Gpr177在小鼠肠上皮以及肠癌中的功能研究

发布时间：2017-12-14 14:19

  本文关键词：Gpr177在小鼠肠上皮以及肠癌中的功能研究

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【摘要】：Wnt是一类分泌蛋白,它们在肠道稳态的维持中起着重要作用。Gpr177,又称为Wntless,它的多次跨膜结构类似于经典的G蛋白耦联受体,对Wnt蛋白的正确转运至关重要。目前关于Gpr177在肠道中生物学功能的研究较为缺乏,因此本课题拟对Gpr177在小鼠肠上皮以及肠癌中的功能进行探究。为了更好地研究Gpr177在肠道中的功能并同时解决Gpr177纯合敲除胚胎致死的问题,我们构建了Gpr177肠上皮特异性敲除小鼠模型进行研究。研究发现肠上皮Gpr177敲除后,小鼠肠组织的形态和结构完整,肠干细胞的增殖与分化没有发生明显的改变。为了排除周围间质细胞的代偿作用,我们进一步通过3D类器官体外培养的方法开展了研究。结果发现肠上皮Gpr177缺失会导致小肠类器官无法正常生长,干细胞的自我更新能力丧失并且分化异常,这证明Gpr177对于离体培养小肠干细胞的稳态维持具有重要作用。机制研究表明Gpr177肠上皮敲除的小肠类器官中Notch信号通路受到显著抑制,从而导致杯状细胞分化异常。另外,我们发现在类器官培养体系中加入WNT3a能够一定程度上改善Gpr177肠上皮敲除小鼠小肠类器官的生长缺陷,这表明Gpr177通过改变WNT3a分泌参与小肠稳态的调控。但有趣的是,Gpr177肠上皮敲除对结肠类器官的增殖和分化没有影响,这提示小肠和结肠对Gpr177具有不同的依赖性。为了探究Gpr177在肠癌发生发展中的功能,我们又构建了Apcfloxp/+自发性肠癌模型和炎症诱发性肠癌模型进行研究。结果显示与对照小鼠相比,Gpr177肠上皮敲除小鼠中肿瘤的大小和数目均没有显著性差异,说明肠上皮Gpr177在肠癌的发生发展中不发挥关键作用。综上所述,本课题证明了在没有间质细胞的离体情况下,肠上皮Gpr177通过提高WNT3a的分泌在小肠稳态维持中行使重要功能。但是其在体内肠道稳态维持和肠癌发生发展中并不发挥关键作用。因此,本研究拓展了Gpr177的已有认知并为肠癌的诊治提供了一定的理论依据。
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.3

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1 范玲玲;Gpr177在小鼠肠上皮以及肠癌中的功能研究[D];华东师范大学;2017年

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本文编号：1288209