大鼠脑震荡后继发性损伤和CCK抗损伤的研究

发布时间：2018-04-08 18:34

本文选题：脑震荡　切入点：胆囊收缩素　出处：《河北医科大学》2003年硕士论文

【摘要】： 目的：脑震荡（brain concussion）是指外力致头部损伤后，即刻引起脑功能障碍，轻者表现短暂昏迷，重者伴有记忆力障碍，多可自行恢复的状况。临床上将头部外伤史、短暂意识丧失和近事遗忘作为诊断脑震荡的三大指征。传统观点认为，其组织形态学上无明显变化，神经系统检查也无器质性损伤体征，近年来人们对脑震荡的机理及其脑组织结构的改变进行了许多研究，并有了新的认识，目前大多数学者认为脑震荡系轻度轴索损伤所致，存在一定的病理变化。关于脑震荡的生物力学、发病机理等方面有许多问题尚待解决。本实验通过采用单摆式机械打击装置建立大鼠脑震荡模型,观察大鼠脑震荡后病理改变及脑组织氧化损伤和炎症因子的变化，以及血清中相应生化指标的改变，探讨脑震荡后继发性损伤形成机制, 为法医临床对脑震荡及脑震荡后遗症的鉴定提供参考;同时对以硫酸酯化八肽活性片段为存在形式的外源性胆囊收缩素（cholecystokinin-8 , CCK-8）在脑震荡后对上述变化的影响加以评价，为寻求减轻脑损伤的药物提供理论依据。实验方法：脑震荡模型制备：将大鼠用乙醚轻度麻醉,使其俯卧于打击装置上，以135°起始角下落单摆打击大鼠的枕外隆突，选择具备打击后马上出现昏迷（1~3 min），意识迅速恢复，大体检验无肉眼损伤，组织学检 WP=4 查未见脑出血和挫伤的大鼠定为成功复制脑震荡。健康Wistar大鼠90只，体重200g，雌雄不拘，随机分组。实验分为：对照组、脑震荡组、和CCK组。CCK组预先静脉注射CCK-8 (4μg/100g) ,余同脑震荡组。观察打击后大鼠脑组织的病理改变，测定脑组织及血清中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，用免疫组化的方法检测TNF-α和IL-1β在脑组织中表达以及血清中C反应蛋白（CRP）含量；观察脑震荡后及预先注射CCK-8上述指标的变化并探讨其意义。结果： 1 组织病理变化对照组:脑组织结构清晰，未见异常变化。脑震荡组：大鼠打击后6h可见皮质和小脑等部位轻度水肿、血管淤血，胼胝体、脑干、小脑白质等部可见神经髓鞘排列紊乱、断裂、弯曲肿胀，12h 及24h上述变化更加明显见。CCK组:病理变化和脑震荡组一致,没有明显差别。 2 脑组织MDA含量和SOD活性变化：脑组织MDA在对照组为1.10±0.11 nmol/mg prot，脑震荡2h组为2.27±0.94 nmol/mg（与对照组比较明显升高P0.01），脑震荡6h组为1.30±0.14 nmol/mg（较脑震荡2h组降低，与对照组比较P0.05），脑震荡12h组为1.15±0.18 nmol/mg，接近正常水平。CCK 2h组测定值为1.37±0.94 nmol/mg prot（与脑震荡组比较P0.05，与对照组比较P0.05）。脑组织SOD活性在对照组为13.15±2.07 NU/mg prot，脑震荡2h组11.12±0.79 NU/mg prot（与对照组比 WP=5 较明显下降P0.05）, 脑震荡6h组12.41±1.87 NU/mg prot（与对照组比较P0.05），CCK 2h组为12.81±1.27 NU/mg prot（与脑震荡2h组比较P0.05）。 3 脑组织中TNF-α和IL-1β免疫组化结果对照组脑组织大脑皮层、海马等部位TNF-α和IL-1β不表达或表达较少。脑震荡后6h及12h在大脑皮质，海马部位表达量较对照组明显增加。CCK组在相应时间点TNF-α和IL-1β表达较对照组表达增加但较脑震荡组相应部位表达量降低。 4血清中MDA含量和SOD活性变化血清MDA对照组为5.22±0.63 nmol/ml，脑震荡2h组为6.59± 0.86（与对照组比较明显升高P0.01），脑震荡6h组为5.35±0.70 nmol/ml（较脑震荡2h组降低，与对照组比较P0.05）， CCK 2h组为 5.33 ±0.86（与脑震荡组比较P0.05）。血清SOD活性在对照组291.84±58.11NU/ml，脑震荡2h组为176.00±18.99 NU/ml（与对照组比较下降P 0.01），脑震荡6h组为205.61 ±103.71 NU/ml （较脑震荡2h组回升，与对照组比较P 0.05）,CCK 2h组为232.16±41.47 NU/ml（与脑震荡组比较P 0.05），，CCK 6h组为256.83±49.06 NU/ml（与脑震荡组比较P0.05）。 5 血清中CRP含量变化脑震荡组打击后2h血液中CRP含量为3.21±1.55 mg/l,较对照组（1.59±0.54mg/l）升高，6h增高为4.37±2.01 mg/l，(与对照组比较P 0.05),至12h达到高峰为10.35± 1.90 mg/l, (与对照组比较P 0.01), 24h后为 WP=6 5.13±2.66mg/l, （与对照组比较P 0.05）,48h为3.03±2.05 mg/l，(与对照组比较P 0.05)基本恢复正常。 CCK组打击后2h亦开始升高，在相应时间点，CCK组血中CRP浓度比脑震荡组下降；CCK6h组为2.71±0.44 mg/l，(与脑震荡组比较P 0.05),CCK12h 组为3.20 ± 0.63 mg/l (与脑震荡组比较P0.01 ,)。结论：1. 脑震荡大鼠存在继发性的氧化损伤和TNF-α、IL-1β表达上调。2. 脑震荡后有血清CRP、MDA、SOD的变化，可用来反映脑组织损伤。3. CCK-8可减轻大鼠脑震荡后脑的氧化损伤和炎性损伤。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：D919

【参考文献】