鸽蛋卵转铁蛋白的提取及抗氧化活性的研究
发布时间：2021-01-04 20:43
本课题对鸽蛋的基本营养指标进行了测定,同时与其他禽蛋（鹅蛋、鸭蛋、鸡蛋、鹌鹑蛋）的基本营养物质进行比较。在此基础上,对鸽蛋中的主要蛋白进行定性检测并同时对具有抗氧化活性的卵转铁蛋白进行分离、鉴定。对鸽蛋卵转铁蛋白的体外抗氧化指标和细胞抗氧活化指标与鸡蛋中提取的卵转铁蛋白进行比较。结果如下:鸽蛋的蛋白含量11.80±0.10 g/100g、脂肪含量12.78±0.26 g/100g,富含矿物质钾146.33±1.52 mg/kg、钙362.01±2.64 mg/kg、铁101.41±0.36 mg/kg、磷1108.33±2.08 mg/kg。与其他禽蛋比较可知:鸽蛋氨基酸中脯氨酸含量（0.46±0.01g/100g）含量明显高于其他禽蛋（p<0.05）,体现出其在补充胶原蛋白方面的优势。鸽蛋中除上述几个指标显著高于其他禽蛋,其余指标均与其他种类禽蛋无明显差别,其中儿童必须氨基酸明显低于其他禽蛋,为0.71±0.03 g/100g,饱和脂肪酸含量也明显低于其他禽蛋,仅占总脂肪酸的31.51%。通过两次乙醇提取结合超滤法对鸽蛋中的卵转铁蛋白进行了提取试验,两次乙醇提取试验的最佳工艺为...
【文章来源】：哈尔滨商业大学黑龙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄糖标准曲线
哈尔滨商业大学硕士学位论文24（1∶1）至离心管，上盖，在管口戳个小洞。100℃水浴，5min。离心10000r/min，3min。配置电泳液，并将电泳装置拆除转移到另一个电泳架中，倒如电泳液至电泳槽中至溢出，去除气泡，外部电泳槽液体没过白线。小心拔梳子，添加样品至梳子形成的小孔，双端添加marker，中间添加样品，盖上盖子通电进行电泳80v，30min后，120v，60min。配制固定液：取乙醇50ml，冰乙酸10ml混匀，定容至100ml。电泳结束，加入固定液淹没浸泡5-10min。加考马斯亮蓝染色液染色60min，加脱色剂脱色。拍照取样[60]。3.4实验结果与讨论3.4.1考马斯亮蓝标准曲线的制作考马斯亮蓝标准曲线见图3-1图3-1考马斯亮蓝标准曲线Figure3-1StandardCurveofCoomassieblue由图3-1可得，考马斯亮蓝的标准曲线方程为y=0.8376x+0.0153。相关系数R2=0.9993，直观地说明了在595nm下，吸光度与牛血清蛋白的浓度有很好的线性关系，两者相关性强。标准曲线制作误差小，数据准确度高，为后续蛋白含量的测定提供依据。3.4.2卵转铁蛋白的提取单因素试验3.4.2.1蛋清稀释倍数对卵转铁蛋白的提取量的影响稀释蛋清是为了降低蛋清粘度，为下一步提取蛋白做准备。所以稀释倍数是影响卵转铁蛋白的提取量重要因素。实验考察不同稀释倍数（1、2、3、4、5）对卵转铁蛋白提取率的影响，以蛋白提取量为考察指标，固定其他提取条件为：第一次乙醇浓度43%，乙醇终浓度在59%时，离心转速6000r/min，磁力搅拌时间为2h进行试验。
卵转铁蛋白的提取与纯化-25-图3-2稀释倍数对蛋白提取量的影响Figure3-2Influenceofdilutionfactoronproteinextraction如图3-2所示，在1~5倍的稀释倍数中，卵转铁蛋白的提取量随稀释倍数的提高，呈现先增大后减小的趋势（P＜0.05），在2倍处达最高点，提取量为1.088±0.015g/100g。研究表明，稀释可以使蛋清粘度下降，从而使蛋清与提取溶剂的接触面积增大，提高目标成分的提取率。但当蛋清中稀释倍数含水量大于2倍时，继续增大稀释倍数，对蛋白的提取量影响不大，这可能是稀释倍数太大，提取物中蛋白含量过低，而影响提取效果。综合考虑，选用2倍稀释倍数最为提取蛋白量的最佳水平。这是因为蛋清液中存在着相互连接在一起的大分子黏蛋白，只有充分稀释一定的比例才能使黏蛋白分子彼此分开，使卵转铁蛋白更有利于分离出来[33]。3.4.2.2磁力搅拌时间对卵转铁蛋白的提取量的影响磁力搅拌是为了使溶液与试剂充分混合发生反应，以提取蛋白。磁力搅拌试剂是影响卵转铁蛋白的提取量重要因素。实验考察不同磁力搅拌时间（0.5、1、1.5、2、2.5h）对卵转铁蛋白提取率的影响，以蛋白提取量为考察指标，固定其他提取条件为：第一次乙醇浓度43%，乙醇终浓度在59%时，离心转速6000r/min，稀释倍数为2倍进行试验。、
