Notch1蛋白在人心脏瓣膜间质细胞凋亡与钙化关系中的作用

发布时间：2018-06-22 19:13

  本文选题：人心脏瓣膜间质细胞 + 钙化　； 参考：《中国动脉硬化杂志》2017年02期

【摘要】：目的用人心脏瓣膜间质细胞(hVICs)在体外培养并用钙化诱导液建立瓣膜钙化模型,观察hVICs钙化过程中Notch1蛋白表达及细胞凋亡情况,探讨Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中的作用。方法将体外培养的hVICs随机分为两组,钙化组用含钙化诱导液的培养基培养,以建立钙化模型,并按1~7天分别诱导细胞,观察钙化的动态过程;空白组用正常培养基(I-GRO PLUS)培养。所有hVICs均培养7天。检测两组细胞钙化结节数目、BMP-4蛋白、Notch1蛋白的表达及hVICs凋亡率。然后将钙化组中诱导钙化细胞再随机分脂多糖组(LPS)、Notch1抑制剂组(γ分泌酶抑制剂,DAPT)、对照组(只加钙化诱导液)体外培养3天,检测BMP-4、Notch1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达。结果与空白组细胞比较,钙化组细胞钙化及Notch1蛋白的表达均高于空白组,且随着诱导天数的增加而增加;细胞凋亡率在钙化诱导3天时最高,随后逐渐下降。LPS组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均随着Notch1蛋白的表达增加而增加;DAPT组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均减少。结论hVICs钙化与细胞凋亡有着密切的关系,且Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中起着重要的作用。
[Abstract]:Objective to observe the expression of Notch1 protein and the apoptosis of human cardiac valve interstitial cells (hVICs) in vitro and to investigate the role of Notch1 protein in the relationship between apoptosis and calcification. Methods the hVICs cultured in vitro were randomly divided into two groups. The calcification group was cultured on the medium containing calcification inducer to establish the calcification model, and the cells were induced for 1 ~ 7 days to observe the dynamic process of calcification, and the blank group was cultured in I-GRO plus. All hVICs were cultured for 7 days. The number of calcified nodules and the expression of BMP-4 protein Notch1 and the apoptosis rate of hVICs were detected in both groups. Then the calcified cells in calcification group were randomly divided into lipopolysaccharide group (LPS) / Notch1 inhibitor group (纬 secretory enzyme inhibitor DAPT) and control group (plus calcification inducer only) cultured for 3 days. The expression of BMP-4, Notch1 and caspase3 were detected. Results compared with the control group, calcification and Notch1 protein expression in calcified group were higher than those in blank group, and increased with the increase of induction days, and the apoptosis rate was the highest at 3 days of calcification, and then decreased gradually in LPS group compared with the control group, and the expression of Notch1 protein in the calcified group was higher than that in the control group. Apoptosis and calcification increased with the increase of Notch1 protein expression in DAPT group compared with the control group, both apoptosis and calcification decreased. Conclusion hVICs calcification is closely related to apoptosis, and Notch1 protein plays an important role in the relationship between hVICs apoptosis and calcification.
【作者单位】： 安徽医科大学无锡临床学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81371657)
【分类号】：R542.5

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