益肾活血方颗粒对大鼠T2DM早期糖尿病肾病的保护作用研究

发布时间：2018-01-12 20:19

本文关键词：益肾活血方颗粒对大鼠T2DM早期糖尿病肾病的保护作用研究　出处：《吉林大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的通过预先给予高糖高脂饮食,联合腹腔注射小剂量STZ,制备Wistar大鼠T2DM模型,灌胃给予传统中药方剂益肾活血方颗粒,连续八周,观察其对大鼠T2DM早期DN的保护作用。方法健康清洁级雄性Wistar大鼠,共90只,适应性饲养一周,随机选出10只为正常组,其余80只,预先给予高糖高脂饲料喂养一个月,然后腹腔注射STZ 25mg/kg。腹腔注射STZ 72h后,尾静脉取血检测大鼠空腹血糖,血糖值≥7.8 mmol/L则表示造模成功,未成模型及死亡的大鼠予以剔除。随机分为模型组、盐酸贝那普利(1mg/kg)组、益肾活血方颗粒大剂量(2.0g/kg)组、益肾活血方颗粒中剂量(1.0g/kg)组、益肾活血方颗粒小剂量(0.5g/kg)组。各组大鼠每日固定时间灌胃给药一次,为期八周。记录大鼠一般情况,每日饮食量、每日饮水量、每周体重,每两周尾静脉空腹血糖。实验结束前1天,所有大鼠禁食不禁水,收集24h尿液,测定尿肌酐(Urine Creatinine,简称UREA)、β2-微球蛋白(β2-Microglobulin,简称β2-MG)的含量。腹腔注射10%水合氯醛麻醉,剂量为30mg/kg,腹主动脉取血,测定总胆固醇(Cholesterol,简称CHO)、甘油三酯(Triglycerides,简称TG)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,简称GSH-PX)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)、丙二醛(Maleic Dialdehyde,简称MDA)。剥离每只大鼠左侧肾脏,通过PAS染色观察大鼠肾脏病理改变,以及免疫组化法检测肾脏TGF-β、Smad2/3、Smad7蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组的大鼠:1)出现精神状态不佳,毛色晦暗,反应迟缓,垫料明显潮湿,饮食量、饮水量显著增多,体重显著降低(P0.01或P0.05);2)0周、2周、4周、6周、8周尾静脉空腹血糖值均显著升高(P0.01);3)尿液中UREA、β2-MG含量均显著升高(P0.01);4)血清中CHO、TG含量均显著升高(P0.01);5)血清中GSH-PX、SOD活性均显著降低,MDA含量显著升高(P0.01);6)肾脏组织病理观察可见:肾脏基底膜增厚,肾小球体积肥大;7)肾脏免疫组织化学染色可见:TGF-β、Smad2/3灰度值降低,Smad7灰度值升高,说明TGF-β、Smad2/3蛋白表达升高,Smad7蛋白表达降低(P0.01)。与模型组比较:1)盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0 g/kg组精神状态好转,毛色逐渐光亮,垫料潮湿情况明显改善,饮食量、饮水量显著减少,体重显著增加(P0.01或P0.05);2)盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0,0.5 g/kg组均能显著降低大鼠尾静脉空腹血糖值(P0.01或P0.05);3)盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0,0.5g/kg组均能显著降低大鼠尿液中UREA、β2-MG含量(P0.01或P0.05);4)盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0,0.5g/kg组均能显著降低大鼠血清中CHO、TG含量(P0.01或P0.05);5)盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0g/kg组均能显著升高血清GSH-PX、SOD活性,降低MDA含量(P0.01或P0.05);6)肾脏组织病理观察可见:盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0g/kg组肾脏基底膜增厚及肾小球肥大现象明显减轻;7)肾脏免疫组织化学染色可见:盐酸贝那普利组、益肾活血方颗粒2.0,1.0,0.5g/kg组TGF-β、Smad2/3灰度值升高,Smad7灰度值降低,说明TGF-β、Smad2/3蛋白表达降低,Smad7蛋白表达升高(P0.01或P0.05)。益肾活血方颗粒2.0,1.0 g/kg组间比较无显著性差异。结论益肾活血方颗粒可明显改善大鼠T2DM早期DN出现的一般症状,调节糖、脂代谢紊乱,调控TGF-β信号通路中TGF-β、Smad2/3、Smad7蛋白表达,保护肾脏功能。
[Abstract]:The rats were randomly divided into three groups : model group , Benazapril hydrochloride ( 1 mg / kg ) group , Yi Shen Huo Xue Fang Granule ( 2.0g / kg ) group , Yi Shen Huo Xue Fang granule middle dose ( 2.0g / kg ) group , abdominal aorta blood sampling , total cholesterol ( CHO ) , triglyceride ( TG ) and glutathione peroxidase ( GSH - PX ) . Superoxide dismutase ( SOD ) , malondialdehyde ( MDA ) . The expression of TGF - 尾 , Smad2 / 3 and Smad3 in kidney was significantly increased ( P0.01 ) . The results showed that the levels of serum GSH - PX and SOD in serum increased significantly ( P0.01 ) , and the level of serum GSH - PX and SOD increased significantly ( P0.01 ) . The results showed that the contents of TGF - 尾 , Smad2 / 3 in rats were significantly decreased and the expression of TGF - 尾 , Smad2 / 3 increased significantly ( P0.01 or P0.05 ) .

【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】