麦胚清蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究

发布时间：2019-09-25 06:49

【摘要】：小麦胚芽是一种优质的植物蛋白源,蛋白质含量占营养物质的30%左右。麦胚蛋白的主要组成为清蛋白、球蛋白和麦醇溶蛋白,其中麦胚清蛋白含量最大,氨基酸组成配比最佳,且是可用水浸提法提取的一类蛋白质。本文在提取麦胚清蛋白的基础上,探究了麦胚清蛋白酶解的最佳酶解工艺,对不同水解度的清蛋白酶解物进行了功能特性和抗氧化力研究,并探究了合适水解度的酶解物抗氧化活性成分及其氨基酸组成分析。主要结论如下:(1)麦胚清蛋白氨基酸组成丰富且均衡,是一种优质的蛋白。SDS-PAGE电泳图表明,麦胚清蛋白是由多种亚基蛋白组成,分子量分别为14.61,19.49,24.77,30.02,48.51,67.88和82.22 kDa,其亚基蛋白多数分子量较大。(2)麦胚清蛋白酶解的最佳用酶为碱性蛋白酶,最优酶解条件为加酶量8000U/g蛋白,底物浓度2%,pH9.1,温度60℃,酶解时间2h,此时水解度达9.32%。(3)在最适酶解条件下制备不同水解度的麦胚清蛋白酶解物,溶解性得到改善,水解度越高溶解性越好,水解度为8.34%时,等电点处的溶解度从未水解时的49.52%提高到74.09%。而乳化性和乳化稳定性随水解度的增加而降低。当水解度低于7.54%时,酶解物对DPPH自由基和对羟自由基的清除率随水解度的提高而增强。浓度为100mg/mL,水解度为7.54%时的酶解物对DPPH自由基清除率达到59.68%,对羟自由基清除率达50.23%。(4)先利用超滤将水解时间60min的麦胚清蛋白酶解物分成分子量3kDa和≤3kDa两部分,其中≤3kDa部分含有较高的自由基清除率;Sephadex G-25凝胶层析对麦胚清蛋白酶解物的分离条件为:洗脱液为去离子水,洗脱速度为1.0m L/min的,上样浓度为100 mg/m L,上样量为1.0mL。在此条件下,≤3kDa部分的清蛋白酶解物被分离出3个峰(F1、F2、和F3),各峰都具有清除自由基能力,其中F3峰具有最高的自由基清除力,对DPPH?、OH?和O2-?清除率分别高达73.98%、46.21%和89.74%;使用超高效液相色谱对F3峰进行分析,图谱表明,F3峰不是单一物质,能被分成四个组分峰;对F3峰的氨基酸组成分析表明,F3峰氨基酸含量高,其中含量较多的几种氨基酸,如Glu、Asp、Leu、Phe等都具有抗氧化作用。
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：TS201.21

【参考文献】