肾细胞癌中LOC100130476基因甲基化状态及mRNA表达的研究

发布时间：2018-01-10 15:17

本文关键词：肾细胞癌中LOC100130476基因甲基化状态及mRNA表达的研究　出处：《河北医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)是一种泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,它起源于肾实质的泌尿小管上皮。目前已严重威胁到我国人群的健康。近年来,由于肾癌早期症状不明显且无特异性,其死亡率呈现上升的趋势。除去影像学检查之外,目前肾癌仍缺乏早期的实验室诊断指标,因此肾癌的早诊早治面临一定困难。当今对肿瘤病理机制的研究逐步受到重视,在肿瘤形成、发展的过程当中,表观遗传学改变是非常重要的一环。表观遗传学的研究主要包含DNA甲基化、组蛋白修饰、基因组印记、母体效应、基因沉默、染色质重塑、遗传印记及随机染色体(X)失活,以及非编码RNA调控等等。近年来,抑癌基因的DNA甲基化与肿瘤形成、进展之间的关系是肿瘤研究方面的焦点之一。有文献已经证实LOC100130476基因第一外显子区甲基化是导致胃癌、食管癌等恶性肿瘤发生、进展的重要因素。本研究以57例RCC患者术后标本为研究对象,通过对RCC组织以及正常肾组织中LOC100130476基因第一外显子区的甲基化状态及其mRNA的相对表达量的分析,阐述它与临床资料之间的关系,旨在探讨LOC100130476与肾癌之间的相关性及其可能的作用机制;进一步揭示了RCC的发病机理,为肾细胞癌的早期诊断、治疗及预后评判均提供了相关的理论基础。方法:本研究采用甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)方法检测57例RCC组织及正常组织中长链非编码RNA LOC100130476基因的第一外显子区甲基化状态;采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)来检测LOC100130476基因在RCC组织中mRNA的相对表达量。并运用统计软件IBM SPSS STATISTICS对数据进行统计学处理,分析LOC100130476基因与临床参数之间的关系。结果:1 LOC100130476基因在RCC组织以及正常组织中甲基化状态的分析。根据msp后电泳的结果,可将loc100130476基因的甲基化状态分为三种,分别是:完全甲基化状态,不完全甲基化状态以及完全非甲基化状态。甲基化阳性包含完全甲基化状态和不完全甲基化状态;而甲基化阴性仅为完全非甲基化状态。loc100130476基因在57例rcc组织中的甲基化发生率为66.7%(38/57),而它在正常组织中,甲基化发生率仅为26.3%(15/57)。故得出:rcc组织中loc100130476基因的甲基化发生率显著高于正常组织(p0.05)。2分析rcc组织中loc100130476基因第一外显子区甲基化状态与临床数据之间的关系。年龄、性别、肿瘤大小各自分组,进行统计学分析,loc100130476基因第一外显子区甲基化的发生率均未见明显统计学差异(p0.05);但其在组织学分级、肿瘤tnm分期方面的差异,有统计学意义(p0.05)。组织低分化组的患者甲基化率高于组织高-中分化组,肿瘤tnm分期Ⅲ-Ⅳ的患者比Ⅰ-Ⅱ期的患者甲基化率高。3分析各标本组织中loc100130476基因mrna的相对表达量。loc100130476基因在rcc组织中的相对表达量为0.384±0.07;而loc100130476基因在正常组织中mrna的相对表达量为0.596±0.06。结果显示:loc100130476基因mrna在rcc组织中的相对表达量明显低于正常组织,具有统计学差异(p0.05)。4分析loc100130476基因mrna在rcc组织中的相对表达量与临床资料之间的关系。年龄、性别、肿瘤大小各自分组,进行统计学分析,loc100130476基因mrna相对表达量均未见明显统计学差异(p0.05),但对组织学分级、肿瘤临床分期进行分组统计,loc100130476基因mrna相对表达量有统计学差异(p0.05)。5在rcc组织中,甲基化组中loc100130476基因mrna相对表达量显著低于非甲基化组(p0.05),其差异有统计学意义。结论:1在rcc组织中,loc100130476第一外显子区高甲基化频发,并且其甲基化率明显高于正常组织,提示loc100130476的异常甲基化可能是肾癌的发生机制之一。2在rcc组织中,loc100130476基因mrna的相对表达量明显低于正常组织,结果提示,loc100130476可能作为抑癌基因参与着肾癌的发生发展。3在RCC组织中,LOC100130476基因mRNA在甲基化阳性患者中的相对表达量明显低于甲基化阴性的患者。结果提示,LOC100130476基因第一外显子区的高甲基化状态可能是导致其表达下调的重要原因。
[Abstract]:Objective : Renal cell carcinoma ( RCC ) is one of the most common malignant tumors in urinary system . The relationship between the methylation status of LOC100130476 gene and clinical data is discussed . The methylation rate of loc100130476 gene in rcc tissue was significantly lower than that in normal tissue ( p . 05 ) .

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.11

【参考文献】