糖基化终产物促进氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞泡沫化与内质网应激

  本文关键词：糖基化终产物促进氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞泡沫化与内质网应激，由笔耕文化传播整理发布。

《东南大学》 2015年

糖基化终产物促进氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞泡沫化与内质网应激

孟思明  

【摘要】：目的：观察羧甲基赖氨酸(Carboxymethyl-lysine, CML)对荷脂巨噬细胞脂质调节转运子的影响及干预巨噬细胞内质网应激发生的作用,探讨糖基化终产物致动脉粥样硬化发生的相关机制。方法：使用4-6代RAW264.7细胞株,巨噬细胞复苏后进行连续培养,根据干预条件不同分为对照组、oxLDL组,CML+oxLDL混合干预组。分别用不同浓度CML和氧化型低密度脂蛋白孵育细胞48小时后,用油红O染色鉴定泡沫细胞形成,胆固醇检测试剂盒检测各组细胞中游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)、总胆固醇(TC)浓度来选择能诱导巨噬细胞源性泡沫化的最佳浓度。利用流式细胞学技术检测各组细胞氧化型低密度脂蛋白受体CD36和三磷酸结合盒转运子ABCA1表达量的变化；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测定各组内质网应激分子C/EBP同源蛋白(CHOP)、PKR样内质网激酶(PERK)的表达量。结果：油红染色显示小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞诱导成功,胆固醇试剂盒检测显示50 μg/mL oxLDL+10 pM CML可诱导RAW264.7细胞最大泡沫化。糖基化终产物影响胆固醇逆转运,与对照组和oxLDL单独干预组相比,oxLDL+CML共处理巨噬细胞组中CD36的表达显著升高(P0.05),同时三磷酸腺苷结合盒转运子ABCA1的表达量显著降低(P0.05)。oxLDL+CML共处理RAW264.7细胞较oxLDL单独干预组显著上调内质网应激标志分子CHOP、PERK的表达(P0.05)。结论：CML可通过上调细胞膜表面糖蛋白CD36促进胆固醇吸收和下调三磷酸腺苷结合盒转运子ABCA1抑制胆固醇流出,进而加速小鼠巨噬细胞中脂质堆积,促进巨噬细胞向泡沫细胞转化,并可协同ox-LDL增强内质网应激关键分子表达,这一机制可能与细胞内胆固醇流入流出失衡有关。

【关键词】：
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R543.5
【目录】：

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