20只,雌雄各半,体重260±20g,随机分为MCC72h横杆跑动组和MCC72h强迫游泳组,每组各10只,雌雄各半。(2)应用金属单摆打击装置,每隔72h打击一次PCC,共打击3次以复制MCC72h模型。(3)应用BB和BW实验评价MCC72h大鼠伤后16天内,静态和动态平衡功能、运动协调功能和运动学习记忆功能的变化并与本课题组先前PCC组和MCC24h组结果进行比较;应用FS实验评价MCC72h大鼠伤后第3、7、15、30天精神抑郁样状况,并与本课题组先前PCC组和MCC24h组结果进行比较。[结果]：(1)BB评分结果：PCC组和MCC72h组大鼠伤后在整个实验期间均能保持相对静态平衡,结果均为(60.00±0.00s); MCC24h大鼠伤后9天内出现不同程度的静态平衡功能的损害。(2)BW评分结果：PCC组与MCC72h组大鼠伤后第一天即恢复至正常值,即整个实验期间分值均为5分,所有受试大鼠在噪音的刺激下都能顺利通过跑杆上所有障碍并进入暗盒内；MCC24h大鼠伤后第1-2天BW评分降低,与PCC组和MCC72h组均有统计学差异,P0.05,之后恢复至5分。(3)BW步入潜伏期结果：MCC72h组与正常组相比,伤后第1-3天均有统计学意义,P0.05；PCC组与MCC72h组伤后大鼠STL在整个观测时间点STL差异均无统计学意义,P0.05；MCC24h组与MCC72h组在伤后第3-6天,STL差异有统计学意义,P0.05。(4)BW失足频次结果：MCC72h大鼠伤后失足频次增加,第3天达到高峰,之后逐步减少,第8天又出现一个小高峰。(5)FS中抑郁样行为频次：MCC72h伤后第3、15、30天与正常组、PCC组和MCC24h组相比,C行为频次最多。[结论]：(1)PCC、MCC24h与MCC72h大鼠伤后静态平衡能力未见损伤改变。(2) PCC、MCC72h大鼠的动态运动平衡、运动协调功能、学习和记忆功能在末次打击后4天内出现短时异常改变,而MCC24h大鼠的相应功能则在伤后第8天均表现出明显损伤。(3) PCC、MCC24h和MCC72h三种不同损伤类型伤后平衡运动功能损伤的严重程度为：MCC24hMCC72hPCC正常对照组；抑郁样行为频次：MCC72hMCC24hPCC正常对照组。第二部分一重和三重脑震荡大鼠脑组织GFAP和MBP动态变化研究 [目的]：建立一次性脑震荡(pure cerebral concussion,PCC)和三重脑震荡(multiple cerebral concussion, MCC)大鼠模型,其中三重脑震荡的打击间隔时间分别为24h和72h,观察并分别比较上述不同损伤组之间胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)和髓鞘碱性蛋白(nyelin basic protein, MBP)的变化以及PCC和MCC伤后各天数组内GFAP与MBP的变化,以进一步了解大鼠不同脑震荡后神经组织学产生的变化。 [方法]：(1)动物分组：成年健康SD大鼠96只,雌雄各半,体重260±20g,随机分为正常组、PCC模型组、MCC24h模型组、MCC72h模型组,各模型组再随机分为Id、4d、8d、16d和24d5个观测点。(2)应用金属单摆打击装置复制PCC大鼠模型30只、MCC24h模型30只、MCC72h模型30只。(3)用抗GFAP和抗MBP抗体进行免疫组化S-P法染色,检测大鼠中隔冠状断面、海马区冠状断面和脑干失状断面的不同脑区的GFAP和MBP表达,采用图像分析系统对上述脑区的GFAP和MBP阳性反应物分别进行细胞计数和光密度值测定分析。 [结果]：(1)GFAP阳性细胞数伤后变化结果①GFAP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠状断面、海马区冠状断面和脑干失状断面的各脑区阳性细胞数于伤后第1天就逐渐增多,于伤后第8天达到高峰,与正常对照组相比,阳性细胞数差异均有统计学意义(p0.05)；②MCC72h伤后第1天GFAP阳性细胞计数即进入高表达量,多于MCC24h、PCC和止常对照组；③MCC24h伤后第8天GFAP计数表达最多,高于其他各组,且持续高表达时间最长；④PCC伤后第1天GFAP表达即增加,与正常对照组比较差异具有统计意义(p0.05),增加和减少的幅度均最小。(2)MBP阳性表达物光密度值结果①MBP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠状断面、海马区冠状断面和脑干失状断面的各脑区阳性反应物光密度值于伤后第1天就逐渐降低,于伤后第4天达到最低谷,与对照组相比,差异均有统计学意义(p0.05)；②MCC72h伤后第1天即进入低表达,与PCC阳性反应物光密度值相近,但第4天进入低谷表达时低于PCC组,两组差异比较具有统计学意义(p0.05)；③MCC24h伤后阳性反应物光密度值在早期即发生低表达,至第4天达到最低谷,与其他各组比较差异均有统计学意义,且低表达持续时间长；④PCC伤后第1天阳性反应物光密度值即进入低表达状态,至第4天达到最低谷,之后阳性反应物光密度值迅速上升接近正常水平。 [结论]：(1)采用金属单摆式机械打击装置能够成功建立MCC72h大鼠模型。(2) PCC、MCC24h和MCC72h末次打击伤后,GFAP阳性细胞计数表达出现不同程度的增加,均以伤后8d天表达最多,提示星形胶质细胞的损伤严重程度：MCC24hMCC72hPCC正常组。(3)PCC、MCC24h和MCC72h伤后,MBP阳性反应物光密度值表达出现不同程度的下降,均以伤后4天表达最低,提示少突胶质细胞MBP损伤严重程度：MCC24hMCC72hPCC正常组。(4)在PCC、MCC24h和MCC72h三种损伤类型中MCC24h损伤程度最重,持续时间最长,损伤累积效应最明显。(5)各损伤类型组大鼠伤后,各断面不同脑区伤后GFAP阳性细胞和MBP阳性反应物表达空间分布特征具有弥漫性和冲击与对冲加重的特点。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：D919.1

【参考文献】