TGFβ1诱导MSCs向CAFs分化及促进CRC细胞侵袭

发布时间：2020-12-16 17:49

　　目的:1.证明转化生长因子β1（TGF-β1）参与间充质干细胞（MSCs）向肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）分化的过程,以及证明TGFβ1在促进结直肠癌细胞侵袭中起到的作用。2.证明TGFβ1通过JAK/STAT3信号通路来促进间充质干细胞（MSCs）向肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）分化。方法:利用结直肠癌HCT116和HT29细胞及骨髓间充质干细胞（MSCs）三种细胞株进行培养。用ELISA测定、细胞增殖实验、球体成形实验、transwell实验来验证转化生长因子β1（TGFβ1）在结直肠癌细胞侵袭中的作用。流式细胞仪检测间充质干细胞（MSCs）到肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）的分化。用qRT-PCR和Westernblot实验检测Janus激酶/信号转导子的活性和转录激活因子3（JAK/STAT3）相关激活蛋白的信号通路。结果:TGF-β1诱导间充质干细胞（MSCs）分化为肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）,并且促进HCT116和HT29细胞转移和侵袭。同时,TGF-β1还上调了STAT3的磷酸化和增强了p-STAT3的入核,这一结果表明了JAK/STAT3信号通路的激活。结论:TGF-... 

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（A）用无血清培养基培养HCT116和HT29细胞48小时后，保存培

TGFβ1诱导MSCs向CAFs分化及促进CRC细胞侵袭11的表达和入核，而AG490或P17则阻断了这一效应，这表明转化生长因子β1在转移中的作用是以STAT3依赖的方式进行的。图1：（A）用无血清培养基培养HCT116和HT29细胞48小时后，保存培养基，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测定TGF-β1、TNF-α、HGF和PDGF水平。*P<0.05，*P<0.01对Con-CM。注释：所有图片缩写：CON，对照；MSCs，间充质干细胞；CAFs，癌症相关的成纤维细胞；CM，条件培养基：CRC，结直肠癌图2：在无血清培养基（Con-CM）或HCT116或HT29条件培养基（HCT116-CM或HT29-CM）培养48小时的MSCs的条件。标尺，500μm。

硕士学位论文12图3：CCK-8法检测骨髓间充质干细胞在指定时间内的增殖。P<0.05，P<0.01对Con-CM。图4：用Con-CM和HCT116-CM或HT29-CM孵育MSCs的球体形成试验。标尺，500μm。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2920535