甲基莲心碱对小鼠慢性溃疡性结肠炎的保护作用与机制研究

发布时间：2020-12-10 02:08

　　目的:甲基莲心碱（Neferine,Nef）是莲心中含量最高的生物碱,研究发现其具有保护心血管、抗血栓、抗氧化、抗肿瘤和抗炎等作用。我们前期研究显示,甲基莲心碱可显著改善急性溃疡性结肠炎小鼠的临床症状和炎症指标。本研究通过葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium,DSS）诱导的慢性溃疡性结肠炎小鼠模型评价甲基莲心碱的保护作用并探讨其可能的分子机制。方法:C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组（n=8）、DSS模型组（n=12）、Nef低剂量组（10 mg/kg,n=10）和Nef高剂量组（20 mg/kg,n=10）。按照Stefan Wirtz等建模方法进行慢性溃疡性结肠炎的建模。给药组灌胃给予甲基莲心碱,对照组和模型组给予1%吐温80。每日记录小鼠的一般情況、腹泻和血便等情况,测量小鼠体重、计算疾病活动指数评分（Disease activity index,DAI）。于第7周给予DSS结束后处死小鼠,收集血浆,利用ELISA法检测血浆中白细胞介素1β（Interleukin-1beta,IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

中药莲芯（A）和Nef的化学结构（B）

遵义医科大学硕士学位论文闵祥静15(2)模型组：n=12；(3)Nef低剂量组（DSS+Nef（10mg/kg））：n=10；(4)Nef高剂量组（DSS+Nef（20mg/kg））：n=10。1.2.2药物配制及动物给药药物配制：计算并精密称量三天所需甲基莲心碱总量→1%的吐温80助溶→加入相应体积ddH2O→分装，避光保存于4℃冰箱。动物给药：根据StefanWirtz所述[24]进行慢性溃疡性结肠炎的模型构建，其中，空白组在第1~7周自由饮用ddH2O；模型组以及给药组在第1、4、7周自由饮用2%DSS，第2、3、5、6周自由饮用ddH2O，其中，给药组根据当日体重灌胃给与相应体积药物（0.1ml/10g），空白组和模型组每周灌胃给与1%吐温80作为对照。具体操作如图2所示图2.DSS诱导的小鼠慢性溃疡性结肠炎造模示意图Fig.2DSS-inducedchroniculcerativecolitismodelinmice1.2.3疾病活动指数（DAI）评分计算实验开始后，每日称量小鼠的体重，观察小鼠的大便状态以及便血情况并进行评分；将评分进行统计学分析，评分标准参考DAI评分表[24]。评分标准（表4）及计算公式如下所示。此外，计算小鼠体重相较给药第一天的体重变化百分率，绘制小鼠体重变化百分率图[24-27]。表4.DAI评分标准

遵义医科大学硕士学位论文闵祥静222.结果2.1甲基莲心碱改善慢性UC小鼠的一般状态2.1.1甲基莲心碱降低慢性UC小鼠体重改变的百分率通过每日称量小鼠体重，计算小鼠体重下降百分率。结果如图3所示，小鼠第5周和第6周饮用ddH2O以及第7周饮用2%DSS造模后，与空白组小鼠相比，模型组小鼠体重下降的百分率较高，Nef给药组下降的百分率较低。此外，在模拟溃疡性结肠炎患者恢复期阶段的第5周和第6周，模型组小鼠和Nef给药组小鼠的体重均回升，但Nef给药组小鼠的体重回升幅度较模型组大。由此可见，随着给药时间的延长，甲基莲心碱可一定程度上抑制DSS诱导的慢性UC小鼠体重降低。图3.甲基莲心碱降低慢性UC小鼠体重变化百分率(±SD,n=6)。*P＜0.05vsControl.Fig.3NefreducedpercentagechangeinbodyweightofUCmice(±SD,n=6).*P＜0.05vsControl.2.1.2甲基莲心碱降低慢性UC小鼠DAI评分小鼠第1周饮用2%DSS造模后，模型组小鼠DAI评分显著上升，给药组DAI评分也上升，但其DAI评分明显低于模型组DAI评分；Nef给药组在第2周自由饮水三天后，DAI评分恢复至空白组水平，模型组在第2周自由饮水的四天后，DAI评分才恢复至空白组水平，恢复时间较Nef给药组时间长；第4周饮用2%DSS造模后，模型组小鼠从第一天开始，就出现腹泻等症状，DAI评分显著升高，Nef给药组小鼠在第二天才xx


本文编号：2907890