浓香型白酒大曲中五种主要酶产生菌的多样性及变化规律研究
发布时间：2020-12-05 15:35
在浓香型白酒大曲发酵过程中,大曲在很大程度上决定了酿造质量,不同的大曲含有不同的产酶微生物群落结构及生物多样性。采用分子生物学的方法。所得实验结论如下:(1)实验分离得到产果胶酶原核产生菌菌落形态为9类,真核产生菌的菌落形态有10类。分子生物学鉴定产果胶酶原核微生物隶属于一个属6个种,为Bacillus属。产果胶酶真核微生物有Aspergillus(3种)和Penicillium(1种)两个属4个种,其中Aspergillus为优势菌群。此外,疑似未报道产果胶酶的原核微生物为Bacillus paralicheniformis strain。(2)产木聚糖酶原核微生物的菌落形态有12类,真核微生物的菌落形态有10类。鉴定到产木聚糖酶原核微生物有两个属(Bacillus和Cronobacter)10个种,其中,Bacillus属有8个种,表现出丰富的多样性。产木聚糖酶真核微生物有四个属,分别为Aspergillus(2种)、Lichtheimia(2种)、Rhizomucor(1种)、Penicillium(1种)。其中Bacillus oryzaecorticis strain、Bac...
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大曲制作流程
筛选和分离实验工艺流程如图2.1所示。根据图2.1流程,准确称取适量粉碎的大曲,倒入带玻璃珠的无菌水中浸泡振荡。静置5min待澄清后取适量的上清液进行梯度稀释[24],然后吸取适当的稀释液进行涂布平板,培养完成后,挑取显色的代表菌落进行纯化和保藏,并记录菌落形态特征。
菌株经过16S r DNA基因扩增后,挑选代表性菌株的送检结果,进行序列同源性比对,下载序列同源性最高的进行分析。为了进一步考察产果胶酶原核菌株的种属亲缘关系情况,实验应用MEGA软件构建系统进化树,结果如图2.2所示。图2.2中分析可以得到,产果胶酶原核微生物隶属于2个属,分别为Bacillus和Bacterium。菌株G-2B、G-3B、G-4B、G-6B、C46、C68都隶属于Bacillus,其中G-2B与Bacillus subtilis strain相似性最高,G-3B和G-4B与同一个模式菌株(Bacillus velezensis strain)的系统发育关系最近,C46与Bacillus licheniformis strain的相似性达99%,C68与Bacillus paralicheniformis strain的系亲缘性最近,G-6B与Bacillus sp的进化树节点支持率达99%;菌株C37属于Bacterium,与Bacterium strain的亲缘性达99%。综上,产果胶酶原核微生物主要为芽孢杆菌属,鉴定的送检菌株与模式菌株亲缘关系较近。
【参考文献】：
期刊论文
[1]脉冲强光诱变对黑曲霉产果胶酶活力的影响[J]. 张佰清,葛新宇,马凤鸣,马艺超,张士豪,谢加豪. 农业工程学报. 2020(03)
[2]木聚糖酶对全麦面团特性的影响研究[J]. 王佳玉,陈凤莲,汤晓智. 中国粮油学报. 2019(09)
[3]基于CRISPR/Cas9加工番茄α-Man突变体的构建[J]. 张圆圆,邵冬南,崔百明. 生物技术通报. 2019(06)
[4]嗜热拟青霉糖化酶的性质及其在黄酒酿造中的应用[J]. 刘双平,谢雅茜,江正强,闫巧娟,毛健. 酿酒科技. 2019(06)
[5]纤维素酶结合碱性蛋白酶提高冷榨大豆出油率的工艺优化[J]. 朱秀清,曾剑华,房媛媛,石彦国. 中国油脂. 2019(05)
[6]山西老陈醋高产糖化酶霉菌的筛选、鉴定及产酶条件优化[J]. 王佳丽,朗繁繁,陈旭峰,王如福,许女. 中国酿造. 2019(04)
[7]一株糖化真菌T6的分离筛选[J]. 曹文悦,李灵灵,高亚梅,晏磊,王伟东. 黑龙江八一农垦大学学报. 2019(02)
