大鼠脑外伤后自噬/溶酶体途径相关蛋白表达的研究

发布时间：2020-12-12 12:58

　　目的：研究自噬／溶酶体途径在脑外伤后激活情况，并对其在神经损伤修复中的作用进行探讨。方法：采用自由落体法建立大鼠脑外伤（traumatic brain injury,TBI）模型，透射电镜法观测损伤区及其周边区（皮层与海马）神经元中自噬体的形成情况，免疫组化及免疫印记法检测损伤区及其周边区（皮层与海马）自噬／溶酶体途径相关蛋白cathepsin-B、cathepsin-D、LC3以及Beclin1的表达。免疫荧光双标及激光共聚焦法检测损伤区及其周边区（皮层与海马）cathepsin-B、cathepsin-D、LC3以及Beclin1阳性细胞与caspase-3阳性细胞的共表达情况。结果：透射电镜显示大鼠脑外伤后1h即见到损伤及周边区神经元内自噬体形成，4d-8d出现最为明显，一直持续到32d。免疫印记及免疫组化结果显示，脑外伤后1h cathepsin-B表达增加（P＜0.05），8d达高峰，32d仍有较多表达（P＜0.05）；脑外伤后12h cathepsin-D表达增加（P＜0.05），8d达高峰，32d仍有较多表达（P＜0.05）；脑外伤后1h LC3、Beclin1表达增加（... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：104 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 TBI大鼠损伤及周边区（皮层、海马）自噬体的检测
    材料与方法
    结果
    小结
第二部分 TBI大鼠损伤及周边区（皮层、海马）溶酶体酶表达的研究
    第一节 Cathepsin-B蛋白表达的时程变化
        一、免疫组织化学法检测cathepsin-B蛋白表达
            材料与方法
            结果
        二、Western blot法检测cathepsin-B蛋白表达
            材料与方法
            结果
    第二节 Cathepsin-D蛋白表达的时程变化
        一、免疫组织化学法检测cathepsin-D蛋白表达
            材料与方法
            结果
        二、Western blot法检测cathepsin-D蛋白表达
            材料与方法
            结果
    第三节 Cathepsin-B,cathepsin-D与caspase-3表达相关性的研究
        材料与方法
        结果
        小结
第三部分 TBI大鼠损伤及周边区（皮层、海马）自噬相关蛋白表达的研究
    第一节 LC3蛋白表达的时程变化
        材料与方法
        结果
    第二节 Beclin1蛋白表达的时程变化
        一、免疫组织化学法检测Beclin1蛋白表达
            材料与方法
            结果
        二、Western blot法检测Beclin1蛋白表达
            材料与方法
            结果
    第三节 LC3、Beclin1与caspase-3表达相关性的研究
        材料与方法
        结果
        小结
讨论
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
附录一 研究论文
附录二 缩略词
致谢
详细摘要



本文编号：2912606