加味复肾汤对DN大鼠肾脏病变影响的研究

发布时间：2017-12-11 01:16

  本文关键词：加味复肾汤对DN大鼠肾脏病变影响的研究

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【摘要】：理论探析糖尿病肾病(DN)是糖尿病最严重的并发症之一,也是导致终末期肾病的主要原因。然而现代医学对于糖尿病肾病的发病机制还未完全阐明,且缺乏有效的治疗方法和药物。目前足细胞损伤机制的重要性备受关注,尤其是足细胞裂孔膜相关蛋白nephrin、podocin所具有的减缓肾脏损害作用,这为寻求更好地治疗糖尿病肾病的方法和药物提供了新的思路。DN属中医学"消渴" "肾消""下消"等范畴,中医药治疗具有一定的特色与优势。加味复肾汤(JWFST)是在多年临床实践经验积累的基础上,由之前治疗糖尿病肾病效方复肾汤(FST)加味而成。JWFST组方思路严谨,切合糖尿病肾病"气阴两虚,痰瘀互结,肾络不畅"之病机,体现了其多系统兼治、多脏器共投、多靶点用药的组方特点,较FST更贴近于临床实际,是一个值得深入研究的良方。实验研究目的:观察JWFST对DN大鼠肾脏病变的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,正常对照组(C)为雄性Wistar大鼠8只,常规饲养。其余大鼠正常饲养1周后腹腔注射STZ+CFA建立糖尿病模型。造模成功后分为模型组(M)、JWFST小剂量组(L1)、JWFST中剂量组(L2)、JWFST大剂量组(L3)。L1、L2、L3组分别按8mg/(kg·d)、16mg/(kg·d)、32mg/(kg·d)剂量灌胃;模型组以生理盐水灌胃。连续8周,定期测血糖、体重。实验结束后,采集血清和尿液,检测INS、TG、CHO、LDLC、HDLC、SCr、BUN、SOD、MDA、AST、ALT、UP等生化指标;轻取肾脏,光镜下观察肾脏组织病理变化;免疫荧光法检测肾组织nephrin和podocin的蛋白表达,RT-qPCR法检测肾组织nephrin、podocin的基因表达,Western Blotting法检测肾组织nephrin、podocin的蛋白表达。结果:与模型组比较,L1、L2、L3组的TG、CHO、HDLC、SCr、BUN、MDA、AST、ALT、UP 明显降低(P0.05 或P0.01),LDLC、SOD 明显升高(P0.05),病理学评分明显降低(P0.05),nephrin、podocin的免疫荧光表达明显上调,RT-qPCR基因表达明显上调,Western Blotting蛋白表达明显上调(P0.05或P0.01)。结论:①JWFST可明显降低病理学评分,改善模型动物肾脏系膜增生,细胞外基质(ECM)的积聚,肾小球萎缩和扩张等病理表现,最终使得DN大鼠的肾脏损害减轻。②JWFST并没有明显的降低血糖的作用,由此可见其发挥改善DN肾脏损害的作用与血糖的改善之间关系不大。③JWFST具有明显的降低DN大鼠血清MDA,升高SOD的作用,这表明JWFST发挥改善DN大鼠肾脏病变的作用,其机制可能与降低氧化应激反应,减少ROS的生成有关。④JWFST能降低SCr、BUN,改善肾脏功能;降低ALT、AST,改善肝脏功能。众所周知DN的病位主要在肾,但中医所谓"肝肾同源"",两者之间关系密切,相互影响。⑤JWFST能改善DN大鼠肾脏nephrin和podocin的表达,从而有助于改善DN大鼠的足细胞损伤,有助于修复肾小球滤过屏障,减轻DN大鼠的肾脏损害。JWFST组方有据,它能够减轻DN大鼠的肾脏病变损害,对肾脏有保护作用,而改善DN大鼠足细胞损伤、降低氧化应激反应、减少ROS生成等可能是其重要机制。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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