苦参碱对肝癌HepG-2细胞增殖和迁移的影响及分子机制研究

发布时间：2017-12-12 08:06

  本文关键词：苦参碱对肝癌HepG-2细胞增殖和迁移的影响及分子机制研究

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【摘要】：目的:探讨苦参碱(matrine,MAT)对肝癌细胞株HepG-2的增殖与迁移的影响及其分子机制。方法:不同浓度的MAT处理肝癌HepG-2细胞,1.MTT法检测MAT对HepG-2细胞的增殖的影响;2.平板克隆实验检测MAT对HepG-2细胞集落形成能力的影响;3.划痕愈合实验和Transwell小室实验检测MAT对HepG-2细胞迁移能力的影响;4.Hoechst 33342染色实验探讨MAT对HepG-2细胞凋亡的影响;5.Western blot实验检测Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白,Ezrin、p-Ezrin,上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物 E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表达,探讨MAT抑制HepG-2细胞增殖和迁移的作用及分子机制。结果:1.HepG-2细胞经0.25、0.5、1.0、1.5和2.0mg/ml的MAT处理后其增殖能力与对照组相比显著降低,并呈剂量和时间依赖性(P0.01);2.平板克隆实验结果显示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT显著抑制HepG-2细胞的集落形成,呈剂量依赖性(P0.01);3.Hoechst33342染色实验结果显示,与对照组相比0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT处理后HepG-2细胞的蓝色凋亡小体明显增多,并呈剂量依赖性(P0.05或P0.01);4.划痕愈合实验及Transwell小室实验结果显示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT可显著抑制HepG-2细胞的横向和纵向的迁移能力,并呈剂量依赖性(P0.01);5.Western blot检测结果显示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT处理可明显上调Bax/Bcl-2比值(P0.01)和上皮标记物E-cadherin蛋白的表达(P0.01),下调Ezrin、p-Ezrin(P0.05或P0.01)和间质标记物Vimentin、snail蛋白(P0.05或P0.01)的表达。结论:1.MAT抑制了肝癌HepG-2细胞的增殖和平板克隆形成,其机制可能与其诱导HepG-2细胞的凋亡相关;2.MAT抑制HepG-2细胞的横向和纵向迁移,机制可能与MAT通过调控Ezrin和EMT相关蛋白表达,逆转EMT的发生相关。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.7

【参考文献】

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本文编号：1281753