礞石滚痰汤对戊四氮致痫小鼠的影响

发布时间：2018-05-29 22:39

本文选题：礞石滚痰汤 + 癫痫　；参考：《南京中医药大学》2017年硕士论文

【摘要】：第一部分:礞石滚痰汤对癫痫小鼠脑电图及NMDAR1与GABA-AR表达的影响目的:建立戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)慢性点燃模型,观察礞石滚痰汤对小鼠行为学、脑电图、海马NMDAR1与GABA-AR表达的影响。方法:将PTZ点燃成功的癫痫模型小鼠随机分为四组:模型组:B组;礞石滚痰汤低剂量组:C组;礞石滚痰汤高剂量组:D组;丙戊酸钠组:E组。每组各10只,另设空白对照组:A组10只。B组给予生理盐水灌胃,C、D、E组分别给予礞石滚痰汤低、高剂量及丙戊酸钠等不同药物灌胃处理。给药4周后,除空白对照组外,各组小鼠再次腹腔注射PIZ 45mg/(kg·d),观察动物行为的改变,利用脑立体定位仪记录各组癫痫小鼠右侧额叶皮质的脑电变化。取小鼠海马组织,通过氨基酸试剂盒和酶联免疫吸附法(ELISA)法测定谷氨酸(glutamate,Glu)和 γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid，GABA)的含量,蛋白免疫印迹(westernblot)法检测NMDAR1及GABA-AR的表达水平。结果:1.行为学表现与B组比较,D、E组小鼠癫痫发作的潜伏期明显延长(P0.05),lh强直-阵挛发作的次数减少(P0.05),发作持续时间缩短(P0.05)。D组与E组相比较,无明显差异(P0.05),A组均无癫痫发作。2.EEG表现A组脑电图均表现为以α波和β波为主的基础脑电波,波幅平稳,无明显节律性。B组可以观察到明显的阵发性痫性放电,波幅振幅大,主要表现为尖锐波峰和短暂突发的尖波、棘波、棘慢复合波等。与B组相比,C、D组平均波幅明显减少(P0.05),且D组于15min后才出现第一个明显波幅。E组经治疗后偶有癫痫波出现,波幅均在lmV之内。3.氨基酸检测与western blot结果Glu含量变化:与A组比较,B组海马Glu升高显著(P0.05),与B组比较,C、D、E组降低明显(P0.05),D组含量降低与E组无明显统计学差异(P＞0.05)。GABA含量变化:GABA含量以D组升高最显著,与B、C、E组比较有显著性差异(P0.05),D组含量升高与E组比较,有统计学差异(P0.01)。通过western blot检测NMDAR1及GAB A-AR表达,发现B组NMDAR1较A组明显增高,GABA-AR较A组明显降低(P0.01),C、D、E组NMDAR1较B组明显降低(P0.05),C、D、E组GABA-AR较B组明显增高(P0.05),D组与E组间无明显差异(P0.05)。结论:1.礞石滚痰汤可以延长小鼠癫痫发作潜伏期,缓解lh强直-阵挛发作次数,缩短发作持续时间,减轻发作等级,抑制癫痫样放电波幅、减少放电频率;2.礞石滚痰汤可以降低海马区Glu含量,抑制NMDAR1的表达,升高GABA含量,促进GABA-AR的表达,纠正兴奋性和抑制性氨基酸递质的失衡。第二部分:礞石滚痰汤对癫痫小鼠海马内GFAP表达的影响目的:建立PIZ慢性点燃模型,观察礞石滚痰汤对小鼠海马内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:造模及分组同第一部分。取小鼠海马组织后,多聚甲醛过夜,固定后取出,于冰冻切片机上制作冰冻切片,进行GFAP免疫组化染色,观察海马CA1、CA3区GFAP形态与数量,再用实时荧光定量(Q-PCR)法检测GFAPmRNA的表达水平。结果:与A组相比,B组GEAP免疫阳性反应明显增强,海马区数目明显增多,GFAP mRNA表达增强,有统计学意义(P0.05)。与B组相比,C、D、E组GFAP免疫阳性反应较弱,数量少于模型组,GFAPmRNA表达显著下调(P0.05),且中药低剂量组效果优于高剂量组,但与阳性对照组比较无明显差异(P0.05)。结论礞石滚痰汤可以减少与抑制PTZ点燃小鼠海马内GFAP的数量与过度表达,这可能是礞石滚痰汤发挥抗癫痫作用的机制之一。
[Abstract]:In the first part , rats were randomly divided into four groups : group B , group B , group C , group D , group E . Compared with group A , the content of GABA in group B was significantly higher than that in group B ( P0.05 ) . The content of GABA in group B was significantly lower than that in group B ( P0.05 ) . Results : Compared with group A , the expression level of GFAP in hippocampus CA1 , CA was significantly lower than that in group A , and the expression of GFAP mRNA was significantly lower than that in group B ( P0.05 ) . Conclusion : Compared with group A , the number of GFAP in hippocampus CA1 and CA was significantly lower than that in group A .
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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