Shn3参与调控BMP9诱导的人羊膜间充质干细胞成骨分化与血管形成的效应和机制研究
发布时间：2021-03-10 01:15
研究背景/目的:目前在构建骨组织工程中血管形成的作用越来越受到广泛关注,但在构建骨组织工程中,血管形成和成骨分化之间的分子机制目前尚未阐明。人羊膜间充质干细胞（Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSC）是一种来源于人废弃胎盘表层的多潜能干细胞具有向成骨细胞,成软骨细胞和成脂细胞等多系分化的能力,hAMSCs也具有良好的血管生成能力;Schnurri-3（Shn3）也称为人类免疫缺陷病毒增强结合蛋白-3（human immunodeficiency virus type I enhancer binding protein 3,HIVEP3）属于BMP/TGF-?的同源物家族。由于Shn3在成骨细胞中的缺失导致Runx2蛋白水平升高进而增强骨形成;骨形态发生蛋白9（Bone morphogenetic protein 9）具有显著上调间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）中的各种成骨分化过程中成骨相关因子的表达也能够刺激血管生成相关因子表达。然而,目前Shn3是否能够调节以及如何调节BMP9诱导的hAMSCs在...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：145 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
细胞总RNA提取Fig1-1.TotalRNAisolationofcells.
重庆医科大学博士研究生学位论文35图1-1.人羊膜间充质干细胞的分离和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.图1-2.原代至第3代人羊膜间充质干细胞形态学观察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫荧光染色观察第3代人羊膜间充质干细胞波形蛋白和CK-19表达对第3代人羊膜间充质干细胞使用免疫荧光检测观察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表达，免疫荧光染色结果显示：第3代人羊膜间充质干细胞中波形蛋白表达呈阳性，而CK-19表达呈阴性，结果说明本实验中第3代人羊膜间充质干细胞高表达波形蛋白而低表达CK-19，提示第3代人羊膜间充质干细胞纯度较高，其中内皮细胞较少见图1-3。
重庆医科大学博士研究生学位论文35图1-1.人羊膜间充质干细胞的分离和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.图1-2.原代至第3代人羊膜间充质干细胞形态学观察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫荧光染色观察第3代人羊膜间充质干细胞波形蛋白和CK-19表达对第3代人羊膜间充质干细胞使用免疫荧光检测观察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表达，免疫荧光染色结果显示：第3代人羊膜间充质干细胞中波形蛋白表达呈阳性，而CK-19表达呈阴性，结果说明本实验中第3代人羊膜间充质干细胞高表达波形蛋白而低表达CK-19，提示第3代人羊膜间充质干细胞纯度较高，其中内皮细胞较少见图1-3。
本文编号：3073797
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【学位级别】：博士
【部分图文】：
细胞总RNA提取Fig1-1.TotalRNAisolationofcells.
重庆医科大学博士研究生学位论文35图1-1.人羊膜间充质干细胞的分离和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.图1-2.原代至第3代人羊膜间充质干细胞形态学观察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫荧光染色观察第3代人羊膜间充质干细胞波形蛋白和CK-19表达对第3代人羊膜间充质干细胞使用免疫荧光检测观察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表达，免疫荧光染色结果显示：第3代人羊膜间充质干细胞中波形蛋白表达呈阳性，而CK-19表达呈阴性，结果说明本实验中第3代人羊膜间充质干细胞高表达波形蛋白而低表达CK-19，提示第3代人羊膜间充质干细胞纯度较高，其中内皮细胞较少见图1-3。
重庆医科大学博士研究生学位论文35图1-1.人羊膜间充质干细胞的分离和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.图1-2.原代至第3代人羊膜间充质干细胞形态学观察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫荧光染色观察第3代人羊膜间充质干细胞波形蛋白和CK-19表达对第3代人羊膜间充质干细胞使用免疫荧光检测观察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表达，免疫荧光染色结果显示：第3代人羊膜间充质干细胞中波形蛋白表达呈阳性，而CK-19表达呈阴性，结果说明本实验中第3代人羊膜间充质干细胞高表达波形蛋白而低表达CK-19，提示第3代人羊膜间充质干细胞纯度较高，其中内皮细胞较少见图1-3。
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