β-catenin在桥本氏甲状腺炎淋巴细胞浸润中的作用及机制研究

发布时间：2017-12-08 18:02

  本文关键词：β-catenin在桥本氏甲状腺炎淋巴细胞浸润中的作用及机制研究

  更多相关文章： 桥本氏甲状腺炎 β-catenin IFN-γ 趋化因子 GSK-3β

【摘要】：目的:大量淋巴细胞浸润甲状腺组织是桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)疾病的主要病理特点。本文旨在探讨β-catenin是否参与调节桥本氏甲状腺炎组织中趋化因子的产生进而影响淋巴细胞向甲状腺组织浸润这一过程,探索其分子作用机制,为HT致病机制的研究提供新的方向。方法:1.采用HE染色法检测桥本氏甲状腺炎以及单纯结节性甲状腺肿患者甲状腺组织中淋巴细胞的浸润情况。2.采用免疫组织化学法检测桥本氏甲状腺炎以及单纯结节性甲状腺肿患者甲状腺组织中β-catenin、IFN-γ的表达情况。3.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1用不同浓度IFN-γ(250、500、1000 U/mL)处理后,采用Western blot检测细胞全蛋白中β-catenin的表达、细胞核/浆蛋白中β-catenin的表达,并采用实时定量PCR方法检测β-catenin的mRNA水平。4.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1经IFN-γ(500 U/mL)单独处理不同时间(1.5、3、6、12、24 h)后,Western blot检测Wnt信号通路蛋白p-GSK-3β、GSK-3β及β-catenin的表达变化。5.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1经IFN-γ(500 U/m L)单独处理或IFN-γ(500 U/mL)联合LiCl(10 mM)处理后,收集细胞培养上清,蛋白芯片法检测其中38种趋化因子的分泌情况,实时定量PCR方法检测趋化因子mRNA的表达水平。6.用siRNA-GSK-3β转染甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1后,检测IFN-γ处理对趋化因子调节作用的变化。7.用siRNA-β-catenin转染甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1后,检测IFN-γ处理对趋化因子调节作用的变化。结果:1.桥本氏甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润明显高于正常对照组,ifn-γ表达水平明显高于正常对照组,而β-catenin表达水平明显低于正常对照组。2.与对照组相比,梯度浓度ifn-γ处理致甲状腺上皮细胞β-catenin蛋白表达水平明显下降,β-catenin入核减少,以500u/mlifn-γ处理组降低最明显(p0.05);而β-catenin的mrna水平并无明显改变。3.与对照组相比,甲状腺上皮细胞经ifn-γ(500u/ml)单独处理不同时间(1.5、3、6、12、24h)后,p-gsk-3β的蛋白表达水平明显增高,而β-catenin的蛋白表达从6h组开始明显降低(p0.01)。4.与对照组相比,ifn-γ处理可致甲状腺上皮细胞趋化因子ccl2、ccl5、cxcl10、cxcl16、gro蛋白分泌增加(p0.05);而较ifn-γ处理组,ifn-γ联合licl处理组ccl5、cxcl16、gro分泌降低(p0.05),而ccl2、cxcl10无明显变化。5.用sirna-gsk-3β联合ifn-γ处理甲状腺上皮细胞株nthy-ori3-1,与单独ifn-γ处理组相比,趋化因子ccl5、cxcl16、gro-2、gro-3的分泌水平下降(p0.05)。6.用sirna-β-catenin联合ifn-γ处理甲状腺上皮细胞株nthy-ori3-1,与单独ifn-γ处理组相比,趋化因子gro-2、gro-3、ccl5、cxcl16的分泌水平增加(p0.05)。结论:桥本氏甲状腺炎患者的甲状腺组织中淋巴细胞大量浸润、ifn-γ表达明显增加,而甲状腺滤泡细胞中β-catenin表达明显减少;体外实验显示,ifn-γ通过活化wnt信号蛋白gsk-3β使得β-catenin的降解增加,并促进趋化因子的分泌。采用licl或sirna抑制gsk-3β的蛋白活性能够逆转ifn-γ对趋化因子分泌的诱导作用,而采用sirna抑制β-catenin的表达能够增强ifn-γ对趋化因子分泌的诱导作用。上述结果提示IFN-γ可通过甲状腺上皮细胞GSK-3β/β-catenin途径对趋化因子的分泌进行调控,可能是诱导桥本氏甲状腺炎淋巴细胞浸润的重要机制之一。
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R581.4

