微流控技术冷冻人微量精子的初步研究

发布时间：2018-01-20 23:13

本文关键词： 微流控海藻酸钠微量精子冷冻　出处：《安徽医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:研究微流控技术封装海藻酸钠水凝胶的方法及影响水凝胶大小的因素。探索使用海藻酸钠水凝胶为载体冷冻保存人类微量精子的可行性。方法:将两个注射器分别装入海藻酸钠溶液和矿物油,连接装置,通过分别使用不同管径微滴生成装置,调节微注射泵流速,观察液滴大小并收集。收集精液标本并处理。将标本平均分为4组,分别为A组:使用海藻酸微囊包裹的添加保护剂玻璃化冷冻组;B组:使用海藻酸微囊包裹的无保护剂玻璃化冷冻组,C组:使用海藻酸微囊包裹的慢速冷冻组;D组:传统慢速冷冻方法。通过微流控生成水凝胶后分别冷冻保存,24h后复温,比较组间精子活率、向前运动及活动力百分比。结果:1:调整流速发现增加水相及油相流速均可减小微球大小。使用240/450尺寸装置,调节微流速分别为水相20μL/min,油相600μL/min可制作直径200μm左右水凝胶。2:冷冻后四组活动率、前向运动精子百分率相比冷冻前组活动率(63.4±2.7)%,前向运动精子百分率(53.6±3.8)%有显著差异(p0.05),其中,A组和B组活动率分别为(17.5±2.4)%和(18.9±6.7)%,前向运动精子百分率分别为(12.1±5.3)%和(11.3±5.2)%均低于C组和D组,(p0.05),其中C组的活动率和前向运动精子百分率和D组有统计学差异(p0.05)。冷冻后四组活率,相比冷冻前组(69.7±3.1)%有显著差异(p0.05),其中,A组和B组活率分别为(32.4±5.9)%和(34.3±8.0)%,均低于C组(43.1±10.5)%和D(42.5±9.4)%组,(p0.05),C组于D组间无显著差异(p0.05)。结论:1:通过微流控的方法,可成功封装海藻酸钠水凝胶。增加水相及油相流速均可减小微球大小。2:海藻酸钠水凝胶包裹精子慢速冷冻对精子活率与普通慢速冷冻无显著差异,且回收率高,可考虑冻融微量精子;水凝胶玻璃化冷冻效果稍差,可进一步探索适合的冷冻保护剂等。
[Abstract]:Objective : To study the method of micro flow control technology to encapsulate the sodium alginate hydrogel and the factors affecting the size of hydrogel . The method comprises the following steps : loading two syringes into sodium alginate solution and mineral oil respectively ; freezing and thawing micro - sperm can be considered ; the vitrification freezing effect of the hydrogel is slightly poor , and the suitable cryoprotective agent and the like can be further explored .

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R714.8

【参考文献】