海洋中药尖海龙化学物质基础研究

发布时间：2017-03-26 13:10

  本文关键词：海洋中药尖海龙化学物质基础研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：生药海龙为海龙科动物尖海龙、拟海龙、刁海龙的干燥体(《中国药典》)其中尖海龙Syngnathus acus Linn在分类学上属脊索动物门(Chordata)、硬骨鱼纲(Osteichthyes)、海龙目(Thalattosauria)、海龙科(Syngnathidae)鱼类,广泛分布于我国沿海地区。尖海龙的产地和性状均在《中国药典》进行了详细描述。20世纪80年代尖海龙的化学成分已经开始研究。采用GC-MS手段对尖海龙进行了组分鉴定,检测出其主要化学成分为甾体类以及脂肪酸类,DHA+EPA含量占到31%。在20世纪90年代,首次对尖海龙进行分离提取工作,从中分离纯化得到18个化合物,包括甾体化合物11个,脂肪酸3个,高级醇1个,酯类化合物和大黄酚等：尖海龙表现出了良好的延缓衰老、抗癌、抗疲劳、性激素样作用、增强免疫力、加强心肌细胞收缩力、治疗痹症,降低胆固醇等作用,表明尖海龙化学成分多样化,具有潜在的药用价值。已有研究对尖海龙研究大部分集中在生药形态鉴别、化学成分以及粗提物的药理活性等方面,但其指标成分以及有效成分尚不明确,鲜有尖海龙化学成分含量测定方法的报道。尖海龙Syngnathus acus Linn在我国又名钱串子、小海龙或杨枝鱼,主要分布在我国沿海地区,且资源丰富,尤其盛产于海南、山东、浙江等地。本课题组前期已经对尖海龙做了系统的定性研究,完成了TLC鉴别以及通识项检查,为新版《中国药典》海龙部分提供了完整的鉴别项及检查项研究资料。为全面控制尖海龙质量,本课题组于2014年2月份在山东省青岛市灵山岛收集了大量尖海龙,根据中药质量标准研究技术指导规范,通过TLC化学追踪,对尖海龙进行更加细致的化学成分研究,旨在分离纯化得到尖海龙指标性及有效性成分,为完善尖海龙质量标准体系奠定基础,对鉴别尖海龙真伪以及质量好坏有重要意义。以凝胶柱色谱LH-20、薄层色谱TLC、ODS柱色谱、硅胶柱色谱以及高效液相色谱HPLC等方法对尖海龙Syngnathus acus Linn的甲醇提取物进行分离,借助核磁共振谱、质谱等手段并结合了其理化性质确定14个化合物结构。化合物分别为：3β-Hydroxycholest-5-en-7-one(1),胆甾-5-烯-3β,7α二醇(2),胆甾-5-烯-3β,7 β-二醇(3),Cholesterol(4), 十六烷酸单甘油酯(5),2,2-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(6), Phenylacetate(7), 1-methylhydantoin(8), cyclo-(Ala-Pro)(9),2-piperidone(10),尿嘧啶(11),Hypoxanthine(12),胸腺嘧啶(13),2’-脱氧胸腺嘧啶核苷(14)。结合前期研究结果,化合物(4)为尖海龙主要成分,化合物(1)、(2)和(3)可作为尖海龙指标性成分。生物活性研究：选择K562(人红白血病细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、A549(人肺腺癌细胞)和HCT-116四种肿瘤细胞株,以阿霉素为阳性对照,采用MTT法或SRB法对6种单体化合物的体外抗肿瘤活性进行了初步评价,测试结果表明,化合物2和3显示较强的体外细胞毒活性。通过对尖海龙Syngnathus acus Linn化学成分以及生物活性的系统研究,得到了尖海龙指标性成分以及主要成分,为尖海龙有效成分研究提供科学依据,为完善海龙质量标准研究奠定基础,对鉴定尖海龙真伪及质量好坏有重要意义。
【关键词】：尖海龙 化学成分 甾醇 生物活性 指标性成分
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R284.1
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 前言12-16
• 参考文献15-16
• 第一章 尖海龙Sngnathus acus Linn研究综述16-46
• 1.1 尖海龙Syngnathus acus Linn研究综述16-26
• 1.1.1 尖海龙化学成分研究进展16-22
• 1.1.1.1 甾体类化合物16-18
• 1.1.1.2 脂肪酸类以及酯类18-20
• 1.1.1.3 蛋白质及氨基酸类20-21
• 1.1.1.4 微量元素21-22
• 1.1.1.5 磷脂类22
• 1.1.1.6 其他化合物22
• 1.1.2 尖海龙的生物活性22-26
• 1.1.2.1 加强心肌细胞收缩力23
• 1.1.2.3 抗肿瘤作用23-24
• 1.1.2.4 抗疲劳作用24-25
• 1.1.2.5 抗油脂作用25-26
• 1.1.2.6 提高免疫力作用26
• 1.2 含量测定研究进展26-43
• 1.2.1 毛细管电泳法26-27
• 1.2.2 GC-MS方法27
• 1.2.3 HPLC方法27-43
• 1.2.3.1 活性成分检测28-34
• 1.2.3.2 主要已知成分检测34-43
• 参考文献43-46
• 第二章 尖海龙Syngnathus acus Linn化学成分研究46-63
• 2.1 本论文分离得到的化合物46-48
• 2.2 部分化合物结构解析48-52
• 2.3 实验部分52-59
• 2.3.1 样品来源52
• 2.3.2 实验仪器52-53
• 2.3.3 实验材料及试剂53
• 2.3.4 尖海龙水提物53
• 2.3.5 样品的提取分离与纯化53-56
• 2.3.6 结果与分析56-59
• 2.3.6.1 化合物的理化数据56-59
• 2.4 实验小结59-61
• 参考文献61-63
• 第三章 尖海龙Syngnathus acus Linn生物活性研究63-70
• 3.1 生物活性实验63-68
• 3.1.1 实验材料63
• 3.1.2 实验方法63-68
• 3.2 小结与讨论68-69
• 参考文献69-70
• 结语与展望70-71
• 化合物名称对照表71
• 附图71-83
• 缩略语注释83-84
• 致谢84-85
• 个人简历及学术成果85

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