基于JAK-STAT信号通路探讨加味小柴胡汤对HepG2.2.15细胞影响的研究

发布时间：2018-01-14 21:19

  本文关键词：基于JAK-STAT信号通路探讨加味小柴胡汤对HepG2.2.15细胞影响的研究　出处：《福建中医药大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的本课题拟通过体外实验,研究加味小柴胡汤含药血清对可稳定表达乙肝病毒蛋白并分泌病毒颗粒的HepG2.2.15细胞及其JAK-STAT信号通路的影响,明确加味小柴胡汤是否通过调控JAK-STAT信号通路而影响慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)的发生发展,揭示加味小柴胡汤治疗CHB的分子机制,为乙肝中医治疗和中西医结合治疗提供理论依据,为开发抗乙肝新药打下基础。方法1.纳入研究的CHB患者分别以疏肝健脾立法的加味小柴胡汤和西药恩替卡韦进行治疗,在服药后分别抽血,制备(含药)血清;2.对HepG2.2.15细胞进行常规培养;3.应用血清药理学方法,以含药血清对体外培养HepG2.2.15细胞进行干预;4.用MTT法检测不同作用时长、不同浓度含药血清干预后的HepG2.2.15细胞的活力,评估加味小柴胡汤对HepG2.2.15细胞生长的影响;5.收集不同作用时长、不同浓度含药血清干预后的HepG2.2.15细胞上清液,用ELISA法检测HBsAg和HBeAg的分泌水平,评估加味小柴胡汤对HBV病毒的复制的影响;6.收集不同作用时长、不同浓度含药血清干预后的HepG2.2.15细胞,用Western Blot法检测JAK-STAT信号转导通路中JAK2、STAT3蛋白的表达水平,评估加味小柴胡汤对该通路的影响。结果1.MTT实验:含药血清干预HepG2.2.15细胞48h、96h、144h三个时间段,结果表明西药和中药均对细胞活力有抑制效果,西药效果更明显(P0.05);2.ELISA实验:西药与中药均可达到减少HBsAg与HBeAg在血清含量的效果(P0.05),西药组和10%中药组没有时间依赖性,20%中药组有时间依赖性(随药物干预时间的延长,中药加味小柴胡汤的药效日趋明显),另外中药组还有浓度依赖性(20%浓度的含药血清比10%浓度的含药血清药效好)(P0.05);3.与对照组比较,西药组、10%中药组、20%中药组中的JAK2、STAT3总蛋白表达依次下降,组与组之间有显著性差异(P0.05);结论加味小柴胡汤对HepG2.2.15细胞中的HBV病毒起到了抑制作用,同时具有保护细胞的作用,并可能具有调控JAK-STAT通路机制来治疗CHB作用。
[Abstract]:Objective To study the effect of Jiawei Xiao Chai Hu Tang on the growth of HepG2.2 . 15 cells by regulating JAK - STAT signal pathway . Conclusion Jiawei Xiao Chai Hu Tang has an inhibitory effect on HBV virus in HepG2.2 . 15 cells , and has the function of protecting cells , and may have the function of regulating JAK - STAT pathway mechanism to treat hepatitis B .

【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R259

【参考文献】

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本文编号：1425349