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同品种肉鸽的生长性能及相关性分析[J]. 倪爱心,孙鸿,李云雷,陈绰琎,孙研研,李复煌,麻慧,陈继兰. 中国畜牧杂志. 2019(12)
[2]提高肉鸽繁殖的几项措施[J]. 杨丙友. 山东畜牧兽医. 2019(07)
[3]亚临界水法提取茶多糖及抗氧化活性研究[J]. 顾艳耿,胡仲秋,邱月,魏欣,岳田利,袁亚宏. 食品科技. 2019(06)
[4]平坝灰鹅蛋品质及营养成分的研究[J]. 李洪林,李维,祖盘玉,张福平,华时尚. 黑龙江畜牧兽医. 2018(02)
[5]鸽蛋营养成分测定与价值分析[J]. 李雪雁,戴佩芬,林苗,王远锋. 食品研究与开发. 2017(19)
[6]中国肉鸽种质资源研究和品种选育任重道远[J]. 杜炳旺. 养禽与禽病防治. 2017(04)
[7]不同透明度鸽蛋蛋白质构、微观结构及营养成分差异分析[J]. 常玲玲,卜柱,付胜勇,王晴,汤青萍,穆春宇. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[8]色差计评价鸽蛋蛋白透明度方法的建立[J]. 常玲玲,谢鹏,王晴,付胜勇,汤青萍,卜柱. 中国家禽. 2016(05)
[9]鸽子蛋的药用价值与养生疗法[J]. 赵庆楼,赵娟. 现代畜牧科技. 2016(03)
[10]卵转铁蛋白研究进展[J]. 李伟欣,杨武英,罗晶,龚维,吴磊燕. 萍乡学院学报. 2015(06)
博士论文
[1]禽蛋脂质分析及鸡蛋贮藏过程中脂质变化规律的研究[D]. 王庆玲.华中农业大学 2015
[2]蛋清活性蛋白高压脉冲电场提取及功能特性研究[D]. 张铁华.吉林大学 2008
硕士论文
[1]南瓜多糖及其衍生物的制备与抗氧化活性研究[D]. 陈玲.重庆师范大学 2019
[2]樟芝多糖的液态发酵、结构分析及体外抗氧化活性研究[D]. 王正齐.江南大学 2018
[3]卵转铁蛋白酶解物免疫调节功能的研究[D]. 刘琳.江西农业大学 2017
[4]两种不同来源的卵转铁蛋白N-糖链的质谱分析与比较[D]. 姜宽.西北大学 2014
[5]卵转铁蛋白的性质及分离纯化研究[D]. 佟永薇.天津大学 2013
[6]卵转铁蛋白分离纯化及促进双歧杆菌增殖活性研究[D]. 张婷.吉林大学 2009
[7]乳铁蛋白的提取、促进铁吸收及其抑菌性质的研究[D]. 张英华.东北农业大学 2000
本文编号：2957353
【文章来源】：哈尔滨商业大学黑龙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄糖标准曲线
哈尔滨商业大学硕士学位论文24（1∶1）至离心管，上盖，在管口戳个小洞。100℃水浴，5min。离心10000r/min，3min。配置电泳液，并将电泳装置拆除转移到另一个电泳架中，倒如电泳液至电泳槽中至溢出，去除气泡，外部电泳槽液体没过白线。小心拔梳子，添加样品至梳子形成的小孔，双端添加marker，中间添加样品，盖上盖子通电进行电泳80v，30min后，120v，60min。配制固定液：取乙醇50ml，冰乙酸10ml混匀，定容至100ml。电泳结束，加入固定液淹没浸泡5-10min。加考马斯亮蓝染色液染色60min，加脱色剂脱色。拍照取样[60]。3.4实验结果与讨论3.4.1考马斯亮蓝标准曲线的制作考马斯亮蓝标准曲线见图3-1图3-1考马斯亮蓝标准曲线Figure3-1StandardCurveofCoomassieblue由图3-1可得，考马斯亮蓝的标准曲线方程为y=0.8376x+0.0153。相关系数R2=0.9993，直观地说明了在595nm下，吸光度与牛血清蛋白的浓度有很好的线性关系，两者相关性强。标准曲线制作误差小，数据准确度高，为后续蛋白含量的测定提供依据。3.4.2卵转铁蛋白的提取单因素试验3.4.2.1蛋清稀释倍数对卵转铁蛋白的提取量的影响稀释蛋清是为了降低蛋清粘度，为下一步提取蛋白做准备。所以稀释倍数是影响卵转铁蛋白的提取量重要因素。实验考察不同稀释倍数（1、2、3、4、5）对卵转铁蛋白提取率的影响，以蛋白提取量为考察指标，固定其他提取条件为：第一次乙醇浓度43%，乙醇终浓度在59%时，离心转速6000r/min，磁力搅拌时间为2h进行试验。
