叶酸对宫颈上皮内瘤变细胞中E-Cadherin、Vimentin的影响

发布时间：2020-12-16 22:05

　　目的:宫颈上皮内瘤变（CIN）是与宫颈癌（CC）关系密切的一系列前驱病变。要研究CIN,必须要有一个稳定良好的细胞模型。携带HPV16/E6E7病毒的永生化宫颈鳞状细胞Ect1/E6E7模型可作为体外细胞模型进行生物学研究。探讨叶酸对Ect1/E6E7细胞生物学特征以及宫颈病变相关标志物E-钙粘蛋白（E-Cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达的影响,进而分析叶酸对宫颈癌前病变的影响。方法:1.使用组织法、酶消法体外培养建立CIN细胞模型,利用免疫荧光技术进行鉴定;2.常规培养宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7,将Ect1/E6E7细胞株进行复苏,传代实验;3.叶酸浓度0、10、100、200、1000、2000nM分组分别干预Ect1/E6E7细胞24h、48h,用MTT法检测叶酸对Ect1/E6E7细胞的抑制率,检测不同浓度叶酸对Ect1/E6E7细胞增殖的影响;4.Western Blot检测叶酸浓度0、10、100、200、1000、2000nM分组培养的Ect1/E6E7细胞中E-Cadherin、Vimentin的表达情况。结果:1.进行的体外CIN细胞原代培... 

【文章来源】： 王卉 山西医科大学

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

细胞的生长特点℃、浓度5%CO2、湿度95%的培养箱中，使用无血清的Ect1/E6E7细胞较宫颈癌细胞Siha、Hela

CK5CK14CK17CK19P632.3Ect1/E6E7细胞的生长特点Ect1/E6E7细胞在37K-SFM完全培养基培养，细胞长势较好。生长慢，适宜条件下于T25态不一，核较大。山西医科大学硕士学位论文8DAPI图1-1细胞的生长特点℃、浓度5%CO2、湿度95%的培养箱中，使用无血清的Ect1/E6E7细胞较宫颈癌细胞瓶培养，5天左右长满瓶底，呈团簇状聚集MergeSiha、Hela天左右长满瓶底，呈团簇状聚集生长，大小形

Q塅顄漄硃漄塂漄顁漄础堿漄頾漄砽堼漄頻顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄顊漄頺砺漄頸漄砷漄堶頵漄漄堳頲漄報漄砰堯漄ば漄は漄偮顊漄顊漄顊漄顊漄偭ね漄灭遫に怼遪偩遨と灧偦遥づS偤遣っ灢遠だ偟悲肯?悱肳悴ヒ郍鴇烍ノ?鴇悔肍惐げ郏山西医科大学硕士学位论文14孔板，吸去培养基，分别加入10、100、20010ulMTT和90ulK-SFM多加一列即调零孔，做对照。将该96孔板置于37℃，5%CO2孵箱培养孔培养板，用移液枪吸弃培养基，分别加入110ul处各孔的吸光值OD；根据OD值计算叶酸对细胞的抑48h的细胞结果（图2-1）。图2-1MTT检测细胞增殖的实验技术路线检测各组相关蛋白的表达Ect1/E6E7细胞，调整细胞悬液浓度，分于细胞和1200ul的K-SFM培养基，置于37孔板中细胞覆盖率达80%~90%时，分别添加不同浓度叶酸RIPA：PMSF100:1），每孔加100ul，用刮匙充分刮取僞颤瘇、1000、2000nMSFM培养基，最后4h；的Formazan溶解细胞，调整细胞悬液浓度，分于六孔板，每孔℃，5%CO2孵箱加不同浓度叶酸0、10、100、用刮匙充分刮取各


本文编号：2920856