线粒体损伤调控在番茄红素拮抗阿特拉津致小鼠睾丸毒性中的作用

发布时间：2024-12-10 03:28

　　阿特拉津是世界范围内最常使用的农业除草剂之一,被世界卫生组织列为潜在的内分泌干扰物(EDC),能够侵害生殖器官,引发生殖功能障碍,导致睾丸发育异常,干扰精子生成,但其睾丸毒性作用的机制仍不清楚。有着“植物黄金”之称的番茄红素是抗氧化功能最强的类胡萝卜素,在睾丸组织中分布丰富,为防治阿特拉津造成的睾丸毒性提供线索。为了探究番茄红素拮抗阿特拉津致雄性小鼠睾丸发育毒性的机制,本试验选用350只SPF级雄性昆明小鼠随机分成7组(50只/组):Con组(对照组)、Vcon(受试物溶媒对照组)、LYC组(5 mg/kg番茄红素组)、ATRⅠ组(50 mg/kg阿特拉津组)、ATRⅡ组(200 mg/kg阿特拉津组)、ATRⅠ+LYC组(50 mg/kg阿特拉津+5 mg/kg番茄红素组)和ATRⅠ+LYC组(200 mg/kg阿特拉津+5 mg/kg番茄红素组),采用灌胃方式连续处理21 d。观察睾丸形态结构与功能变化,生殖细胞、睾丸支持细胞、睾丸间质细胞的超微结构,检测精子相关参数及精子发生相关因子、睾酮(T)分泌及相关调控因子、紧密连接蛋白的表达、线粒体动力学及功能、抗氧化功能、SIRT3介导的...

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 阿特拉津的概述
    1.2 阿特拉津的生殖毒性
        1.2.1 阿特拉津生殖毒性的研究进展
        1.2.2 阿特拉津生殖毒性机制的研究进展
    1.3 阿特拉津生殖毒性拮抗效应物的研究
    1.4 番茄红素的概述
    1.5 番茄红素对生殖系统的保护作用
    1.6 线粒体动力学参与生殖系统健康调控的研究进展
    1.7 SIRT3 介导的线粒体健康调控
        1.7.1 SIRT3 的结构与功能
        1.7.2 SIRT3 信号通路在线粒体健康调控中的作用
    1.8 SIRT3 信号通路参与生殖系统健康调控的研究进展
    1.9 试验的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 主要仪器与试剂
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂
    2.2 试验动物与检测方法
        2.2.1 动物分组与处理
        2.2.2 动物试验技术路线
        2.2.3 临床症状的观察
        2.2.4 精子相关检测方法
        2.2.5 睾丸及附睾组织形态学观察
        2.2.6 睾丸组织超微结构观察
        2.2.7 睾丸组织阿特拉津及其代谢产物的检测方法
        2.2.8 睾丸组织CYP450 酶系的检测方法
        2.2.9 睾丸组织抗氧化功能检测方法
        2.2.10 血清激素的检测方法
        2.2.11 精子发生的检测方法
        2.2.12 睾丸间质细胞损伤的检测方法
        2.2.13 睾丸支持细胞损伤的检测方法
        2.2.14 SIRT3 介导的线粒体健康调控通路的检测方法
        2.2.15 睾丸组织线粒体自噬的检测方法
        2.2.16 睾丸组织凋亡的检测方法
    2.3 TM3 细胞及其检测项目与方法
        2.3.1 TM3 细胞及培养
        2.3.2 TM3 细胞分组与处理
        2.3.3 TM3 细胞试验技术路线
        2.3.4 TM3 细胞形态的观察
        2.3.5 TM3 细胞活性检测方法
        2.3.6 TM3 细胞中SIRT3 介导的线粒体健康调控通路的检测方法
        2.3.7 TM3 细胞线粒体自噬的检测方法
        2.3.8 TM3 细胞凋亡的检测方法
    2.4 TM4 细胞及其检测项目与方法
        2.4.1 TM4 细胞及培养
        2.4.2 TM4 细胞分组与处理
        2.4.3 TM4 细胞试验技术路线
        2.4.4 TM4 细胞形态的观察
        2.4.5 TM4 细胞活性检测方法
        2.4.6 TM4 细胞中SIRT3 介导的线粒体健康调控通路的检测方法
        2.4.7 TM4 细胞线粒体自噬的检测方法
        2.4.8 TM4 细胞凋亡的检测方法
    2.5 数据统计与分析
3 结果与分析
    3.1 番茄红素拮抗阿特拉津致小鼠生殖毒性检测结果
        3.1.1 小鼠临床症状的观察
        3.1.2 小鼠精子参数检测结果
        3.1.3 小鼠睾丸及附睾形态学损伤的观察
        3.1.4 小鼠睾丸组织中阿特拉津及DACT检测结果
        3.1.5 小鼠睾丸组织CYP450 酶系检测结果
        3.1.6 小鼠睾丸组织抗氧化功能检测结果
        3.1.7 小鼠血清激素检测结果
        3.1.8 小鼠精子发生障碍检测结果
        3.1.9 小鼠睾丸间质细胞损伤检测结果
        3.1.10 小鼠睾丸支持细胞损伤检测结果
        3.1.11 小鼠SIRT3 介导的线粒体损伤检测结果
        3.1.12 小鼠睾丸组织自噬检测结果
        3.1.13 小鼠睾丸组织凋亡检测结果
    3.2 番茄红素拮抗阿特拉津致TM3 细胞毒性检测项目结果
        3.2.1 TM3 细胞阿特拉津及番茄红素浓度的筛选
        3.2.2 TM3 细胞SIRT3 介导的线粒体损伤检测结果
        3.2.3 TM3 细胞线粒体自噬检测结果
        3.2.4 TM3 细胞凋亡检测结果
    3.3 番茄红素拮抗阿特拉津致TM4 细胞毒性检测项目结果
        3.3.1 TM4 细胞阿特拉津及番茄红素浓度的筛选
        3.3.2 TM4 细胞SIRT3 介导的线粒体损伤检测结果
        3.3.3 TM4 细胞线粒体自噬检测结果
        3.3.4 TM4 细胞凋亡检测结果
4 讨论
    4.1 番茄红素通过SIRT3 信号通路拮抗阿特拉津致小鼠睾丸毒性
        4.1.1 番茄红素拮抗阿特拉津致睾丸毒性的影响
        4.1.2 番茄红素拮抗阿特拉津致精子发生障碍的影响
        4.1.3 番茄红素拮抗阿特拉津致睾丸间质细胞损伤及睾酮合成障碍的影响
        4.1.4 番茄红素拮抗阿特拉津致睾丸支持细胞损伤及紧密连接的影响
        4.1.5 番茄红素拮抗阿特拉津致SIRT3 介导的睾丸组织线粒体损伤的影响
        4.1.6 番茄红素拮抗阿特拉津致睾丸组织线粒体自噬的影响
    4.2 番茄红素通过SIRT3 信号通路拮抗阿特拉津致TM3 细胞毒性
    4.3 番茄红素通过SIRT3 信号通路拮抗阿特拉津致TM4 细胞毒性
5 结论
致谢
参考文献
攻读博士学位期间发表的学术论文



本文编号：4015534