百菌清酶免疫检测技术研究
发布时间：2021-01-23 16:08
百菌清是美国钻石制碱公司于1963年开发的一种广谱高效保护性杀菌剂,是目前国内外在农业生产上使用最广泛的一种杀菌剂。百菌清主要应用于防治蔬菜、大田作物、果树、茶树、烟草及高尔夫球场和各种绿化草坪等作物的真菌病害。由于百菌清对植物体具有良好的黏着性和使用的广泛性,因此百菌清及其转化产物在果蔬、土壤及水中均有较大的残留,甚至在北极地区也能检测到。百菌清对人畜低毒,对鱼、贝类等水生生物高毒,美国国家环境保护总署已经把百菌清列为可能使人类致癌的物质之一。4-羟基百菌清是百菌清在土壤与水环境中的主要降解产物。与百菌清相比,4-羟基百菌清的毒性更强,对土壤、淤泥等更具吸附能力,半衰期更长,且具有良好的水溶性,因此4-羟基百菌清对环境和人类健康会造成更为严重的影响。从2009年起,美国环境保护局将百菌清最高残留限量标准从只针对百菌清修改为针对百菌清及其降解产物4-羟基化合物的总含量。目前,我国百菌清的检测方法主要有气相色谱法、高效液相色谱法等仪器分析方法,对于4-羟基百菌清残留检测的研究较少。这些方法均存在样品前处理复杂、耗时、成本高等问题,不适合大量样品的快速检测,因此建立一种操作简便、快速和检测...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：172 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同抗体添加量反应体系的紫外扫描曲线
(2)目测法由图7.7可见，当在2mL胶体金溶液中加入的抗体蛋白量达到70^ig(35^ig/mL)后，滴加NaCl溶液，各试管中的反应体系均不会呈现由红到蓝的聚沉变化，基本保持红色不变。而当加入的抗体蛋白量不足这一数值时，试管内的反应体系会发生颜色变化，由红色变为蓝色。同时，目测法所得数值也与分光光度法测得33^18/11^的蛋白添加量基本符合。‘麵_丨图7.7目测法确定稳定胶体金最适抗体用量Fig.7.7 Optimum sum of immunoglobulin confirmed by visual observation.7.3.2.2 K2CO3添加量的确定反应体系中添加的K2CO3量，直接影响着反应体系的pH值。因此考察K2CO3添加量对吸附反应的影响。由图7.8可见，在K2CO3量添加较少
图7.9试纸条组装示意图Fig.7.9 Sketch map of assembling on strip.条的检测方法物质，其分子量小于300道尔顿，适合使用下随液体前移，到达T线时，百菌清与结合抗百菌清多克隆抗体-胶体金结合物。，金标多克隆抗体与T线处固定的CHT-O膜表面析出，T线显红色，之后尚未结合固定的羊抗兔二抗进行的二次免疫反应，，说明样品優测结果呈阴性。当样品中的大多竞争性识别样品中的抗原性物质，其形成可能肉眼不足以分辨的红色沉淀，金抗兔二抗发生免疫反应，形成红色沉淀，品检测结果为阳性。无论样品中是否含有，则说明检测无效。
【参考文献】：
期刊论文
[1]杀菌剂抑霉唑人工抗原的合成和鉴定[J]. 周映霞,张丽杰,潘家荣,焦必宁,王磊. 食品科学. 2010(13)
[2]百菌清人工抗原的制备与鉴定[J]. 郭乃菲,高兴,纪淑娟,于基成. 食品科学. 2010(13)
[3]四环素人工抗原的制备与鉴定[J]. 王硕,房立,于姣,李晓龙. 天津科技大学学报. 2010(03)
[4]盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定[J]. 张桂贤. 中国畜牧兽医. 2010(03)
[5]甲氧苄氨嘧啶人工抗原的合成及鉴定[J]. 职爱民,刘庆堂,邢广旭,杨继飞,张改平. 河南农业科学. 2010(03)
[6]百菌清烟雾剂最佳配方筛选及指标评价[J]. 王磊,朱朝华,陈华峰,张宇,党鹏. 热带农业工程. 2010(01)
[7]PCB77人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J]. 杜瑞雪,范仲学,郭笃发,李广存,蔡利娟. 细胞与分子免疫学杂志. 2010(02)
