CCL2在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及其机制研究

发布时间：2018-11-19 12:21

【摘要】：背景和目的肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,已经成为肿瘤死亡的主要原因,非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌中发病率的85%,由于缺乏早期肺癌诊断技术,多数患者在诊断时已处于中晚期,失去手术治疗的最佳机会。晚期肺癌治疗一般采取多学科综合治疗,其中化疗是其主要的治疗手段。在临床治疗中,以铂类为基础联合第三代化疗新药的方案成为晚期NSCLC治疗的标准化疗方案,但其化疗的有效率仅为30%~40%,绝大数患者仍难免于肿瘤局部复发及远端转移,5年总生存率仅为16.1%。肿瘤细胞对化疗药物产生抗性是影响化疗疗效的主要原因。早期研究发现导致顺铂耐药的机制包括肿瘤细胞内药物浓度降低,药物在细胞内被降解代谢及DNA损伤修复增强,凋亡信号转导通路的改变等。近年来,肿瘤微环境越来越受到研究者的重视,研究发现肿瘤微环境中多种细胞因子或趋化因子与肿瘤细胞化疗耐药相关。单核细胞趋化因子(MCP-1,也称CCL2)是肿瘤微环境中存在比较广泛的一类趋化因子,主要招募单核/巨噬细胞到肿瘤部位,与多种肿瘤的侵袭转移以及不良预后密切相关,但其在肿瘤细胞耐药中的作用及其机制尚不清楚。因此,本研究的主要任务是探究CCL2在NSCLC顺铂耐药中的作用及其可能的调控机制,为逆转NSCLC耐药提供理论依据,为NSCLC耐药的治疗提供新的靶点。方法收集接受顺铂治疗的非小细胞肺癌患者血清,其中顺铂敏感及顺铂耐药的患者各15例。多因子试剂盒和ELISA筛选出差异明显的趋化因子;收取2013年至2015年间在郑州大学第一附属医院就诊的非小细胞肺癌患者手术切除标本81例,荧光定量PCR检测NSCLC癌组织、A549细胞、A549顺铂耐药(A549/Cis)细胞中CCL2基因表达水平以及沉默CCL2表达后A549/Cis细胞干性相关基因Bim-1、c-Myc、Sox2、Oct-4表达水平;细胞毒性实验(CCK-8)和细胞成球实验检测抑制CCL2表达后,A549/Cis细胞干性以及耐药性的改变;密度梯度离心法获得的健康人外周血单个核细胞,采用磁珠分选技术纯化出CD14+单核细胞,用A549细胞及A549/Cis细胞培养上清处理CD14+单核细胞,流式细胞技术检测CD163+M2巨噬细胞的比例;Transwell实验、血管形成实验和CCK-8实验分别检测M2巨噬细胞对A549迁移、血管生成以及顺铂耐药性的影响;PCR Array筛选出调控CCL2表达的转录因子,小干扰RNA验证其对CCL2的调控作用以及对A549/Cis顺铂耐药性的影响。结果1.与顺铂治疗敏感患者相比,耐药患者血清中CCL2分泌水平较高。2.A549/Cis细胞中CCL2表达水平高于A549细胞;NSCLC癌组织中CCL2的表达水平与患者分期呈正相关,与预后呈负相关;沉默CCL2表达后A549/Cis细胞干性相关基因Bim-1、c-Myc、Sox2、Oct-4表达水平降低。3.CCL2能够增强NSCLC干性,增强NSCLC对顺铂耐受性。4.与A549细胞培养上清处理后的CD14+单核细胞相比,A549/Cis细胞培养上清处理后,CD163+M2巨噬细胞的比例明显升高。5.A549/Cis极化的CD163+M2巨噬细胞能够促进A549细胞的迁移及血管形成,增强A549细胞对顺铂的耐受性。6.与A549细胞相比,A549/Cis细胞中FOS、EGR1、STAT5A表达水平升高,MYF5、HAND2、HNF4A表达水平下降。7.沉默c-Fos后,A549/Cis细胞中CCL2基因表达水平降低,顺铂对A549/Cis细胞的杀伤能力增强。结论趋化因子CCL2通过促进肿瘤细胞干性获得以及CD14+单核细胞到肿瘤部位的招募和极化,增强NSCLC对顺铂治疗的耐受性。NSCLC中c-Fos调控CCL2的转录及表达,沉默c-Fos表达后降低CCL2 m RNA表达水平及蛋白分泌水平能够逆转NSCLC对顺铂产生的抗性,靶向c-Fos降低CCL2的表达可能为逆转NSCLC顺铂耐药提供新的治疗手段。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 任忠梅,杨秋安,张玉晶;晚期非小细胞肺癌患者外周血TNF-α检测的临床意义[J];山东医药;2000年18期

2 许运龙,郭昭扬,张云兴,许贤荣;血管内皮生长因子在人非小细胞肺癌中表达的临床研究[J];中华肿瘤杂志;2000年05期

3 王继营,高珊,崔黎,黄丽春,宋立友;“双异”联合治疗晚期非小细胞肺癌37例[J];中国肺癌杂志;2000年02期

4 田静,李蓓兰;老年晚期非小细胞肺癌的化疗:一种新趋势[J];中国肺癌杂志;2000年05期

5 张世雯,周清华;不同的分割方案与化疗联合治疗非小细胞肺癌[J];中国肺癌杂志;2000年05期

6 胡发明,华波;血清白介素-10水平是晚期非小细胞肺癌病人的一项预后因素[J];国外医学(内科学分册);2000年11期

7 于亮,王梅,张灿灼;微血管在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J];泰山医学院学报;2000年04期

