芘-铬（Ⅵ）复合污染的共脱毒菌株的分离鉴定及特性研究
【部分图文】：
将复筛得到的6株菌株提取其基因组DNA，成功提取的基因组DNA结果见图1．以此基因组DNA作为模板进行16SrRNA基因的PCR扩增，可以看到扩增出16SrRNA基因结果，见图2．图中，M为DNA Marker，泳道1-6依次为菌株B,1,5,8,6,10．将PCR产物送交公司测序后用NCBI网站的Blast软件进行比对，结果表明这6株菌分属于Bacillus sp.（.芽孢杆菌属）、Raoultella sp.（.拉乌尔菌属）和Serratia sp.（.沙雷氏菌属）共3个属，根据复筛中效率检测，它们的综合性能最优者为6号，而1号效率虽不够高，但属于Raoultella sp.（.拉乌尔菌属），比较少见此类菌具有降解芘或还原铬（Ⅵ）能力，故选取1号和6号菌进一步研究，并将其命名为Raoultella sp.F1和Serratia sp.Z6，同时将其提交到GenBank上，接收号为KY006166和KY006167.图2 六株菌的16Sr RNA基因
在20℃、30℃和40℃下进行了菌株共脱毒效率的检测，结果见图3．由图3可知，温度对两株菌还原20 mg/L铬（Ⅵ）的能力有促进作用，并且Z6菌株优于F1菌株；30℃和40℃显著大于20℃，而30和40℃比较接近，其中40℃略大于30℃．在30℃时两株菌株的芘降解能力是最好的，并且Z6菌株优于F1菌株．温度对两株菌降解芘的影响规律是：30℃最优，20℃最低，推测是20℃不适于菌体生长，菌体生长受到较大影响进而共脱毒能力减弱．温度是微生物生长的重要条件，低温可导致细胞膜凝固，引起物质运送困难，而高温则可使蛋白质变性，故温度成了影响微生物生长繁殖和生理代谢活动的最重要因素之一[15]．鉴于两株菌降解芘时30℃最好，而还原铬（Ⅵ）时最适温度是40℃比30℃略高，综合二者，采用30℃作为其最佳温度．2.3 pH对菌株共脱毒的影响
pH设置6.0-10.0检测两株菌共脱毒效率，2 d后取样测量铬（Ⅵ）还原率，7 d后取样测量芘降解率，结果见图4．从图4可以看出，Z6和F1都在pH 9.0时铬（Ⅵ）还原率达到最好，其中Z6菌可以将20 mg/L铬（Ⅵ）完全还原．两菌降解芘的pH影响不同，它们都在pH:7.0-10.0的芘降解率比pH 6.0较高，Z6在pH 7.0最优达到56.8%，而F1在pH 9.0的时候降芘率达到最大值60.6%．因此F1在pH 9.0降芘效果最好，Z6在pH 7.0降芘效果最好．绝大多数微生物的生长pH都在5.0-9.0之间[14]，细菌更适于在中性偏碱环境中生长，其代谢活动也倾向于在中性偏碱环境中有利，F1在pH 9.0时降芘和还原铬（Ⅵ）效率都最优，而Z6还原铬（Ⅵ）最适pH也为9.0，但降芘最适pH为7.0，不同菌株可能降解芘和还原铬（Ⅵ）的相关酶不同，所需求的最适pH值也会不同，很少数菌会在极碱性条件下如pH低于11.5下还原铬（Ⅵ）[16]．综合pH对两菌降芘率和降铬（Ⅵ）率的影响结果，后续实验统一采用pH 9.0.2.4 接种量对菌株共脱毒的影响
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