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清热祛浊胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及胸主动脉内皮功能影响的实验研究

发布时间:2018-01-10 12:34

  本文关键词:清热祛浊胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及胸主动脉内皮功能影响的实验研究 出处:《河北医科大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文


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【摘要】:目的:观察清热祛浊胶囊对2型糖尿病大鼠血清NO、ET-1水平,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),胸主动脉t-PA、PAI-1表达,研究其对大血管病变影响及胰岛素抵抗影响,为指导临床治疗2型糖尿病及糖尿病性周围血管病变提供基础理论依据。方法:将49只成年雄性健康Wistar大鼠,体重约220左右,适应性喂养1周,随机抽样6只预实验,剩余43只随机抽样,用随机数字表选8只为空白对照组,余35只为造模组。空白对照组大鼠常规饲料喂养,腹腔注射与造模组烟酰胺(NA)溶液等量的生理盐水;造模组喂养高脂饲料,联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,制备T2DM大鼠模型。造模组向腹腔注射NA溶液(260mg/Kg),15分钟后,尾静脉注射STZ(STZ溶于0.1mmol/L柠檬酸缓冲液中,PH4.5)40mg/kg,之后三天予VD3注射液(60万IU/kg)灌胃,并喂养高脂高胆固醇饲料(3%胆固醇,0.5%胆酸钠,0.2%丙硫氧嘧啶,5%糖,10%猪油,81.3%基础饲料),喂饲8周。同时各治疗组大鼠分别按不同药物、不同剂量灌胃相应药物。成模后(剩余32只),随机抽取32只分为模型组(8只)及清热祛浊胶囊组(8只)、清热祛浊胶囊+二甲双胍组(8只)、二甲双胍组(8只)。清热祛浊胶囊组给予(1.0g药粉/kg/d)灌胃,西药二甲双胍对照组给予二甲双胍25mg/kg/d(相当于成人1500mg/d),灌胃,每日1次。清热祛浊胶囊+二甲双胍组给予二甲双胍25mg/kg/d(相当于成人1500mg/d)+(1.0g药粉/kg/d)灌胃,每日1次。正常组及糖尿病组予同等剂量纯净水灌胃,每日1次。大鼠药物喂养8周完成后,开始禁食,进食时间12h,准备解剖台及所需器械。抽取3%戊巴比妥(80mg/kg)液注射进大鼠腹腔,进行麻醉,大鼠瘫软不能活动后,迅速剖开腹腔,分离腹主动脉,从腹主动脉处采血,取血液2 Ml,迅速放入离心机,分离血浆后,加入相应检测液,测定ET-1、NO、胰岛素、C肽。大鼠取血后,迅速解剖胸腔,分离胸主动脉,留取约2cm,迅速放入4%中性福尔马林溶液中固定,做好标记,准备检测PAI-1、t PA(免疫组化法)。观察标本细胞浆内和(或)细胞膜内棕黄色颗粒所占镜下面积及细胞数比例,比较PAI-1、t-PA的染色阳性表达。计量资料均:x±S表示;自身前后比较:t检验;方差不齐,采用Kruskal-Wallis H检验;数据应用SPSS 17.0处理,检验标准α=0.05。结果:1大鼠一般状态比较分配到正常组的大鼠毛色洁白顺滑,精神良好,反应灵敏,活泼好动,正常饮水、进食如常,分配到各组的糖尿病大鼠,毛色萎蔫,精神较差,反应呆板,饮水量增多及进食量增多。2血糖分析造模前:各组血糖无统计学差异(P0.05)。造模后:治疗前与NC组相比Met、QRC、Met+QRC组大鼠血糖均显著升高(P0.05),DM组及Met、QRC、Met+QRC组间血糖比较无统计学差异(P0.05)。治疗后与NC组相比Met、QRC、Met+QRC组大鼠血糖,均显著升高(P0.05);DM组与QRC组、Met组、Met+QRC组有统计学差异(P0.05),Met+QRC与Met组比较,无统计学差异(P0.05);QRC组与Met组、Met+QRC有统计学差异(P0.05);QRC组血糖与治疗前相比无统计学差异(P0.05)。Met组、Met+QRC组血糖与治疗前相比有统计学差异(P0.05)。3对大鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)影响:灌胃治疗后,与NC组比较Met组、QRC组、Met+QRC组大鼠血清HOMA-IR水平明显升高(P0.05)。与DM组比较,Met组、QRC组、Met+QRC组HOMA-IR水平明显下降(P0.05)。Met组、Met+QRC组之间大鼠血清HOMA-IR水平无统计学差异(P0.05)。与Met组比较QRC组HOMA-IR水平无明显升高(P0.05)。4大鼠血清ET-1水平比较灌胃治疗后,与NC组比较Met组、QRC组、Met+QRC组大鼠血清ET-1水平明显升高(P0.05)。