葛根素对臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元NGF、GAP-43mRNA及蛋白表达的影响

发布时间：2018-06-29 22:06

本文选题：葛根素 + 臂丛损伤　；参考：《湖北民族学院》2017年硕士论文

【摘要】：目的:臂丛根性撕脱伤常发生于交通事故、产瘫,可导致脊髓神经元的大量死亡,进而造成患者上肢的运动和感觉障碍。针对这种发病机制,本研究从保护神经元和促进神经元再生入手,探讨葛根素对臂丛根性撕脱伤导致的神经元死亡是否具有保护作用及其可能的机制。方法:成年雄性SD大鼠252只,体重250±20 g,完全随机分为正常对照组、模型组、葛根素低、中、高治疗组。模型组和治疗组行右侧C5-C7脊神经前后根撕脱术,术后待动物苏醒即每日给予腹腔注射给药,其中模型组给予生理盐水,葛根素治疗组的剂量分别为50 mg/kg/d、100 mg/kg/d、200 mg/kg/d。并于术后1w、2w、4w、6w、8w这5个时间点取材,每个时间点12只。通过尼氏染色法观察脊髓前角运动神经元的形态及数量;免疫组织化学染色法及Western Blot法检测NGF和GAP-43蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测NGF和GAP-43mRNA的表达。结果:尼氏染色实验结果表明:与正常对照组比较,模型组各时间点脊髓前角运动神经元形态较差、细胞间隙增大、排列紊乱、且运动神经元数量及神经元树突明显减少,结果有统计学意义(p0.01)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元形态及排列均有所改善,运动神经元树突亦比模型组有所增加,神经元的存活率明显升高,组间比较有统计学意义(p0.05)。免疫组化实验结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均明显降低,结果均具有统计学意义(p0.001)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在第2周明显升高,随后一直维持高表达,直至第8周NGF蛋白继续维持高水平,趋势更加明显,差别亦更显著。与正常对照组比较,模型组自术后1周开始出现GAP-43阳性运动神经元表达,第2周时达到高峰,第4周时降至较低水平维持至第8周末。与模型组比较,葛根素各治疗组GAP-43蛋白在术后第1周时已达较高水平,第2周时达最高峰,随后开始下降,第8周时降至较低水平。Western Blot实验结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均明显降低,结果均具有统计学意义(p0.001)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均高于模型组。低剂量组只在第1周时与模型组的差别具有统计学意义(p0.05);中剂量组在第4-8周与模型组比较,差别均具有统计学意义(p0.05);高剂量组只在第8周时与模型组比较差别具有统计学意义(p0.05)。结合课题组前期实验结果,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元GAP-43蛋白表达的WB实验结果与免疫组化结果趋势相符合,此处不予赘述。实时荧光定量PCR法检测结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF mRNA第2周表达稍高于正常组,第4周开始降低,第6周时降至最低,第8周时表达量有所回升;与模型组比较,葛根素低、中治疗组在第6周时表达量开始升高,差别均具有统计学意义(p0.05),第8周时表达量更高,差别亦均具有统计学意义(p0.01)。与正常对照组比较,模型组GAP-43 mRNA表达在术后第1周时已开始明显升高,第2周达高峰,之后稍下降,第8周时降至较低水平,差别均具有统计学意义(p0.05)。与模型组相比,葛根素各治疗组GAP-43 mRNA表达自第1周时便急剧升高,第2周时达到最高峰,以中剂量组差别具有统计学意义(p0.01)。随后开始缓慢下降,至8周时表达量仍高于模型组。结论:葛根素能保护臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元,其机制可能与其能促进脊髓前角运动神经元NGF、GAP-43 mRNA及蛋白的表达有关。
[Abstract]:Objective : To study the expression of NGF and GAP - 43 mRNA in spinal cord anterior horn motor neurons in rats . The results showed that the expression of NGF and GAP - 43 mRNA was significantly lower in the model group than in the normal control group , and the expression of NGF and GAP - 43 mRNA was significantly decreased in the model group and the treatment group . Compared with the normal control group , the expression level of GAP - 43 mRNA was significantly higher in the model group than in the normal control group ( p < 0.05 ) . Compared with the model group , the expression level of GAP - 43 mRNA in the spinal cord of the model group was significantly higher than that in the normal control group ( p < 0.05 ) .
【学位授予单位】：湖北民族学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】