苦荞叶黄酮提取纯化及其降血脂活性研究

发布时间：2017-08-30 20:41

  本文关键词：苦荞叶黄酮提取纯化及其降血脂活性研究

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【摘要】：苦荞麦是一种蓼科双子叶植物,富含生物类黄酮芦丁、糖醇等活性成分。研究表明黄酮类化合物具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗癌等多种功效,是食品药品领域关注的热点之一。为了充分利用苦荞中黄酮类化合物,本文研究了苦荞叶黄酮的提取纯化工艺、苦养全叶及其醇提物对高脂膳食仓鼠血脂水平的影响。采用分光光度法对不同生长天数苦荞叶中总黄酮进行了测定。结果显示在播种第55天到第75天之间的苦荞叶黄酮含量最高达到10.74%/干重。采用高效液相色谱法检测苦养叶醇提物中的黄酮类化合物单体成分,色谱柱为C18柱,流动相为乙腈和0.4%的磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为360 nm。结果检测出苦养叶醇提物中主要含有芦丁、槲皮素两种黄酮类化合物。通过单因素实验、响应面优化实验,得到醇提法提取苦养叶黄酮的最佳工艺为：提取温度为70℃,液固比为27：1,乙醇的体积分数为59%,提取时间为3小时。得到粗提取物得率为44.74%,其中黄酮纯度为24.03%。筛选出对总黄酮纯化效果较好的D101大孔树脂,优化得到了苦荞叶黄酮的纯化工艺条件为：室温下湿法装柱,径高比为1：17,上样量为2 BV,控制流速为4 mL/min,上样浓度为0.86 mg/mL,然后用75%乙醇溶液3 BV进行洗脱。得到纯化品黄酮纯度为52.15%。将雄性仓鼠随机分为空白组、模型组、苦养全叶组和苦荞叶醇提物低、高剂量组共5组(n=8)。饲喂6周后眼底静脉丛取血,断颈处死,测定血清与肝脏中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明：与模型对照组相比,苦养全叶及其醇提物各剂量组仓鼠血清、肝脏和中TC、TG含量均极显著降低(P0.01),粪便中TC、TG含量均极显著升高(P0.01),血清中HDL-C极显著增高(P0.01),动脉粥样硬化指数(AI)极显著降低(P0.01),血清和肝脏中的MDA含量均极显著降低(P0.01)。通过HE染色法对仓鼠肝脏的切片进行观察,发现苦养全叶或其醇提物可有效改善相应的病理症状。经上述实验证明,苦荞全叶及其醇提物具有降血脂的功效。
【关键词】：苦养叶 黄酮 提取纯化 仓鼠 降血脂
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TQ914.1;TS201.4
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1 前言9-18
• 1.1 苦荞概述9
• 1.2 黄酮类化合物9-13
• 1.2.1 黄酮类化合物的理化性质9
• 1.2.2 黄酮类化合物的生理功能9-11
• 1.2.3 黄酮类化合物的提取方法11
• 1.2.4 黄酮类化合物的纯化方法11-13
• 1.2.5 常用提取黄酮类化合物的天然产物13
• 1.3 高脂血症13-16
• 1.3.1 高脂血症的危害13-14
• 1.3.2 降血脂天然产物的研究进展14-15
• 1.3.3 高脂血症动物模型选择15-16
• 1.4 本课题的研究目的及意义16-18
• 2 材料与方法18-32
• 2.1 实验材料18-20
• 2.1.1 实验原料18
• 2.1.2 实验动物18
• 2.1.3 实验试剂18-19
• 2.1.4 实验仪器与设备19-20
• 2.2 实验方法20-30
• 2.2.1 苦荞叶粉末的制备20
• 2.2.2 苦荞叶最佳生长天数的确定20-21
• 2.2.3 优选醇提苦荞叶黄酮工艺21-23
• 2.2.4 大孔树脂分离纯化苦荞叶粗提取工艺研究23-25
• 2.2.5 苦荞全叶及其醇提物对高脂血症仓鼠血脂水平的影响25-30
• 2.3 苦荞叶的综合利用与开发30-32
• 2.3.1 苦荞叶和槐米、苦荞籽提取黄酮的市场价值分析30
• 2.3.2 一种新型苦荞茶的开发30-32
• 3 结果与讨论32-57
• 3.1 苦荞叶黄酮生成的最佳生长天数的确定32-42
• 3.1.1 苦荞叶中总黄酮含量测定32
• 3.1.2 不同生长天数苦荞叶总黄酮含量的测定32-33
• 3.1.3 苦荞叶粗提物黄酮类化合物成分的检测33-34
• 3.1.4 醇提工艺单因素实验考察34-36
• 3.1.5 苦荞叶粗提物得率和纯度36-37
• 3.1.6 响应面法优化工艺实验结果分析37-42
• 3.2 大孔树脂分离纯化苦荞叶提取物的工艺研究结果42-46
• 3.2.1 大孔树脂的静态吸附与解吸试验42
• 3.2.2 吸附树脂的静态吸附动力学曲线42-43
• 3.2.3 D101树脂对总黄酮动态吸附与洗脱能力的影响43-46
• 3.3 苦荞全叶及其醇提物对高脂膳食仓鼠血脂水平的影响46-54
• 3.3.1 苦荞全叶及其醇提物对高脂膳食仓鼠体重增加量、摄食量及相关脏器指数、脂重指数的影响46-48
• 3.3.2 苦荞全叶及其醇提物对仓鼠血清血脂水平的影响48-51
• 3.3.3 苦荞全叶及其醇提物对高血脂症仓鼠血脂水平的影响51-53
• 3.3.4 仓鼠血清、肝脏中MDA的含量53
• 3.3.5 肝组织HE染色结果53-54
• 3.4 苦荞叶的综合利用与开发54-57
• 3.4.1 苦荞叶和槐米、苦荞籽提取黄酮的市场价值分析结果54-56
• 3.4.2 新型苦荞茶的感官评价56-57
• 4 结论57-58
• 5 展望58-59
• 6 参考文献59-65
• 7 攻读硕士学位期间论文发表情况65-66
• 8 致谢66

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本文编号：761394