CD137信号通过TRAF6/JNK/AP-1调控小鼠平滑肌细胞活化T细胞核因子c1表达

发布时间：2021-01-07 16:46

　　目的探寻CD137-CD137L受体-配体互相作用是否通过TRAF6/JNK/AP-1信号通路影响小鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）活化T细胞核因子c（NFATc1）的表达。方法组织贴块法原代培育小鼠VSMC,取第4代细胞用于试验。VSMC分为6组:对照组、CD137激动组、CD137拮抗组、siTRAF6干预组、siJNK干预组及siAP-1干预组。各组TRAF6、磷酸化JNK（p-JNK）、磷酸化AP-1（p-AP-1）及NFATc1蛋白表达程度用Western blot检测。各组细胞TRAF6、p-JNK、p-AP-1及NFATc1的分布情况用免疫荧光法检测。TRAF6、JNK、AP-1采用小干扰RNA技术沉默表达。TRAF6、JNK、AP-1及NFATc1 mRNA水平的表达通过实时荧光定量PCR来测定;细胞凋亡和增殖情况采用流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）和CCK-8实验来检测。结果（1）CCK-8检测显示:CD137-CD137L信号激活后,血管平滑肌细胞可以发生明显的增殖。（2）与对照组比较,CD137激动组（CD137-CD137L信号激活）TRAF... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
常用缩略词对照表
第一章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 TRAF6 及 JNK 在心血管疾病中的作用
        1.2.1 TRAF6的结构及生物学特性
        1.2.2 JNK的结构及生物学特性
        1.2.3 TRAF6/JNK 信号在动脉粥样硬化中的作用
        1.2.4 展望
    1.3. NFATc1在心血管疾病中的作用
        1.3.1 TRAF6的结构及生物学特性
        1.3.2 NFATc1与动脉粥样硬化的关系
        1.3.3 NFATc1与动脉血管钙化的关系
        1.3.4 NFATc1与血管平滑肌细胞的关系
        1.3.5 展望
    1.4 研究目的、内容与意义
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究内容
        1.4.3 研究意义
第二章 CD137信号通过激活TRAF6/JNK/AP-1 通路影响小鼠VSMC活化T细胞核因子c1的表达
    2.1 材料
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂及耗材
        2.1.3 主要溶液及成份
        2.1.4 手术器械
        2.1.5 实验动物
    2.2 方法
        2.2.1 VSMC分离、培养及鉴定
        2.2.2 血管平滑肌细胞的实验分组及干预
        2.2.3 RT-qPCR分析
        2.2.4 流式细胞术检测
        2.2.5 细胞蛋白的提取及Western blot法检测
        2.2.6 CCK-8 的检测
        2.2.7 免疫荧光法检测
        2.2.8 统计学方法分析
    2.3 结果
    2.4 讨论
第三章 结论
参考文献
综述 CD137-CD137L相互作用调控NFATc1启动血管钙化的机制研究
    参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]CD137信号通过核因子κB影响小鼠主动脉平滑肌细胞活化T细胞核因子c1表达[J]. 殷云杰,严金川,王中群,刘培晶,梁仪.  中华心血管病杂志. 2015 (07)
[2]干预CD137-CD137配体轴对载脂蛋白E基因敲除小鼠活化T细胞核因子c1表达的影响[J]. 杨海兵,严金川,苏红玲,袁伟,徐良洁.  中华心血管病杂志. 2012 (09)
[3]活化T细胞核因子与急性冠脉综合征的相关性研究[J]. 徐安妨,杨丽霞,齐峰,郭传明,王先梅,郭瑞威.  岭南心血管病杂志. 2010(05)
[4]我国心血管病及其主要危险因素的流行病学研究[J]. 王薇,赵冬.  首都医科大学学报. 2005(02)
[5]锌指蛋白A20及其对炎症反应的调控[J]. 吴丽娟,康格非.  生命的化学. 2004(03)



本文编号：2962892