[8]多粮浓香型白酒中特征酵母菌与耐酸乳杆菌的关系[J]. 张霞,郑佳,赵东,乔宗伟,安明哲,杨康卓,罗青春. 微生物学通报. 2019(07)
[9]高产纤维素酶突变株的筛选及其产酶条件优化[J]. 邹宗胜,王婧雅,赵运英,毛银,邓禹. 食品科学. 2019(06)
[10]木聚糖酶和甘露聚糖酶在毕赤酵母中的共表达及产酶分析[J]. 姚银,闵琪,熊海容,张莉. 中国生物工程杂志. 2019(03)
硕士论文
[1]高产糖化酶的诱变育种及其基因克隆和表达[D]. 周晓红.中南林业科技大学 2019
本文编号：2899684
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大曲制作流程
筛选和分离实验工艺流程如图2.1所示。根据图2.1流程,准确称取适量粉碎的大曲,倒入带玻璃珠的无菌水中浸泡振荡。静置5min待澄清后取适量的上清液进行梯度稀释[24],然后吸取适当的稀释液进行涂布平板,培养完成后,挑取显色的代表菌落进行纯化和保藏,并记录菌落形态特征。
菌株经过16S r DNA基因扩增后,挑选代表性菌株的送检结果,进行序列同源性比对,下载序列同源性最高的进行分析。为了进一步考察产果胶酶原核菌株的种属亲缘关系情况,实验应用MEGA软件构建系统进化树,结果如图2.2所示。图2.2中分析可以得到,产果胶酶原核微生物隶属于2个属,分别为Bacillus和Bacterium。菌株G-2B、G-3B、G-4B、G-6B、C46、C68都隶属于Bacillus,其中G-2B与Bacillus subtilis strain相似性最高,G-3B和G-4B与同一个模式菌株(Bacillus velezensis strain)的系统发育关系最近,C46与Bacillus licheniformis strain的相似性达99%,C68与Bacillus paralicheniformis strain的系亲缘性最近,G-6B与Bacillus sp的进化树节点支持率达99%;菌株C37属于Bacterium,与Bacterium strain的亲缘性达99%。综上,产果胶酶原核微生物主要为芽孢杆菌属,鉴定的送检菌株与模式菌株亲缘关系较近。
【参考文献】：
期刊论文
[1]脉冲强光诱变对黑曲霉产果胶酶活力的影响[J]. 张佰清,葛新宇,马凤鸣,马艺超,张士豪,谢加豪. 农业工程学报. 2020(03)
[2]木聚糖酶对全麦面团特性的影响研究[J]. 王佳玉,陈凤莲,汤晓智. 中国粮油学报. 2019(09)
[3]基于CRISPR/Cas9加工番茄α-Man突变体的构建[J]. 张圆圆,邵冬南,崔百明. 生物技术通报. 2019(06)
[4]嗜热拟青霉糖化酶的性质及其在黄酒酿造中的应用[J]. 刘双平,谢雅茜,江正强,闫巧娟,毛健. 酿酒科技. 2019(06)
[5]纤维素酶结合碱性蛋白酶提高冷榨大豆出油率的工艺优化[J]. 朱秀清,曾剑华,房媛媛,石彦国. 中国油脂. 2019(05)
[6]山西老陈醋高产糖化酶霉菌的筛选、鉴定及产酶条件优化[J]. 王佳丽,朗繁繁,陈旭峰,王如福,许女. 中国酿造. 2019(04)
[7]一株糖化真菌T6的分离筛选[J]. 曹文悦,李灵灵,高亚梅,晏磊,王伟东. 黑龙江八一农垦大学学报. 2019(02)
[8]多粮浓香型白酒中特征酵母菌与耐酸乳杆菌的关系[J]. 张霞,郑佳,赵东,乔宗伟,安明哲,杨康卓,罗青春. 微生物学通报. 2019(07)
[9]高产纤维素酶突变株的筛选及其产酶条件优化[J]. 邹宗胜,王婧雅,赵运英,毛银,邓禹. 食品科学. 2019(06)
[10]木聚糖酶和甘露聚糖酶在毕赤酵母中的共表达及产酶分析[J]. 姚银,闵琪,熊海容,张莉. 中国生物工程杂志. 2019(03)
硕士论文
[1]高产糖化酶的诱变育种及其基因克隆和表达[D]. 周晓红.中南林业科技大学 2019
本文编号：2899684
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