穿藤通痹汤对小鼠类风湿性关节炎的缓解作用及对血浆TNF-α的影响

发布时间：2018-05-09 02:46

  本文选题：DBA/1小鼠 + CIA模型　； 参考：《北京中医药大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的本研究以雄性DBA/1小鼠为对象,采用牛Ⅱ型胶原蛋白与弗氏佐剂混合的方式进行CIA造模,研究多种因素及造模条件对CIA模型发病率、持续时间及稳定性的影响,初步探讨优化后CIA模型的整体行为学改变和病理损伤。在此基础上,以不同剂量穿藤通痹汤干预给药,观察其对DBA/1小鼠CIA模型关节炎症的抑制作用和骨破坏的保护及修复作用。方法(1)SPF级雄性DBA/1小鼠20只,体重15-18g,7周龄,实验前适应性喂养3-5天,自由饮水饮食。然后分为空白组和模型组,每组10只,空白组不给于干预措施,模型组进行常规CIA造模。将牛Ⅱ型胶原溶液与完全佛氏佐剂混合均匀,于实验第1天经尾根部免疫注射,21天时牛Ⅱ型胶原溶液与不完全佛氏佐剂混合均匀相同部位加强免疫一次。实验进程为56d。(2)SPF级雄性DBA/1小鼠60只,体重16-19g,8周龄,实验前适应性喂养3天,自由饮水饮食。然后分为空白组、模型组、来氟米特组以及穿藤通痹汤低剂量组、中剂量组和高剂量组6组。模型组按照实验日程,以摸索好的成熟条件进行CIA造模。于第21天二次免疫诱导CIA后开始干预给药,来氟米特组2.80mg/kg/d给药干预,以体重给药。穿藤通痹汤各剂量组给药浓度分别为0.44g/ml,0.88g/ml,1.76g/ml。每天灌胃一次,每次0.4ml。实验设定日期为49d,从第21d开始干预给药,连续给药4周。(3)整体观察各组小鼠的不同表现:以体重、关节评分、踝关节直径、足趾容积、关节抓力、热板效应、红外温度、踝关节X光表现、HE染色及细胞免疫因子TNF-α等指标评价药物干预效果结果(1)采用牛Ⅱ型胶原蛋白分别与CFA、IFA混合于第1和21天经尾根部免疫注射的方法可使小鼠发病率高达100%,是一种高致病率的免疫方法。(2)经各项指标的动态观察发现DBA/1小鼠CIA模型有明显的RA进展分期。动物一般在二次免疫后一周内发病,各组指标开始上升,约10天之内即可全部发病,而后进入急性期,肿胀持续发展,持续2-3周左右,而后进入慢性迁延期,肿胀有所消退,病理损伤持续加重。(3)穿藤通痹汤不同剂量对于RA模型的抑制作用不同,高剂量组的综合调节作用要优于中、低剂量组。(4)与来氟米特组相比,穿藤通痹汤高剂量组对于DBA/1小鼠CIA模型骨及软骨损伤的保护和修复作用更加明显。结论(1)经过对DBA/1小鼠CIA模型致敏原、免疫时间、注射部位及免疫剂量的改良,基于传统CIA造模方法改良的RA模型从发病率、持续时间及关节损伤程度来看是成熟稳定的RA动物模型。(2)穿藤通痹汤对于DBA/1小鼠CIA模型有一定的治疗作用,能够抑制动物模型急性期的RA进展,对后期骨及软骨有一定的保护作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of various factors and conditions on the incidence, duration and stability of DBA/1 model in male DBA/1 mice by mixing bovine type 鈪，

本文编号：1864252