BCP/PC突变对慢性乙型肝炎小鼠模型表型影响的研究

发布时间：2020-12-21 13:35

　　研究背景与目的乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）感染是一个重大的公共卫生问题,全世界约有2.48亿人感染HBV,其慢性感染可导致一系列严重的肝脏疾病,包括肝纤维化（liver fibrosis）,肝硬化（liver cirrhosis,LC）和肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）。HBV具有种属特异性和组织特异性,同时还具有高复制和高突变率特性,其常见的基因突变位点为基础核心启动子（Basic Core Promoter,BCP）区的1762（A1762T）和1764（G1764A）及前核心（Pre-Core,PC）区的1896（G1896A）和1899（G1899A）。体外实验或临床样本研究已发现,BCP/PC联合突变会阻断或降低HBeAg表达,然而,BCP/PC联合突变对HBV表型的更多影响尚未报道。本实验在前期BCP/PC联合突变（BCP/PC（M））小鼠模型的基础上,建立回复突变（BCP/PC（R））慢性乙型肝炎小鼠模型,通过对比分析研究BCP/PC联合突变对HBV主要标志物表型、机体免疫表型的影响,为临床诊断和探讨BCP... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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大小片段扩增结果

重庆医科大学硕士研究生学位论文25图1.2BspQI酶切pEASY-HBV/BCP/PC（R）质粒。泳道1：5000bpMarker；泳道2：BspQI酶切pEASY-HBV/BCP/PC（R）质粒；泳道3：pEASY-HBV/BCP/PC（M）质粒阳性对照。Fig1.2pEASY-HBV/BCP/PC（R）plasmidwasdigestedbyBspQIrestrictionenzyme.Lane1:5000bpMarker;Lane2:plasmidwasdigestedbyBspQIrestrictionenzyme;Lane3:pEASY-HBV/BCP/PC（M）plasmidpositivecontrol.3.1.3Sanger测序测序结果表明四个位点回复突变成功，pEASY-BCP/PC（R）HBV质粒构建成功。3.2cccDNA的鉴定3.2.1酶切鉴定EcoRI酶切鉴定cccDNA，结果如图1.3所示。由于HBV基因组含有EcoRI的酶切位点，因此线状HBV可被EcoRI酶切消化成两个DNA片段，环状的DNA被EcoRI酶切消化后只产生一条链状的线性HBV。

cccDNA的鉴定

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2929916