MiRNA137调节REG3A抑制角质形成细胞增殖的功能机制

发布时间：2018-08-04 14:12

【摘要】：角质形成细胞增殖和迁移受损是糖尿病皮肤伤口难愈合甚至不愈合的主要原因之一。在正常皮肤伤口中,胰岛再生源蛋白REG3A/RegⅢγ(Regenerating islet-derived protein 3A)通过促进角质形成细胞的增殖来促进伤口愈合。而在糖尿病皮肤伤口中REG3A的表达显著降低,从而延缓了糖尿病皮肤伤口愈合。miRNAs(microRNAs)作为一类短的非编码RNA,通过与靶标的mRNA3'UTR(3'untranslatedregions)结合沉默基因的机制已经研究得很清楚并应用于多种疾病的治疗中。那么,REG3A在糖尿病皮肤伤口中低表达是否与miRNAs相关,目前尚不清楚。本论文首先通过TargetScan、miRanda、DIANA-microT三个数据库分析REG3AmRNA3,UTR可能结合的miRNAs,推测并证实了 miR137能够分别与人 REG3A mRNA 3'UTR 和小鼠 RegⅢγ mRNA 3'UTR 结合,从而抑制 REG3A/RegⅢγγ的表达。接着,通过细胞划痕实验证明miR137参与调节IL-33诱导的REG3A的表达,从而抑制角质形成细胞的增殖。另外,在糖尿病皮肤伤口中miR137的表达显著增加,高糖能够呈时间依赖性地诱导角质形成细胞表达miR137,推测在糖尿病皮肤伤口中高血糖通过诱导miR137的表达来抑制REG3A的表达。为了寻找调节miR-137表达的转录因子,我们首先利用PROMO、Jaspar数据库分析得出p53可能是调节miR-137的转录因子,进一步通过荧素酶(luciferase)报告基因实验证明转录因子p53的确可以调节miR137启动子的转录活性来调节miR137的表达。另外,p53的激动剂Tevilion-1能回复IL-33抑制的miR137或促进高糖诱导的miR137的表达,从而抑制IL-33诱导的RGE3A的表达。除此之外,IL-33对miR137的调节部分依赖于DNA甲基化的作用,因为甲基转移酶的抑制剂也可回复IL-33对miR137的抑制作用。综上所述,本研究发现了 IL-33通过抑制miR137来诱导REG3A的表达,而高糖通过诱导miR-137抑制了 REG3A的表达。在糖尿病皮肤伤口中高血糖和IL-33的低表达都会引起miR137的表达增加,从而导致REG3A低表达来抑制角质形成细胞的增殖。另外,p53作为miR137的转录因子参与了 IL-33和高糖调节的miR137的表达。总之,本研究揭示了 IL-33和高糖调节miR137表达的机制以及miR137抑制REG3A来抑制角质形成细胞增殖的功能,为糖尿病伤口愈合的治疗提供了潜在的新靶点。
[Abstract]:The damage of keratinocyte proliferation and migration is one of the main causes of difficult healing and even nonunion of diabetic skin wounds. In normal skin wounds, islet regeneration protein REG3A/Reg 鈪，

本文编号：2164137