重复睡眠剥夺后小鼠行为学评估及海马炎症研究

发布时间：2017-12-09 15:34

  本文关键词：重复睡眠剥夺后小鼠行为学评估及海马炎症研究

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【摘要】：目的:本研究通过构建动物模型来模拟人类睡眠不足的持续性、周期性的特征,同时评估相应的行为学测试重复开展的可行性和有效性,探索慢性睡眠障碍的发病机制和治疗方法。方法:小鼠随机分为对照组和睡眠剥夺(Sleep deprivation,SD)组。SD组采用改进的多个小平台水环境法,3个月内反复、间断地对SD组小鼠进行3天或者7天的快动眼时相(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺造模。并且在第3、7、33、67天对所有小鼠进行开场实验和Y迷宫测试分别检测情绪和短期工作记忆能力。第82天开始Morris水迷宫试验以测试空间学习记忆能力。水迷宫测试结束后经过3周的睡眠恢复,再观察小鼠脑内海马炎症及相关的病理改变。结果:开场试验中,与对照组相比,首次3天的造模后,SD组的排便次数增加;7天SD后在中央区域的运动时间和运动距离降低;1个月后再次3天的SD,小鼠在中央区域的时间和距离减少;2个月后再次7天造模的SD组小鼠在中央区域的时间百分比、运动距离降低及排便次数增加。Y迷宫中,3天的SD未有明显影响,但首次及第二次7天的SD后,SD组小鼠相比于对照组来说,在新奇臂(Novel Arm,NA)的时间百分比、运动距离及进入NA臂的次数均减少,说明短期工作记忆明显受损。Morris水迷宫隐藏平台训练期时,与对照组小鼠相比,SD组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离明显减少,同时游泳速度较慢,但是SD组小鼠在测试期出现了明显的空间记忆障碍,在目标象限的时间和游泳距离百分比均明显降低及平台穿越交叉数减少。此外相对于对照组,再3天的睡眠剥夺后的SD组小鼠空间记忆障碍更严重,在目标象限的时间百分比、游泳距离及平台穿越次数均降低。尽管经过3周的睡眠恢复后,我们仍可以观察到造模组海马区比对照组的TNF-α水平显著增加及NF-κB信号通路激活,同时SD组小鼠Iba-1阳性小胶质细胞细胞表面面积增加,但是细胞密度未见改变,提示小胶质细胞轻度活化。与此同时,SD组小鼠海马区caspase-3阳性神经元的比例增高。结论:重复进行开场实验和Y迷宫测试能够分别成功地检测SD造模后小鼠的焦虑样行为和工作记忆障碍。但是Morris水迷宫试验不适合用于评价SD造模后小鼠的空间学习记忆能力,因为长期"花盆式"水环境的SD造模方法增加了小鼠对水环境的熟悉度,进而干扰了最后的结果。此外,尽管经过3周的睡眠恢复后,重复SD仍留有海马炎症。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R740

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