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;LOSS OF MEMBRANOUS E-CADHERIN EXPRESSION CORRELATES WITH ECTOPIC β-CATENIN ACCUMULATION AND POOR SURVIVAL IN HUMAN PANCREATIC ADENOCARCINOMA[J];中国现代医学杂志;2002年08期

2 麦玉洁,李云涛,邱录贵;β-catenin与恶性肿瘤[J];国外医学(内科学分册);2005年05期

3 ;α-catenin expression is decreased in patients with gastric carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2005年22期

4 姜涛;刘庆华;陈峻青;;β-catenin与恶性肿瘤关系的研究进展[J];现代肿瘤医学;2007年06期

5 林晓;李昱;米粲;;Expressions of beta-catenin, APC Protein, C-myc and Cyclin D1 in Ovarian Epithelial Tumor and Their Implication[J];Chinese Journal of Cancer Research;2007年02期

6 田黎明;谢红付;杨婷;李吉;胡威;彭圆;;β-catenin在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中的表达及意义[J];中国皮肤性病学杂志;2013年12期

7 王慧;张进祥;冯玮;张述;梁慧芳;汪洋;郑启昌;李卓娅;;PIN1 Gene Overexpression and β-catenin Gene Mutation/Expression in Hepatocellular Carcinoma and Their Significance[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2007年01期

8 林晓;胡琢瑛;;Expression of Wnt-1,beta-catenin and c-myc in Ovarian Epithelial Tumor and Its Implication[J];Chinese Journal of Cancer Research;2008年01期

9 王宛明;管淑敏;;α-catenin在食管鳞状上皮细胞癌中表达的免疫组化研究[J];中国现代医生;2008年19期

10 Mei-Fang Quan;Li-Hong Xiao;Zhi-Hong Liu;Hui Guo;Kai-Qun Ren;Fei Liu;Jian-Guo Cao;Xi-Yun Deng;;8-bromo-7-methoxychrysin inhibits properties of liver cancer stem cells via downregulation of β-catenin[J];World Journal of Gastroenterology;2013年43期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 ;Regulatory roles of β-catenin on the proliferation of hair follicle stem cells[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年

2 ;WntSa inhibits the growth of hair follicles by antagonizing canonical Wnt/p-catenin signaling in mice in vivo[A];中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2012年

3 ;The Cytoplasmic Domain of MUC1 Induces Hyperplasia in the Mammary Gland and Correlates with Nuclear Accumulation of β-catenin[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年

4 Jing Du;Yan Zu;Jing Li;Xiao-fei Chen;Guang-yao Zhang;Chun Yang;;Wnt/p-catenin feedback loop plays an important role in mechano-sensation of ECM elasticity[A];第十届全国生物力学学术会议暨第十二届全国生物流变学学术会议论文摘要汇编[C];2012年

5 Chan Xie;Dong-ying Xie;Geng-lin Zhang;Pei-pei Wang;Liang Peng;Zhi-liang Gao;;FOXG1 promote HCC stem cell self-renewal through promoting b-catenin nuclear accumulating by forming TCF4/b-cateinin/FOXG1 complex[A];中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2013年

6 武海丽;李宗伟;杨鹏;李卓玉;;Knockdown of PKM2 induces the compensation of glutaminolysis through β-catenin-Myc pathway intumor cells[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——大会报告及博士生论坛[C];2014年

7 武海丽;李宗伟;杨鹏;李卓玉;;Knockdown of PKM2 induces the compensation of glutaminolysis through β-catenin-Myc pathway in tumor cells[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——专题报告二[C];2014年

8 岳晓;张志勇;杨e，

本文编号：1267296