二甲双胍对PCL引起血管内膜增生的作用

发布时间：2020-12-16 00:14

　　目的:探讨载脂蛋白E（Apolipoprotein E,ApoE）基因敲除小鼠在内皮损伤情况下,左颈总动脉部分结扎术（Partial carotid ligation,PCL）对小鼠血管内膜增生、脂质数量、血管功能的影响,同时研究二甲双胍对PCL引起的小鼠血管损伤的保护作用。在细胞水平上研究二甲双胍对棕榈酸诱导内皮细胞损伤的作用及前动力蛋白2（Prokineticin 2,PK2）、前动力蛋白受体1（Prokineticin Receptor1,PKR1）、磷酸化内皮型一氧化氮合酶（Phosphate endothelial nitric oxide synthase,p-eNOS）、内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase,eNOS）蛋白表达水平的变化。方法:将ApoE基因敲除小鼠分为4组,分别是PD（Paigen’s high-fat diet）饮食组（对照组）、PD饮食+左颈总动脉部分结扎手术组（PCL手术组）、PD饮食+二甲双胍+手术组（PCL+二甲双胍组）、PD饮食+二甲双胍组（二甲双胍组）。通过HE染色法观察内膜增生情况;通过观... 

【文章来源】：湖北科技学院湖北省

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠颈动脉部分结扎术示意图

17结果1.二甲双胍抑制左颈总动脉内膜的增生为了研究二甲双胍对血管内膜的影响，我们将ApoE基因敲除小鼠的左颈总动脉用石蜡包埋，进行切片染色。结果显示，对照组结构完整，弹力膜较为模糊；二甲双胍组血管结构完整，弹力膜清晰。PCL手术组血管内膜增生严重，结构模糊，细胞核分布散乱，增生部分有大量空泡。PCL+二甲双胍组血管内膜增生较多，血管结构完整，细胞核分布有序如图2A。定量分析表明，相比于对照组，PCL手术组小鼠左颈总动脉中内膜增生面积显著增加(P<0.01)；相比于PCL手术组，PCL+二甲双胍组小鼠左颈总动脉内膜增生面积显著减少(P<0.05)。相比于对照组，二甲双胍组小鼠左颈总动脉内膜增生面积显著减少(P<0.01)如图2B。表明二甲双胍能抑制血管内膜的增生。图2二甲双胍缓解血管内膜的增生注：（A）左颈总动脉HE染色（放大倍数200×）及左颈总局部放大（放大倍数4000×）；（B）相比于对照组，PCL手术组小鼠左颈总动脉中内膜增生面积显著增加**P<0.01，n=4；相比于PCL手术组，PCL+二甲双胍组小鼠左颈总动脉内膜增生面积显著减少*P<0.05，n=4。相比于对照组，二甲双胍组小鼠左颈总动脉内膜增生面积显著减少**P<0.01，n=4。2.二甲双胍减少左颈总动脉中脂质含量为了评估二甲双胍对ApoE基因敲除小鼠血管中的脂质斑块的影响。我们分离小鼠左颈总动脉进行冰冻切片，油红O染色，对其定量分析。形态结果显示，对照组血管结构完整，血管弹力膜清晰可见，有少量脂质。二甲双胍组血管结构

18完整，血管弹力膜清晰可见，脂质区域不明显。PCL手术组血管中膜和内膜界限不明显，血管中脂质区域面积很大。PCL+二甲双胍组血管弹力膜清晰可见，中膜内膜界限模糊，血管中脂质区域面积较大如图3A；定量分析表明，相比于对照组，PCL手术组小鼠左颈总动脉中脂质面积显著增加(P<0.01)；相比于PCL手术组，PCL+二甲双胍组小鼠左颈总动脉脂质面积显著减少(P<0.05)。相比于对照组，二甲双胍组小鼠左颈总动脉脂质面积显著减少(P<0.01)如图3B。表明二甲双胍可以减少血管中脂质含量。图3二甲双胍减少血管中脂质含量注：（A）左颈总动脉油红O染色（放大倍数200×）；（B）相比于对照组，PCL手术组小鼠左颈总动脉中脂质面积显著增加**P<0.01，n=4；相比于PCL手术组，PCL+二甲双胍组小鼠左颈总动脉脂质面积显著减少*P<0.05，n=4。相比于对照组，二甲双胍组小鼠左颈总动脉脂质面积显著减少**P<0.01，n=4。3.二甲双胍减少左颈总动脉脂质斑块的形成我们观察了二甲双胍是否与左颈总动脉脂质斑块发展程度有关，将ApoE敲除小鼠的胸主动脉、主动脉弓、左右颈总动脉整体取出，置于10倍显微镜下拍照，观察对照组血管表面光滑，质地柔软，弹性较好。二甲双胍组血管表面光滑，质地柔软，弹性较好。PCL手术组血管表面粗糙，质地坚硬，硬化程度较大，弹性较差。PCL+二甲双胍组血管表面光滑，质地较硬，硬化程度较轻，弹性较好（4A）。定量分析结果显示，相比于对照组，PCL手术组小鼠左颈总动脉血管硬化长度与左颈总动脉血管总长度比值明显增加(P<0.01)；相比于PCL手术组，


本文编号：2919155