8 朱建英;预计2009年非小细胞肺癌药物市场将达20亿美元[J];国外医药(合成药 生化药 制剂分册);2001年02期

9 张利伟,刘树秋,陈海英,万锦华;立体定向适形放疗配合常规放疗治疗非小细胞肺癌近期疗效分析[J];黑龙江医药科学;2001年05期

10 王肇炎;晚期非小细胞肺癌的解救化疗[J];肿瘤研究与临床;2001年01期

相关会议论文 前10条

1 张新民;唐蜜;李代强;;磷酸化酪氨酸蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

2 胡旭东;杨国仁;霍宗伟;方永存;陈鸣陆;;~(99m)Tc-MIBI SPECT显像观察非小细胞肺癌多药耐药的研究[A];首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集[C];2007年

3 秦庆亮;熊海健;王爱;边海蓉;卢振国;杨培英;朱斌耀;王芸;;立体定向放射治疗放疗后复发非小细胞肺癌[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年

4 冯耘;万欢英;高蓓莉;项轶;刘嘉琳;;血管紧张素转换酶二在非小细胞肺癌肿瘤生长和血管生成中的作用[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年

5 ;非小细胞肺癌术后辅助治疗及一线治疗[A];天津市抗癌协会肺癌专业委员会2011年学术年会论文集[C];2011年

6 蒋峰;许林;史美祺;;1560例非小细胞肺癌患者多因素预后分析[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

7 张华;;术前中性粒细胞和淋巴细胞比值对非小细胞肺癌患者预后的影响[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

8 王子平;;老年晚期非小细胞肺癌治疗思考[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年

9 张沂平;;非小细胞肺癌个体化化疗[A];2009年浙江省肿瘤学术年会暨肿瘤诊治新进展学习班论文汇编[C];2009年

10 刘嘉湘;施志明;李和根;徐振晔;朱晏伟;赵丽红;高虹;刘苓霜;朱惠蓉;张晖;;益肺抗瘤饮治疗271例非小细胞肺癌临床观察[A];中医药优秀论文选（下）[C];2009年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 李颖;特罗凯对中国非小细胞肺癌患者效果佳[N];科技日报;2007年

2 晓白;非小细胞肺癌研究获重大进展[N];人民日报;2008年

3 记者 张文天;非小细胞肺癌中医药综合医疗方案研究进展顺利[N];科技日报;2009年

4 辛勇　张先稳;早期非小细胞肺癌的治疗进展[N];中国中医药报;2004年

5 记者高新军;专家提出 建非小细胞肺癌中医临床指南[N];中国中医药报;2009年

6 上海长海医院呼吸科 夏阳 整理 邱志涛;非小细胞肺癌放虎归山还是乘胜追击[N];健康报;2013年

7 记者 王丹;新研究揭示炎症促非小细胞肺癌发生机制[N];健康报;2014年

8 记者 李颖;凯美纳成晚期非小细胞肺癌治疗优选方案[N];科技日报;2014年

9 白京丽;非小细胞肺癌最佳治疗方案[N];中国医药报;2000年

10 ;表皮生长因子受体抑制剂在治疗非小细胞肺癌中的作用[N];医药经济报;2005年

相关博士学位论文 前10条

1 白艳（Bai Sally）;整合素αvβ5合并EGFR检测用于非小细胞肺癌转移及预后评估的研究[D];复旦大学;2013年

2 王筱恬;PLZF和DACH1的异常表达影响非小细胞肺癌发生与发展的分子机制[D];复旦大学;2012年

3 洪专;木犀草素治疗EGF受体继发性突变的非小细胞肺癌的实验研究[D];南京大学;2014年

4 张沛;ILT4在非小细胞肺癌中的作用及分子机制研究[D];山东大学;2015年

5 王世坤;RBP2诱导非小细胞肺癌和食管鳞癌表皮间质化[D];山东大学;2015年

6 赵世俊;~(18)F-FDG PET/CT在非小细胞肺癌预后评估中的应用研究[D];北京协和医学院;2013年

7 邱晨;影响非小细胞肺癌手术后远期生存的相关因素分析[D];山东大学;2015年

8 姜远瞩;术前血液学指标与淋巴结转移阴性非小细胞肺癌患者预后关系的研究[D];山东大学;2015年

9 朱良明;STAT3及其靶基因对非小细胞肺癌生物学行为调控机制的初步实验研究[D];山东大学;2015年

10 周菊;HPV-16感染对非小细胞肺癌和A549细胞的影响及miRNAs表达改变的研究[D];昆明医科大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 李颜君;CCL2在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及其机制研究[D];郑州大学;2017年

2 王勇;诱导型一氧化氮合酶在非小细胞肺癌中表达的临床意义[D];中国医科大学;2006年

3 陈婷;非小细胞肺癌调强放射治疗预后因素分析[D];福建医科大学;2015年

4 王波;单向式全胸腔镜下解剖性肺叶切除术治疗早期非小细胞肺癌的学习曲线[D];福建医科大学;2015年

5 施桂清;血管内皮抑制素联合放化疗治疗非小细胞肺癌的疗效及安全性研究[D];福建医科大学;2015年

6 王静;Eg5、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[D];河北医科大学;2015年

7 覃建颖;IL-21和Tc1细胞在非小细胞肺癌患者外周血及癌灶中的变化及相互作用[D];广西医科大学;2015年

8 张瑞;ⅢA-N2期非小细胞肺癌手术治疗和放射治疗的疗效对比及相关预后因素的分析[D];河北医科大学;2015年

9 石姣姣;基于多肽构建抗肿瘤靶向药物的应用研究[D];北京协和医学院;2015年

10 胡世霖;非小细胞肺癌中医辨证分型与Napsin A、TTF-1在肺癌组织中表达的相关性研究[D];福建中医药大学;2015年

，

本文编号：2342287