微生物降解茶叶农药残留的研究

发布时间：2020-05-17 09:28

【摘要】： 本文采用HP6890气相色谱仪测定了联苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在水体和茶叶中的添加回收率。3种菊酯在水体中都分别设计了1mg／L、10mg／L、100mg／L3个浓度的添加回收试验，在茶叶中都分别设计了0.1mg／kg、1.0mg／kg、10.0mg／kg3个浓度梯度的添加回收率试验。结果表明，3种菊酯在水样中的添加回收率在95.47％至103.21％之间，变异系数在2.21％至4.72％之间，在茶样中的添加回收率在84.32％至93.34％之间，变异系数在2.95％至4.22％之间。联苯菊酯的标准曲线方程为y_1=10~6x_1+10~6(R_1~2=0.9987)，甲氰菊酯的标准曲线方程为y_2=10~6x_2+619406(R_2~2=0.9976)，氯氰菊酯的标准曲线方程为y_3=741527x_3+686486(R_3~2=0.9982)。从农药厂车间下水道污泥中和喷药的茶园小区的茶叶中，通过富集培养基、基础培养基富集培养分离到3株对联苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯都有较高而稳定的降解力的细菌w10j15、t6f2和c1f6，经鉴定，它们分别为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacap)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)和恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。第二次复筛测定结果表明，对100mg／L的联苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯的降解率，w10j15分别为52.43％、50.76％和56.89％，t6f2分别为50.96％、48.79％和44.57％,c1f6分别为55.64％、44.56％和52.19％。菌体生长与联苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯降解的关系曲线表明，w10j15、t6f2和c1f6菌株生长都和对农药的降解呈同步关系，而且经只加以农药为唯一碳源的基础培养基平板划线培养，菌株在平板上生长良好，说明菌株能以农药为唯一碳源和能源。对不同的外界条件对菌株的降解力的影响进行测定。菌株对30、50、100、200、300、400、500、600mg／L的3种菊酯农药降解效果测定结果表明，农药浓度过低及过高都对菌体生长不利，从而影响了菌株对农药的降解率。w10j15在农药浓度为50和100mg／L时菌株的降解率相对较高，并以100mg／L时降解率最高，t6f2在农药浓度为50、100、200mg／L时降解效果较好，c1f6在农药浓度为50、100mg／L时菌株对农药的降解率较其它浓度更高。菌株w10j15、t6f2、c1f6对100mg／L的3种菊酯农药的降解速率与接菌量近似成正比例关系。从降解效果及降解率与菌量比值的降解效率来看，w10j15和c1f6接种量都以D_(415nm)值取0.1为佳，t6f2接种量以D_(415nm)值0.1或0.3较好。博士论文摘要以10、15、20、25、30、35、40、45℃不同温度梯度测定温度对菌株降解效能的影响，结果表明，过低和过高温度都对菌株生长和降解效能有抑制作用。wloj巧最适温度在30一35℃之间;t6几适宜的温度在20一35℃之间，以25一35℃时降解效果最好; clf6最适温度在25一30℃之间。以pH分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、ro.0测定pH对菌株降解效能的影响，结果表明，过低或过高的pH值，使菌株生长受抑制，导致降解率受到影响。w10)巧适宜的pH范围在6.0一8.0之间，最适pH在7.0左右，对3种菊醋的降解率都在50%以上;t6fZ适宜的pH范围在5.0一7.0之间，以pH=6.0时降解效果最好，对3种菊醋的降解率都在55%以上;clf6适宜的pH范围为6.0一8.0，以pH=7.。时降解效果最好，对3 种菊酷降解率都在40%以上。振荡培养ld、2d、3d、4d，5d后萃取，测定不同的培养时间对菌株降解效能的影响，结果表明，在培养前3d，菌株wloj巧、t6fZ、clf6的降解率增长较快，第3d以后，降解率增长开始减缓。取0、60、120、180、220rmin一，的不同振荡速率和250mL的三角瓶中装50、100、 150、ZOOInL的基础培养基发酵液，测定振荡速率和装液量对菌株降解效能的影响，结果表明，菌株wloj巧和t6fZ对农药的降解率随振荡速率的增加和装液量的减少而增加，，说明菌株wloj巧和t6几是好氧型的;菌株clf6对农药的降解率受振荡速率和装液量的影响不大，在不同的振荡速率和装液量下，菌株对农药的降解率比较接近，说明菌株clf6是兼性好氧型的。测定edZ+、znZ+、euZ+、Fe，+、PbZ+、AI，+、BaZ+、MnZ+和eaZ+共9种金属离子和氟离子(F一)对菌株的降解效能的影响，结果表明，A13十、Mn，+、caZ+对菌株wl叩5 降解力有促进作用，以MnZ十、caZ十促进作用较明显;Cu2+、BaZ+、F一对菌株t6fZ降解力有促进作用，以F一促进作用最明显;znZ+、Mn2+、F一对菌株clf6降解力有促进作用。除此之外，不同的离子对菌株都有不同程度的抑制作用。基础培养基中单独添加葡萄糖、蔗糖、淀粉、果糖、乳糖、麦芽糖lg/loolllL时，都不同程度地提高了菌株w10jls、t6fZ和clf6对农药的降解率。对菌株wloj巧以蔗糖促进效果最明显，葡萄糖和果糖次之;对菌株t6几以葡萄糖促进效果最明显，其次是果糖;对菌株clf6以果糖促进效果最明显，其次是葡萄糖和蔗糖。但添加蛋白陈和牛肉膏0.sg/loomL对菌株wloj15、t6fZ和clf6降解农药有明显的抑制作用。博士论文摘要采用L，，:(2x37)正交表，取酵母膏、3种菊酷农药浓度、碳源(w 10)巧选用蔗糖， t6几选用葡萄糖，clf6选用果糖)、接种量、pH值、金属离子、装液?
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：X591

【引证文献】