α1-抗胰凝乳蛋白酶在朊病毒感染啮齿动物脑组织中变化的研究

发布时间：2018-03-22 04:01

  本文选题：PrP　切入点：星形胶质细胞　出处：《中国疾病预防控制中心》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：α1-抗胰凝乳蛋白酶是一种急性期炎症相关蛋白,目前已在阿尔茨海默病患者脑组织纤维斑块中发现,但是在朊病毒病中却鲜有报道。为了探究α1-抗胰凝乳蛋白酶在朊病毒病中的变化规律,我们选取了羊瘙痒因子263K感染的仓鼠和139A、ME7感染的小鼠脑组织,利用多种实验方法对α1-抗胰凝乳蛋白酶的变化规律进行分析。我们发现在以上三种朊病毒毒株感染的啮齿类动物脑组织中,α1-抗胰凝乳蛋白酶的含量明显增加,并且随着疾病潜伏期的增加呈递增的趋势。通过免疫组化实验发现,在羊瘙痒因子感染的啮齿类动物脑组织中,增加的α1-抗胰凝乳蛋白酶主要分布在皮层、丘脑和小脑区域。免疫荧光实验显示,α1-抗胰凝乳蛋白酶与表达GFAP的星形胶质细胞存在共定位,同时与表达Ibal的小胶质细胞和表达NeuN的神经元也存在共定位。后续免疫荧光染色发现羊瘙痒因子263K感染的仓鼠脑组织中,α1-抗胰凝乳蛋白酶与PrP存在大量的共定位,并且朊病毒感染仓鼠脑组织连续切片的免疫组织化学结果显示,PrPSc沉积位点存在α1-抗胰凝乳蛋白酶的阳性信号。但是随后的免疫共沉淀实验却无法在羊瘙痒因子263K感染的仓鼠脑匀浆和朊病毒感染的细胞系SMB-S15裂解液中发现α1-抗胰凝乳蛋白酶与PrP直接分子相互作用的证据。综上结果提示,在朊病毒感染的啮齿动物的脑组织中α1-抗胰凝乳蛋白酶的含量明显增加,同时脑组织中α1-抗胰凝乳蛋白酶与PrP的共定位现象并不是由于直接的分子间相互作用所导致的。
[Abstract]:伪 1-antichymotrypsin is an inflammatory related protein in acute stage, which has been found in the fibrous plaques of brain tissue in patients with Alzheimer's disease. In order to investigate the changes of 伪 1-antichymotrypsin in prion disease, we selected hamsters infected with pruritus factor 263K and brain tissues infected with 139Ame7. The changes of 伪 _ 1-antichymotrypsin were analyzed by various experimental methods. We found that the content of 伪 _ 1-antichymotrypsin in the brain tissues of rodents infected with the three prion strains was significantly increased. It was found by immunohistochemistry that the increased 伪 _ 1-antichymotrypsin was mainly distributed in the cortex of rodents infected with pruritus factor. Immunofluorescence assay showed that 伪 1-antichymotrypsin was colocated with astrocytes expressing GFAP. There were also co-localization with microglia expressing Ibal and neurons expressing NeuN. The subsequent immunofluorescence staining showed that 伪 1-antichymotrypsin and PrP co-located in hamster brain tissue infected with pruritus factor 263K. The immunohistochemical results of the serial sections of brain tissue of hamsters infected with prion showed that there was a positive signal of 伪 1-antichymotrypsin at the PRPSc deposition site. However, the subsequent immunoprecipitation test could not be used at the level of PrPSc 263K. Evidence of direct interaction of 伪 1-antichymotrypsin with PrP was found in infected hamster brain homogenate and prion infected cell line SMB-S15 cleavage. The content of 伪 1-antichymotrypsin in prion infected rodent brain was significantly increased, and the co-localization of 伪 1-antichymotrypsin with PrP was not caused by direct intermolecular interaction.
【学位授予单位】：中国疾病预防控制中心
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R373

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本文编号：1646939