[8]不同杀菌剂对油菜菌核病菌的室内毒力测定[J]. 潘月敏,代玉立,凌萍,王殿兵,高智谋. 安徽农业科学. 2010(05)
[9]甲胺磷人工抗原的合成与鉴定[J]. 杜小粉,董全. 食品工业科技. 2010(01)
[10]多西环素人工抗原的合成与鉴定[J]. 乐涛,严佩峰,王喜亮,郭延成,沈亚安,毕丁仁. 中国兽药杂志. 2010(01)
硕士论文
[1]不同偶联比的毒死蜱、杀螟硫磷人工抗原的制备及表征[D]. 张美容.辽宁师范大学 2008
本文编号：2995508
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：172 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同抗体添加量反应体系的紫外扫描曲线
(2)目测法由图7.7可见，当在2mL胶体金溶液中加入的抗体蛋白量达到70^ig(35^ig/mL)后，滴加NaCl溶液，各试管中的反应体系均不会呈现由红到蓝的聚沉变化，基本保持红色不变。而当加入的抗体蛋白量不足这一数值时，试管内的反应体系会发生颜色变化，由红色变为蓝色。同时，目测法所得数值也与分光光度法测得33^18/11^的蛋白添加量基本符合。‘麵_丨图7.7目测法确定稳定胶体金最适抗体用量Fig.7.7 Optimum sum of immunoglobulin confirmed by visual observation.7.3.2.2 K2CO3添加量的确定反应体系中添加的K2CO3量，直接影响着反应体系的pH值。因此考察K2CO3添加量对吸附反应的影响。由图7.8可见，在K2CO3量添加较少
图7.9试纸条组装示意图Fig.7.9 Sketch map of assembling on strip.条的检测方法物质，其分子量小于300道尔顿，适合使用下随液体前移，到达T线时，百菌清与结合抗百菌清多克隆抗体-胶体金结合物。，金标多克隆抗体与T线处固定的CHT-O膜表面析出，T线显红色，之后尚未结合固定的羊抗兔二抗进行的二次免疫反应，，说明样品優测结果呈阴性。当样品中的大多竞争性识别样品中的抗原性物质，其形成可能肉眼不足以分辨的红色沉淀，金抗兔二抗发生免疫反应，形成红色沉淀，品检测结果为阳性。无论样品中是否含有，则说明检测无效。
【参考文献】：
期刊论文
[1]杀菌剂抑霉唑人工抗原的合成和鉴定[J]. 周映霞,张丽杰,潘家荣,焦必宁,王磊. 食品科学. 2010(13)
[2]百菌清人工抗原的制备与鉴定[J]. 郭乃菲,高兴,纪淑娟,于基成. 食品科学. 2010(13)
[3]四环素人工抗原的制备与鉴定[J]. 王硕,房立,于姣,李晓龙. 天津科技大学学报. 2010(03)
[4]盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定[J]. 张桂贤. 中国畜牧兽医. 2010(03)
[5]甲氧苄氨嘧啶人工抗原的合成及鉴定[J]. 职爱民,刘庆堂,邢广旭,杨继飞,张改平. 河南农业科学. 2010(03)
[6]百菌清烟雾剂最佳配方筛选及指标评价[J]. 王磊,朱朝华,陈华峰,张宇,党鹏. 热带农业工程. 2010(01)
[7]PCB77人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J]. 杜瑞雪,范仲学,郭笃发,李广存,蔡利娟. 细胞与分子免疫学杂志. 2010(02)
[8]不同杀菌剂对油菜菌核病菌的室内毒力测定[J]. 潘月敏,代玉立,凌萍,王殿兵,高智谋. 安徽农业科学. 2010(05)
[9]甲胺磷人工抗原的合成与鉴定[J]. 杜小粉,董全. 食品工业科技. 2010(01)
[10]多西环素人工抗原的合成与鉴定[J]. 乐涛,严佩峰,王喜亮,郭延成,沈亚安,毕丁仁. 中国兽药杂志. 2010(01)
硕士论文
[1]不同偶联比的毒死蜱、杀螟硫磷人工抗原的制备及表征[D]. 张美容.辽宁师范大学 2008
本文编号：2995508
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