小胶质细胞在胰岛素作用下功能变化及机制

发布时间：2017-03-21 18:11

  本文关键词：小胶质细胞在胰岛素作用下功能变化及机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察小胶质细胞及高Trk A表达的小胶质细胞在不同浓度胰岛素作用下功能的变化及其可能机制,探讨Trk A蛋白高表达对小胶质细胞功能的影响。方法:用BV2、PC12细胞株分别代表小胶质细胞和神经元。以BV2细胞、高TrkA表达的BV2(TrkA+BV2)细胞作为研究对象,用PC12细胞存活率反映二者在不同浓度胰岛素作用下的功能。将0ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml的胰岛素分别加入BV2和Trk A+BV2细胞,培养20h后收集上清液,以备培养PC12细胞。按上清液的不同,将PC12细胞分为:BV2细胞处理组和Trk A+BV2细胞处理组,前者加入收集好的BV2细胞上清液,后者加入Trk A+BV2细胞上清液。继续培养PC12细胞1h,再加入H2O2损伤,用MTT法检测PC12细胞存活率。将TrkA+BV2细胞处理组的PC12细胞存活率与同等条件下的BV2细胞处理组进行对比,明确TrkA蛋白高表达对BV2细胞功能的影响。ELISA法检测不同浓度胰岛素作用下BV2及TrkA+BV2细胞NGF、IL-1β的分泌量。结果:1.当胰岛素浓度为0 ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml时,BV2细胞处理组的PC12细胞存活率依次为48.26±0.70%、52.02±0.67%、57.30±0.91%、60.71±1.51%、69.25±1.79%。对应胰岛素浓度下,Trk A+BV2细胞处理组的PC12细胞存活率依次为49.34±1.33%、62.06±0.70%、68.25±1.56%、73.19±2.38%、81.87±1.28%。PC12细胞存活率均随胰岛素浓度的增加而逐渐增高,单因素方差分析有统计学意义,组内两两比较,差异具有显著性(P0.01)。与同等条件下的BV2细胞处理组比较(除0 ng/ml浓度外),Trk A+BV2细胞处理组的PC12细胞存活率均显著升高(P0.01)。2.BV2与Trk A+BV2细胞NGF分泌量均随胰岛素浓度的升高而逐渐增多,其值分别为532.17±8.52ng/L VS 568.27±7.43ng/L(10ng/ml胰岛素)、569.18±9.36ng/L VS 593.17±11.10ng/L(25ng/ml胰岛素)、599.24±15.34ng/L VS 636.40±10.75ng/L(50ng/ml胰岛素)、635.06±12.35ng/L VS 678.72±13.46ng/L(75ng/ml胰岛素),单因素方差分析有统计学意义,组内两两比较,差异具有显著性(P0.05);与同等条件下的BV2细胞进行对比,Trk A+BV2细胞NGF的分泌量均显著升高(P0.05)。BV2与Trk A+BV2细胞IL-1β分泌量随胰岛素浓度的升高而逐渐减少,其量分别为17.77±0.58ng/L VS 17.87±0.66ng/L(10ng/ml胰岛素)、14.15±0.69ng/L VS 14.80±0.41 ng/L(25ng/ml胰岛素)、13.67±0.89ng/L VS 14.11±0.10ng/L(50ng/ml胰岛素)、11.53±1.54ng/L VS 11.76±0.84ng/L(75ng/ml胰岛素),单因素方差分析有统计学意义,除25ng/ml与50ng/ml的分泌量比较无差异外(P0.05),剩余组内两两比较差异均具有显著性(P0.05);TrkA+BV2细胞与同等条件下的BV2细胞进行对比,IL-1β的分泌量均无统计学意义(P0.05)。结论:1.小胶质细胞在一定范围浓度胰岛素刺激下(≤75ng/ml),通过分泌NGF发挥神经保护作用,且随着胰岛素浓度的增加NGF分泌量逐渐增多、神经保护作用逐渐增强。2.高Trk A表达的小胶质细胞与同等胰岛素浓度作用下的小胶质细胞进行对比(除0ng/ml胰岛素外),NGF分泌量进一步增多,从而发挥更强的神经保护作用。
【关键词】：小胶质细胞 TrkA蛋白 功能状态 胰岛素
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2;R747.9
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11
• 实验材料和仪器11-13
• 实验方法13-18
• 结果18-23
• 讨论23-25
• 结论25-26
• 参考文献26-28
• 综述28-37
• 参考文献33-37
• 致谢37-38

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本文编号：260102