羟基红花黄色素A改善缺血性脑卒中认知功能的分子机制初步研究

发布时间：2017-12-25 21:27

本文关键词：羟基红花黄色素A改善缺血性脑卒中认知功能的分子机制初步研究　出处：《华东师范大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究目的脑卒中(stroke)有两种类型,分别是缺血性脑卒中(Ischemic stroke)、出血性脑卒中(Hemorrhagic stroke),其中缺血性脑卒中的发病率比出血性脑卒中要高,是临床上最常见的脑卒中病理类型。脑卒中会引发血管性认知功能障碍(vascular cognitive impairment,VCI),它增加了脑卒中患者再次复发的几率,严重者将会出现痴呆症状。临床数据显示,若在脑卒中出现认知功能障碍初期就能得到确诊并且给予相关的治疗,这样有可能降低血管性痴呆的发生几率。然而,当下针对缺血性脑卒及其伴随的认知损伤,缺乏有效的药物或其它治疗手段。我国传统中医学认为气血逆乱、瘀血阻滞会引发缺血心脑卒中。菊科植物红花(Carthamus tinctorius L)具有活血化瘀的功能,它的主要活性成份是其花彟中的黄色素(Safflower yellow,SY),而羟基红花黄色素 A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)的含量在SY中占比较高,是主要的活性单体。近年来,不断有治疗缺血性脑卒中过程中使用HSYA的研究报道。虽然HSYA的疗效确切且安全,但是还存在一些亟待改善的问题,如生物利用度低,给药时间窗短等。而更重要的是,我们对缺血性脑卒中治疗和预后过程中,HSYA对缺血带来的认知损伤是否具有很好的改善作用知之不多,对其脑保护作用的分子转导机制则了解更少。临床使用SY一般采用静脉注射给药,而有动物研究则发现颈动脉给药的方式优于静脉给药,因为这种给药方式可有效减少药物经血管的循环且到达病灶的时间,提高局部药物浓度,从而改善药物利用率和药效,并且还能扩张血管,改善病灶处血流量。本研究利用缺血性脑卒中MCAO大鼠模型,尝试通过颈动脉给药来探究HSYA对于缺血性脑卒中的治疗保护情况,同时考察不同时间窗给药与药效之间的关系。在此基础上,进一步围绕HSYA神经保护的JAK2/STAT3/SOCS3信号转导分子途径等问题展开研究,以期在更深入了解HSYA药物作用机制的同时,能为临床上缺血性脑卒中HSYA治疗方案的优化提供实验依据。实验方法建立脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,考察颈动脉注射给药方式下,不同给药时间窗(缺血再灌注3h,6h,9h)和不同给药剂量(4mg/kg,8mg/kg,16mg/kg)情况下,HSYA对缺血性脑卒中的治疗效果。从神经功能性评分、脑组织水肿以及大脑梗死体积的变化来评估HSYA经颈动脉给药的药效。通过旷场试验、水迷宫、被动回避实验相关行为学来进行检测HSYA对于缺血性脑卒中的认知功能是否具有改善作用。通过western bolt实验来检测缺血性脑卒中中,HSYA对大脑JAK2/STAT3/SOCS3信号通路的调控作用。实验结果(1)在缺血再灌注3h时给药8mg/kg、16mg/kg时,增加神经功能的评分、减少大鼠的大脑梗死体积、降低大脑组织的含水量。而在缺血6h,9h颈动脉给药,各组几乎无差异,说明没有药效作用。(2)通过旷场试验、水迷宫、避暗被动回避实验,结果显示8mg/kg、16mg/kg给药组对于学习记忆认知程度有着一定的恢复。(3)在缺血再灌注3h时给药8mg/kg、16mg/kg时,通过western bolt实验发现,STAT3蛋白、JAK2蛋白、SOCS3蛋白的表达量上升,p-JAK2蛋白、p-STAT3蛋白的表达量则下降。而在缺血6h,9h颈动脉给药,则没有相关蛋白地表达变化,说明没有药效作用。实验结论HSYA可显著减少MCAO大鼠大脑的梗死体积、增加神经功能评分及降低脑水肿,并能显著改善认知功能。HSYA这些作用与海马JAK2/STAT3/SOCS3信号通路的调控有关。HSYA的有效剂量是8mg/kg、16mg/kg,并且颈动脉给药的利用率大于静脉注射,JAK2/STAT3/SOCS3信号途径可能是HSYA治疗缺血性脑卒中的潜在治疗靶点。
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965;R-332

【参考文献】