卵转铁蛋白的提取与纯化-25-图3-2稀释倍数对蛋白提取量的影响Figure3-2Influenceofdilutionfactoronproteinextraction如图3-2所示，在1~5倍的稀释倍数中，卵转铁蛋白的提取量随稀释倍数的提高，呈现先增大后减小的趋势（P＜0.05），在2倍处达最高点，提取量为1.088±0.015g/100g。研究表明，稀释可以使蛋清粘度下降，从而使蛋清与提取溶剂的接触面积增大，提高目标成分的提取率。但当蛋清中稀释倍数含水量大于2倍时，继续增大稀释倍数，对蛋白的提取量影响不大，这可能是稀释倍数太大，提取物中蛋白含量过低，而影响提取效果。综合考虑，选用2倍稀释倍数最为提取蛋白量的最佳水平。这是因为蛋清液中存在着相互连接在一起的大分子黏蛋白，只有充分稀释一定的比例才能使黏蛋白分子彼此分开，使卵转铁蛋白更有利于分离出来[33]。3.4.2.2磁力搅拌时间对卵转铁蛋白的提取量的影响磁力搅拌是为了使溶液与试剂充分混合发生反应，以提取蛋白。磁力搅拌试剂是影响卵转铁蛋白的提取量重要因素。实验考察不同磁力搅拌时间（0.5、1、1.5、2、2.5h）对卵转铁蛋白提取率的影响，以蛋白提取量为考察指标，固定其他提取条件为：第一次乙醇浓度43%，乙醇终浓度在59%时，离心转速6000r/min，稀释倍数为2倍进行试验。、
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同品种肉鸽的生长性能及相关性分析[J]. 倪爱心,孙鸿,李云雷,陈绰琎,孙研研,李复煌,麻慧,陈继兰. 中国畜牧杂志. 2019(12)
[2]提高肉鸽繁殖的几项措施[J]. 杨丙友. 山东畜牧兽医. 2019(07)
[3]亚临界水法提取茶多糖及抗氧化活性研究[J]. 顾艳耿,胡仲秋,邱月,魏欣,岳田利,袁亚宏. 食品科技. 2019(06)
[4]平坝灰鹅蛋品质及营养成分的研究[J]. 李洪林,李维,祖盘玉,张福平,华时尚. 黑龙江畜牧兽医. 2018(02)
[5]鸽蛋营养成分测定与价值分析[J]. 李雪雁,戴佩芬,林苗,王远锋. 食品研究与开发. 2017(19)
[6]中国肉鸽种质资源研究和品种选育任重道远[J]. 杜炳旺. 养禽与禽病防治. 2017(04)
[7]不同透明度鸽蛋蛋白质构、微观结构及营养成分差异分析[J]. 常玲玲,卜柱,付胜勇,王晴,汤青萍,穆春宇. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[8]色差计评价鸽蛋蛋白透明度方法的建立[J]. 常玲玲,谢鹏,王晴,付胜勇,汤青萍,卜柱. 中国家禽. 2016(05)
[9]鸽子蛋的药用价值与养生疗法[J]. 赵庆楼,赵娟. 现代畜牧科技. 2016(03)
[10]卵转铁蛋白研究进展[J]. 李伟欣,杨武英,罗晶,龚维,吴磊燕. 萍乡学院学报. 2015(06)
博士论文
[1]禽蛋脂质分析及鸡蛋贮藏过程中脂质变化规律的研究[D]. 王庆玲.华中农业大学 2015
[2]蛋清活性蛋白高压脉冲电场提取及功能特性研究[D]. 张铁华.吉林大学 2008
硕士论文
[1]南瓜多糖及其衍生物的制备与抗氧化活性研究[D]. 陈玲.重庆师范大学 2019
[2]樟芝多糖的液态发酵、结构分析及体外抗氧化活性研究[D]. 王正齐.江南大学 2018
[3]卵转铁蛋白酶解物免疫调节功能的研究[D]. 刘琳.江西农业大学 2017
[4]两种不同来源的卵转铁蛋白N-糖链的质谱分析与比较[D]. 姜宽.西北大学 2014
[5]卵转铁蛋白的性质及分离纯化研究[D]. 佟永薇.天津大学 2013
[6]卵转铁蛋白分离纯化及促进双歧杆菌增殖活性研究[D]. 张婷.吉林大学 2009
[7]乳铁蛋白的提取、促进铁吸收及其抑菌性质的研究[D]. 张英华.东北农业大学 2000
本文编号：2957353
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