川芎嗪对CaMKⅡ δ促大鼠血管重塑作用的影响

发布时间：2018-11-24 16:16

【摘要】：目的:研究川芎嗪对钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Calmodulin dependent protein kinase Ⅱ delta isoform,CaMKⅡδ)促血管重塑作用的影响,观察川芎嗪对平滑肌细胞增殖、迁移、凋亡的影响,并探讨平滑肌细胞内CaMKⅡδ与血管特异性miRNAs(miRNA-21、miRNA-221、miRNA-223、miRNA-143、miRNA-145)的关系,探索川芎嗪抑制血管重塑的分子机制有望为指导临床诊治提供新思路及新方法。方法:首先分离培养出大鼠主动脉平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs),用不同浓度的川芎嗪处理VSMCs,依据川芎嗪浓度的不同分为四个组:空白对照组、高浓度组(200μmol)、中浓度组(100μmol)、低浓度组(50umol)。用川芎嗪作用于大鼠原代主动脉平滑肌细胞观察其对平滑肌细胞增殖、迁移、凋亡的作用,及用荧光定量PCR测相关血管特异性miRNAs(miRNA-21、miRNA-221、miRNA-223、miRNA-143、miRNA-145)、CaMKⅡδ及其抑制剂 CaMKⅡN的表达水平,用 Western测相关蛋白CaMKⅡδ及CaMKⅡN的表达,探讨川芎嗪可通过调控相应的miRNA的表达,抑制CaMKⅡδ的表达,上调CaMKⅡN的表达,抑制平滑肌细胞增殖、迁移、促进凋亡进而抑制血管重塑,探索川芎嗪抑制血管重塑的分子机制。结果:与对照组比较,低、中、高浓度组细胞增殖、迁移率显著降低(P0.05),细胞凋亡率明显上调(P0.05)。与对照组比较,中、高浓度组CaMKⅡδ蛋白表达及miRNA-21、miRNA-221、miRNA-223 表达下降(P0.05),CaMKⅡN 蛋白表达及miRNA-143、miRNA-145表达上调(P0.05)。且上述指标均有浓度依赖性。结论:川芎嗪可通过下调miRNA-21、miRNA-221、miRNA-223表达,上调miRNA-143、miRNA-145的表达,进而抑制CaMKⅡδ的表达,上调CaMKⅡN的表达,这可能是川芎嗪抑制平滑肌细胞增殖、迁移、促进凋亡进而抑制血管重塑的可能机制之一,可以推断 CaMKⅡδ是 miRNA-21、miRNA-221、miRNA-223、miRNA-143、miRNA-145血管特异性miRNAs的重要靶基因之一。
[Abstract]:Aim: to study the effects of ligustrazine on vascular remodeling induced by calmodulin-dependent protein kinase 鈪，

本文编号：2354338