羊肚菌的集硒特性及含硒活性物质初步研究

发布时间：2023-05-21 22:32

　　目的:研究羊肚菌富硒液体发酵培养条件,为集硒培养提供条件支撑;研究羊肚菌丝的集硒特性,为硒资源的有效利用提供新思路。探究集硒培养菌丝的生理生化指标和硒与大分子的结合方式,了解硒在羊肚菌丝生长发育中的生理作用和代谢机理,为含硒活性物质的生产提供参考,同时也为今后羊肚菌更深层次的分子研究提供参考。对不同溶解性和饱和度下蛋白的研究为含硒蛋白的提取和纯化工艺奠定基础,进而促进羊肚菌的精深加工、药用及保健品的进一步开发。方法:以亚硒酸钠为无机硒源,转化无机硒为有机硒的硒源利用率为考察指标,通过正交实验优化羊肚菌菌丝液体培养条件。利用水提醇沉法、Sevage法对菌丝中的多糖分别进行提取和初步纯化,硫酸蒽酮法测多糖含量。对可溶性蛋白质则采用磷酸缓冲液提取,硫酸铵沉淀、透析的方法初步纯化;采用考马斯亮蓝G250法测定可溶性蛋白含量。另对水溶性、醇溶性、碱溶性、盐溶性四种不同溶解性蛋白进行提取、硫酸铵沉淀和透析。总硒、多糖和蛋白质的硒含量均用原子荧光光谱法测定。利用试剂盒法测定菌丝T-SOD、POD、PPO活性和Pro含量。采用HPLC和外标法测定未加硒、正交最优组菌丝中的水解氨基酸种类和含量;通过LC...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
第1章 前言
    1.1 研究背景和意义
    1.2 研究内容及创新点
第2章 羊肚菌丝集硒培养条件优化
    2.1 引言
    2.2 材料、试剂及实验仪器
        2.2.1 材料
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器
    2.3 试验方法
        2.3.1 菌种活化
        2.3.2 单因素试验
        2.3.3 正交优化条件
        2.3.4 硒源利用率的测定
    2.4 结果分析
        2.4.1 硒浓度对菌丝干重的影响
        2.4.2 硒浓度对硒源利用率的影响
        2.4.3 培养温度对硒源利用率的影响
        2.4.4 装液量对硒源利用率的影响
        2.4.5 培养天数硒源利用率的影响
        2.4.6 正交试验结果分析
    2.5 小结与讨论
第3章 硒对羊肚菌丝生理生化特性的研究
    3.1 引言
    3.2 材料、试剂及实验仪器
        3.2.1 材料
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器
    3.3 试验方法
        3.3.1 T-SOD活力测定
        3.3.2 POD活力测定
        3.3.3 PPO活力测定
        3.3.4 Pro含量测定
        3.3.5 葡萄糖和蛋白质标准曲线的绘制
        3.3.6 菌丝中多糖的提取和含量测定
        3.3.7 菌丝中可溶性蛋白的提取和含量测定
    3.4 结果分析
        3.4.1 不同硒浓度添加对菌丝T-SOD活力的影响
        3.4.2 不同硒浓度添加对菌丝POD活力的影响
        3.4.3 不同硒浓度添加对菌丝PPO活力的影响
        3.4.4 不同硒浓度添加对菌丝脯氨酸含量的影响
        3.4.5 葡萄糖和可溶性蛋白标准曲线
        3.4.6 不同硒浓度对菌丝多糖含量的影响
        3.4.7 不同硒浓度对菌丝可溶性蛋白含量的影响
    3.5 小结与讨论
第4章 羊肚菌丝含硒活性物质组成研究
    4.1 前言
    4.2 材料、试剂及仪器
        4.2.1 材料
        4.2.2 主要试剂
        4.2.3 主要仪器
    4.3 试验方法
        4.3.1 菌丝多糖中硒含量的测定
        4.3.2 蛋白质的硒含量测定
        4.3.3 不同溶解性蛋白的提取和硒含量测定
        4.3.4 不同硫酸铵饱和度沉淀所得蛋白的硒含量测定
        4.3.5 未加硒组和正交最优组水解氨基酸比较
        4.3.6 未加硒组和正交最优组硒代氨基酸的比较
    4.4 结果分析
        4.4.1 不同硒浓度对多糖中硒含量的影响
        4.4.2 不同硒浓度对可溶性蛋白质中硒含量的影响
        4.4.3 不同溶解性蛋白的硒含量的比较
        4.4.4 不同硫酸铵饱和度下菌丝蛋白的硒含量比较
        4.4.5 菌丝水解氨基酸标准曲线的绘制
        4.4.6 菌丝硒代氨基酸标准曲线的绘制
        4.4.7 未加硒组与正交最优组水解氨基酸比较
        4.4.8 未加硒组与正交最优组硒代氨基酸比较
    4.5 小结与讨论
结论
参考文献
综述
    1 硒概述
        1.1 硒元素
        1.2 微生物硒代谢
        1.3 硒与人体健康
        1.4 硒分布与硒产业
        1.5 含硒活性物质功能
    2 羊肚菌
        2.1 羊肚菌概况
        2.2 羊肚菌生物活性物质
            2.2.1 羊肚菌多糖
            2.2.2 羊肚菌蛋白
            2.2.3 羊肚菌氨基酸
    3 食用菌集硒进展
        3.1 平菇
        3.2 香菇
        3.3 灵芝
        3.4 黑木耳
        3.5 金针菇
        3.6 羊肚菌
攻读硕士学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3821548