改进型免疫侧向层析三聚氰胺检测方法研究

发布时间：2017-12-25 22:35

  本文关键词：改进型免疫侧向层析三聚氰胺检测方法研究　出处：《合肥工业大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 三聚氰胺 金纳米粒子 免疫层析 试纸条 信号增敏

【摘要】：三聚氰胺是含氮量极高的工业化学原料,在食品中非法添加长期误食会对泌尿系统造成损害,因此针对三聚氰胺建立快速、灵敏、便捷的新型检测方案对维护人类健康和食品安全具有很重要的意义。本文介绍了以下两种快速检测方法:(1)三聚氰胺传统型免疫层析检测技术建立本方法基于经典的抗原抗体免疫识别方法和竞争法检测原理进行三聚氰胺的识别检测,在金纳米粒子表面标记组装三聚氰胺抗体,T线固定三聚氰胺抗原,C线固定羊抗鼠二抗,肉眼通过观察T/C线是否显现定性分析三聚氰胺的存在状况,结合扫描线条的显色强度进行三聚氰胺定量分析。实验中优化了金纳米粒子粒径、NC膜类型和样品垫缓冲液等关键参数,最佳实验条件下,9分钟完成检测,肉眼观测灵敏度为100 ppb,在检测范围0-200 ppb能够建立线性良好的标准曲线(R~2=0.9888),本方法具有卓越的识别特异性,牛奶复杂样品检测应用结果和标准品检测结果高度一致。(2)三聚氰胺增敏型免疫层析检测技术建立本研究在传统的基于竞争法层析试纸条的基础上进行改进,增加一个BSA抗体与金纳米粒子制备的增敏元件构建增敏型试纸条,将传统型试纸条的灵敏度大大提高。本增敏型三聚氰胺检测试纸条研究中,主要优化了增敏金的粒径,增敏元件上抗体的量和标记pH值。在识别垫采用25 nm金纳米粒子,增强垫采用15 nm金纳米粒子,并采用赛多利斯CN95膜,可在9分钟内实现三聚氰胺的超灵敏快速检测,肉眼检测灵敏度为5 ppb,相比于传统型方法灵敏度提升了20倍,标准曲线检测线性范围为:0.1-5 ppb(R~2=0.9861),检测实际牛奶样品的结果与标准品测试一致,在环境监测和食品安全等领域的具有巨大的应用潜力。
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：TS252.7

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 姚婷;李腾飞;秦玉昌;王静;赵祯;谷旭;佘永新;;分子印迹表面等离子共振传感器在食品安全检测中的最新研究进展[J];分析测试学报;2015年02期

2 刘珊珊;衣馨瑶;王建秀;;牛血清白蛋白-三聚氰胺偶联物修饰的表面等离子体激元共振芯片检测三聚氰胺含量[J];分析化学;2014年05期

3 邹怡佳;陈玉和;吴再兴;;改性三聚氰胺树脂的研究进展[J];林产化学与工业;2013年05期

4 赵亚华;李勇;;三聚氰胺的毒性及其检测方法研究进展[J];安徽预防医学杂志;2013年04期

5 林奇;陈佩;刘娟;符永鹏;张有明;魏太保;;汞离子荧光、比色传感器[J];化学进展;2013年07期

6 李淑群;曹碧云;常化仿;邓安平;;胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的三聚氰胺[J];分析化学;2013年07期

7 王正洲;孔清锋;;壳聚糖磷酸酯三聚氰胺盐阻燃剂的合成及在SBR中的应用[J];高分子材料科学与工程;2013年04期

8 夏骏;赖卫华;涂继平;徐国茂;张新宇;冯荣华;衷平海;何小立;;三聚氰胺胶体金免疫层析方法的建立[J];食品科学;2013年20期

9 刘世鹏;雷迎;黄国旺;陈宝;田光辉;;三聚氰胺检测方法的研究进展[J];畜牧与饲料科学;2012年03期

10 冯夏明;危加丽;尹波;杨鸣波;;三聚氰胺-甲醛树脂微胶囊包覆聚磷酸铵阻燃PP的性能[J];合成树脂及塑料;2012年02期

，

本文编号：1334757