与DM组比较,Met组、QRC组Met+QRC组ET-1水平明显下降(P0.05)。Met组、QRC组Met+QRC之间大鼠血清ET-1水平无统计学差异(P0.05)。5大鼠血清NO水比较灌胃治疗后,与NC组比较,DM组、Met组、QRC组、Met+QRC组血清NO水平明显下降(P0.05)。与DM组比较,Met组、QRC组、Met+QRC组NO水平明显升高(P0.05)。Met组、QRC组、Met+QRC组之间大鼠血清NO水平无统计学差异(P0.05)。6大鼠胸主动脉PAI-1表达比较与NC相比较,DM组、Met组、QRC组、Met+QRC组大鼠动脉中表达明显增多(P0.05)。与DM组相比,Met组、QRC组、Met+QRC组表达明显减少(P0.05)。Met组、QRC组、Met+QRC组之间表达无统计学差异(P0.05)。7大鼠胸主动脉t-PA表达比较与NC组相比,DM组、Met组、QRC组、Met+QRC组大鼠动脉中表达明显减少(P0.05)。与DM组相比,Met组、QRC组、Met+QRC组表达明显增多(P0.05)。S Met组、QRC组、Met+QRC组之间表达无统计学差异(P0.05)。8大鼠动脉组织观察比较NC组内膜内皮细胞紧密,呈现密度高,分布连续的特点,细胞间隙狭窄,排列规律;中膜平滑肌细胞排列紧密规律,胞浆浅染,外膜正常;DM组内皮细胞表面排列不规律,可见较多隆起,分布于中膜层的平滑肌细胞较正常组增多、排列不规律,且结构紊乱;Met组、QRC组、Met+QRC组内皮细胞连接较紧密但不如NC组,内皮下间隙窄,介于NC组与DM组之间,中膜平滑肌细胞增殖减少,介于NC组与DM组之间,内皮细胞表面排列紊乱明显改善。Met组、QRC组、Met+QRC组比较无差异。9药物副作用情况比较与NC组相比,Met组、QRC组、Met+QRC组大鼠均有轻度腹泻,三组之间腹泻程度相似,未见其他不适反应,Met+QRC组药物不适反应未较Met组、QRC组增加。结论:1与DM组比较清热祛浊胶囊可降低胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)2清热祛浊胶囊可降低血清ET-1、升高血清NO水平。3清热祛浊胶囊可抑制2型糖尿病大鼠PAI-1表达。4清热祛浊胶囊促进t-PA在大鼠胸主动脉的表达。5清热祛浊胶囊可改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗。6清热祛浊胶囊可改善血管内皮舒缩功能,并且可以调节纤溶系统。7清热祛浊联合二甲双胍改善胰岛素抵抗效果显著。
[Abstract]:Objective: To observe the effect of qingrequzhuo Capsule on serum NO, ET-1 levels in rats with type 2 diabetes, insulin resistance index (HOMA-IR), thoracic aorta t-PA, PAI-1 expression on vascular endothelial damage and effects of insulin resistance and provide a theoretical basis for clinical treatment of type 2 diabetes mellitus and diabetic peripheral vascular disease.: 49 adult healthy male Wistar rats, weighing approximately 220, 1 weeks of feeding, random sampling 6 pre experiment, the remaining 43 were randomly selected for sampling, table 8 blank control group by random number, more than 35 for the model group. The rats in control group were fed with normal diet and intraperitoneal injection and the model of nicotinamide (NA) saline solution equivalent model; high fat diet combined with low-dose streptozotocin (STZ) intraperitoneal injection, T2DM rat model was prepared. The model to the intraperitoneal injection of NA solution (260mg/Kg), 15 minutes after the end of the static 鑴夋敞灏凷TZ(STZ婧朵簬0.1mmol/L鏌犳閰哥紦鍐叉恫涓,

本文编号:1405329

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