红茶及茶黄素改善氧化应激效应研究

发布时间：2017-08-09 20:06

  本文关键词：红茶及茶黄素改善氧化应激效应研究

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【摘要】：随着饮茶习俗的盛行,茶叶功效受到了越来越多人关注。本论文以模式生物秀丽隐杆线虫为研究对象,研究了氧化应激条件下红茶和红茶主要功能成分茶黄素对秀丽线虫的保护作用及其机制。在正常培养条件下,500与1000 mg/L红茶分别显著延长线虫平均寿命8.1%和9.4%(p0.01),而100与2000 mg/L红茶作用不显著。在氧化应激条件下,100、500与1000mg/L红茶处理组平均寿命分别显著延长了10.5%,18.1%和24.2%(p0.01)。通过检测红茶对其生长和产卵量的影响,发现1000与2000 mg/L红茶均未改变其发育。茶黄素对秀丽线虫氧化应激状况的改善同样存在浓度差异。在正常培养条件下,100与200 mg/L茶黄素分别显著延长线虫平均寿命5.9%(p0.05)和8.2%(p0.01)。在氧化应激条件下,100与200 mg/L的茶黄素的延长分别显著延长线虫平均寿命11.9%和16.5%(p0.01)。50与400 mg/L茶黄素对线虫平均寿命影响及机体氧化应激改善均无显著性。100、200与400 mg/L茶黄素在培育100 min至120 min时均能降低秀丽线虫体内活性氧含量。p38MAPK途径中sek-1基因或pmk-1基因的敲除,茶黄素对秀丽线虫失去保护作用。茶黄素能调节DAF-16的核转移,在氧化应激条件下,茶黄素对秀丽线虫体内抗氧化酶基因skn-1、sod-3、gsh-px均有上调作用。
【关键词】：红茶 茶黄素 秀丽线虫 氧化应激
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TS272.52
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 第一章 绪论11-19
• 1.1 红茶及茶黄素(TFs)调节自由基机制研究进展11-12
• 1.1.1 红茶及茶黄素调节自由基的产生11-12
• 1.1.2 红茶及茶黄素直接调节自由基的含量12
• 1.2 氧化应激概念12-13
• 1.3 红茶及茶黄素对人类疾病防治功效研究进展13-15
• 1.3.1 红茶及茶黄素预防癌症和抗肿瘤作用13-14
• 1.3.2 红茶及茶黄素对心血管疾病的防治作用14
• 1.3.3 红茶及茶黄素对慢性炎症的防治作用14
• 1.3.4 红茶及茶黄素对肥胖的防治作用14-15
• 1.3.5 红茶及茶黄素对神经性退行疾病的保护作用15
• 1.4 秀丽线虫作为科学研究模式生物的可行性研究进展15-17
• 1.4.1 秀丽隐杆线虫的生活习性15
• 1.4.2 秀丽线虫作为模式生物的发展过程15-16
• 1.4.3 秀丽隐杆线虫作为模式生物的主要优势16-17
• 1.4.4 秀丽线虫的氧化应激应答模式17
• 1.5 研究目的与意义17-19
• 第二章 红茶改善秀丽线虫氧化应激研究19-27
• 2.1 实验材料19-20
• 2.1.1 主要仪器19
• 2.1.2 主要试剂19
• 2.1.3 红茶提取物的制备19-20
• 2.1.4 秀丽线虫品系20
• 2.2 实验方法20-22
• 2.2.1 实验试剂配制20-21
• 2.2.2 E.coli OP50的培养21
• 2.2.3 秀丽线虫培养21
• 2.2.4 正常条件下寿命实验21
• 2.2.5 正常条件下形态学实验21-22
• 2.2.6 急性氧化应激实验22
• 2.2.7 慢性氧化应激实验22
• 2.3 数据处理22
• 2.4 结果与分析22-25
• 2.4.1 正常培养条件下红茶对秀丽线虫寿命的影响22-23
• 2.4.2 正常培养条件下红茶对秀丽线虫生长长度和产卵量的影响23-24
• 2.4.3 急性氧化应激条件下红茶对秀丽线虫的保护作用24-25
• 2.4.4 慢性氧化应激条件下红茶对秀丽线虫的保护作用25
• 2.5 讨论25-27
• 第三章 茶黄素改善秀丽线虫氧化应激研究27-35
• 3.1 实验材料27-28
• 3.1.1 主要仪器27
• 3.1.2 主要试剂27
• 3.1.3 茶黄素混合物(TFs)制备27
• 3.1.4 秀丽线虫品系27-28
• 3.2 实验方法28-29
• 3.2.1 实验试剂配制28
• 3.2.2 E.coli OP50的培养28
• 3.2.3 秀丽线虫培养28
• 3.2.4 正常培养条件下寿命实验28
• 3.2.5 正常培养条件下形态学实验28
• 3.2.6 急性氧化应激实验28-29
• 3.2.7 慢性氧化应激实验29
• 3.3 数据处理29
• 3.4 结果与分析29-32
• 3.4.1 正常培养条件下茶黄素(TFs)对秀丽线虫寿命的影响29-30
• 3.4.2 正常培养条件下茶黄素(TFs)对秀丽线虫生长长度和产卵量的影响30-31
• 3.4.3 急性氧化应激条件下茶黄素(TFs)对秀丽线虫的保护作用31-32
• 3.4.4 慢性氧化应激条件下茶黄素(TFs)对秀丽线虫的保护作用32
• 3.5 讨论32-35
• 第四章 茶黄素改善秀丽线虫氧化应激作用机理分析35-45
• 4.1 实验材料35-36
• 4.1.1 主要仪器35
• 4.1.2 主要试剂35-36
• 4.1.3 实验材料36
• 4.1.4 秀丽线虫品系36
• 4.2 实验方法36-39
• 4.2.1 实验试剂配制36-37
• 4.2.2 E.coli OP50的培养37
• 4.2.3 秀丽线虫培养37
• 4.2.4 秀丽线虫的取样方法37
• 4.2.5 秀丽线虫中活性氧自由基(ROS)的检测37-38
• 4.2.6 p38 MAPK信号通路检验38
• 4.2.7 荧光可视化38
• 4.2.8 荧光定量PCR测定mRNA水平的表达38-39
• 4.3 数据处理39-40
• 4.4 结果与分析40-43
• 4.4.1 茶黄素(TFs)调节秀丽线虫体内活性氧自由基(ROS)的浓度40
• 4.4.2 茶黄素通过p38 MAPK信号通道调节氧化应激40-41
• 4.4.3 茶黄素调节秀丽线虫中DAF-16的核转移41-42
• 4.4.4 茶黄素调节秀丽线虫中与氧化应激相关的基因的表达42-43
• 4.5 讨论43-45
• 全文总结45-46
• 参考文献46-54
• 致谢54-55
• 作者简介55

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