用于修复放射性肠纤维化的MMP-3基因修饰干细胞的研究

发布时间：2017-12-24 00:34

  本文关键词：用于修复放射性肠纤维化的MMP-3基因修饰干细胞的研究　出处：《长春工业大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 基质金属蛋白酶3 干细胞 慢病毒载体 放射 纤维化

【摘要】：目前,人类肿瘤的发生率极高,放射治疗是其重要的医学治疗手段,然而对于腹腔、盆腔等身体部位,这种治疗方式会产生一定的副作用,一定的辐射强度下会引发放射性肠炎,继而引起肠道内细胞外基质成分(ECM)的过度沉积,发生放射性纤维化,肠纤维化的发生和发展严重影响患者愈后水平和生活质量。基质金属蛋白酶3(MMP-3)可以降解ECM,是重塑组织结构的关键酶,进而修复肠道组织。然而体内的MMP-3表达十分有限,机体不能主动修复完全,因而大量表达MMP-3可以作为放射性肠纤维化修复实验研究的靶点。本研究以小鼠软骨RNA为模板,克隆MMP-3基因,构建EGFP标记的MMP-3慢病毒表达载体(LV-MMP-3-EGFP),修饰小鼠胚胎干细胞(ES)和骨髓来源间充质干细胞(BM-MSCs);给予10GyX射线照射成纤维细胞(3T3),构建纤维化模型,将转染后的干细胞与纤维化细胞共培养,荧光显微镜下观察GFP绿色荧光蛋白,及共培养后纤维化细胞的形态变化,并用Western Blot检测MMP-3和TGF-β蛋白表达。现已成功构建慢病毒表达载体LV-MMP-3-EGFP,且成功转染GP2-293T细胞,ES细胞和BM-MSCs细胞;病毒感染的ES细胞中MMP-3蛋白表达高于对照组;病毒感染的ES细胞与3T3细胞共培养后,实验组与对照组中TGF-β蛋白表达无显著变化;病毒感染的BM-MSCs细胞与10 Gy X射线照射后的3T3细胞共培养后,实验组细胞形态和细胞密度发生变化。此结果表明LV-MMP-3-EGFP修饰的干细胞能够大量表达MMP-3蛋白,对放射后3T3细胞的异常增殖产生了抑制作用,细胞形态向正常形态发展,纤维化细胞发生修复,但是对3T3细胞中TGF-β表达没有显著影响。本研究为放射性肠纤维化的临床实验研究提供了理论基础和新的方向。
【学位授予单位】：长春工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R730.55

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 董金辉;任秀敏;徐鸥;王建星;;人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞[J];中国组织工程研究;2016年32期

2 胡凯;王仁生;;放射性肺损伤发病机制的研究进展[J];华夏医学;2016年03期

3 景文莉;张向群;;骨髓间充质干细胞移植对慢性胰腺炎大鼠模型胰腺纤维化的影响[J];天津医药;2016年05期

4 郎宏;戴春;;骨髓间充质干细胞对糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-9表达及纤维化的影响[J];中华实验外科杂志;2016年02期

5 余群芳;蔡震宇;朱俊;梅任美;黄永红;徐方云;熊丽霞;;siRNA干扰IL-13Rα2表达对人肺成纤维细胞TGF-β表达的影响[J];中国病理生理杂志;2015年10期

6 陈亮;毕波;曾继平;刘天一;朱宁文;杨清建;贾传龙;卢勇舟;周轶群;杨平;;罗格列酮对UVB诱导的小鼠光老化皮肤成纤维细胞MMPs表达和细胞外基质蛋白合成的影响[J];中国美容整形外科杂志;2015年08期

7 邱啸臣;张博;李元新;;慢性放射性肠炎的研究进展[J];大连医科大学学报;2015年03期

8 宋佳;张晓岚;;肠肌成纤维细胞与IBD相关肠纤维化[J];中国病理生理杂志;2014年09期

9 陈海燕;杨旭;王沛靓;;盆腔肿瘤放疗对兔直肠组织放射性纤维化形成的作用及机制[J];山东医药;2014年33期

10 Wen Zhang;Zhong-Yang Shen;Hong-Li Song;Yang Yang;Ben-Juan Wu;Nan-Nan Fu;Tao Liu;;Protective effect of bone marrow mesenchymal stem cells in intestinal barrier permeability after heterotopic intestinal transplantation[J];World Journal of Gastroenterology;2014年23期

相关硕士学位论文 前1条

1 高志买;间充质干细胞高分子量分泌成分对辐射性肠损伤的修复作用[D];安徽医科大学;2011年

，

本文编号：1326175