益气活血法治疗动脉粥样硬化形成机制的实验探究

发布时间：2017-12-05 20:29

  本文关键词：益气活血法治疗动脉粥样硬化形成机制的实验探究

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【摘要】：目的益气活血法是治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的重要治法之一。为探究益气活血法治疗AS的作用和分子机制,本研究基于高脂饮食诱导载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)构建的小鼠AS模型,选取补阳还五汤加味(Buyang Huanwu Added Decoction)进行干预,为应用益气活血法治疗AS提供科学的理论和实验依据。方法选用雄性C57BL/6J小鼠10只和雄性ApoE-/-小鼠30只,7～8周龄。将正常雄性C57BL/6J小鼠设为正常对照组,雄性ApoE-/-小鼠随机设为空白对照组、模型组、补阳还五汤加味组和辛伐他汀组。模型组、补阳还五汤加味组和辛伐他汀组ApoE-/-小鼠均喂以高脂饲料。第4周后,补阳还五汤加味组和辛伐他汀组分别灌以补阳还五汤加水蛭粉与辛伐他汀片。第9周后,经全自动生化仪检测血清总胆固醇(Totalcholesterol,TC),甘油三酯(Triglyceride,TG),高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)值;取动物主动脉根部经苏木素-伊红(Hematoxylin and eosin,HE)常规染色后观察组织形态变化并测量纤维帽厚度、内-中膜厚度;通过检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)和细胞外信号调节激酶 5(extracellular-regulated kinase 5,ERK5)在小鼠主动脉中蛋白水平变化,探究补阳还五汤加味治疗AS在丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路中的机制。结果血脂水平,与C57BL/6J小鼠空白对照组相比,ApoE-/-小鼠空白对照组和模型组TC、TG、LDL-C均升高且HDL-C均降低(P0.05);与模型组相比,补阳还五汤加味组与辛伐他汀组均能减少ApoE-/-小鼠TC、TG、LDL-C水平,同时升高HDL-C(P0.05,P0.05)。与补阳还五汤加味组相比,辛伐他汀组TC、LDL-C水平降低(P0.05),但TG、HDL-C水平的变化不具有统计学意义(P0.05)。HE染色,C57BL/6J小鼠空白对照组主动脉管壁无斑块形成,ApoE-/-小鼠空白对照组管壁有极少斑块形成,模型组斑块形成明显,补阳还五汤加味组与辛伐他汀组较模型组斑块减少。纤维帽厚度和血管内-中膜厚度,与C57BL/6J小鼠空白对照组相比,ApoE-/-空白对照组小鼠的主动脉纤维帽厚度与血管内-中膜厚度有所增厚,但差异不具有统计学意义(P0.05);模型组小鼠主动脉纤维帽厚度和血管内-中膜厚度均有增厚(P0.05);与模型组相比,补阳还五汤加味组与辛伐他汀组小鼠的主动脉纤维帽厚度和血管内-中膜厚度均有减少(P0.05,P0.05);与补阳还五汤加味组相比,辛伐他汀组主动脉纤维帽厚度和血管内-中膜厚度均有减少,但不具有统计学意义(P0.05)。蛋白表达,与C57BL/6J小鼠空白对照组相比,模型组主动脉组织中p38MAPK蛋白表达升高(P0.05),ERK5蛋白表达降低(P0.05);与模型组相比,补阳还五汤加味组和辛伐他汀组均能降低p38 MAPK蛋白表达(P0.05),升高ERK5蛋白的表达(P0.05);与补阳还五汤加味组相比,辛伐他汀组能降低p38MAPK蛋白的表达(P0.05),升高ERK5蛋白表达但不具有统计学意义(P0.05)。结论1.补阳还五汤加味与辛伐他汀均有治疗AS的作用。2.补阳还五汤加味治疗AS发生的机制可能与干预MAPK信号通路中的p38 MAPK、ERK5途径有关。3.益气活血法是治疗AS的重要治法之一。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R259

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