Ajuba来源的多肽调控脂肪分化的机制研究

发布时间：2017-03-26 22:08

  本文关键词：Ajuba来源的多肽调控脂肪分化的机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着生活质量的提高,人们在日常生活中往往摄入过多的能量,这些过多的能量便贮存到了脂肪组织,进而引发肥胖。大量研究表明肥胖与许多疾病相关,包括心血管疾病,II型糖尿病等,使得肥胖作为一种流行疾病,受到世界人们和研究者的广泛关注。Peroxisome Proliferator Activated Receptor(PPAR)核受体家族,尤其是PPAR?在脂肪组织发育和功能维持中发挥不可替代的作用,所以目前大部分脂代谢相关药物都是围绕着靶向该受体PPAR?。前期研究表明LIM蛋白Ajuba可以与PPAR?发生相互作用,进而正向调节该受体的活性,促进脂肪细胞的分化成熟。本文研究表明Ajuba(鼠源)的309-323位氨基酸介导了与PPAR?的DNA结合结构域与之相互作用关系。进一步分析309-323这一氨基酸序列,我们发现了其含有ERK家族激酶磷酸化位点,并且初步表明该位点的磷酸化可以增强Ajuba与PPAR?之间的相互结合。针对这一结合序列,我们合成了该短肽,在3T3-L1细胞系中加入该短肽能较明显干扰PPAR?和Ajuba的相互作用,进而降低PPAR?下游靶基因的表达。在3T3-L1细胞分化成脂肪细胞的过程中,加入一定浓度的该短肽,并作用相应的时间,我们可以发现脂肪细胞的分化程度在一定程度上有所降低。通过我们的初步研究,我们发现另一靶向PPAR?的多肽类药物,其可以通过干扰PPAR?与Ajuba的结合,降低PPAR?的转录活性,抑制下游靶基因的表达,进而抑制脂肪细胞的分化和功能,为治疗肥胖疾病提供了潜在的新药物。
【关键词】：肥胖 脂肪分化 PPAR LIM蛋白Ajuba
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R589.2
【目录】：

• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-23
• 1、质粒11-12
• 2、抗体12-13
• 3、细胞培养与传代13
• 4、转染13-14
• 5、蛋白质电泳与免疫印迹14-16
• 6、蛋白免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation，Co-IP)16-17
• 7、免疫荧光（Immunofluorescence，IF）17-18
• 8、RNA抽提、逆转录和PCR18-20
• 9、脂肪细胞分化与油红O染色20-23
• 结果23-36
• 1、Ajuba蛋白表达会促进脂肪分化23-24
• 2、Ajuba与PPARg的相互作用24-27
• 3、Ajuba蛋白中的 309-323位氨基酸与PPARg的DNA结合结构域相作用27-28
• 4. Ajuba通过蛋白分子中 311、313、316位氨基酸介导与PPARg的DNA结合结构域相作用28-30
• 5. 多肽的合成30-31
• 6.合成多肽药物渗透进入 3T3-L1细胞并且抑制PPARg下游靶基因的表达31-33
• 7.合成的多肽性药物能够抑制 3T3-L1细胞的分化33-36
• 讨论36-38
• 结论38
• 参考文献38-42
• 综述42-54
• 参考文献48-54
• 致谢54-55

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